Dulbecco's Modified Eagle Medium F12 (DMEM F12)
W ostatnich latach naukowcy donosili o hodowli różnych linii komórkowych w pożywkach niezawierających surowicy, które zawierają suplementy składników odżywczych, czynników wzrostu i hormonów zamiast surowicy. Mather i Sato (BBRC, 1985) zgłosili udaną hodowlę komórek Leydiga i Sertoliego w pożywce bez surowicy, która zawierała insulinę, transferynę, naskórkowy czynnik wzrostu, hormon leutynizujący lub hormon folikulotropowy, somatomedynę i hormon wzrostu.Chociaż hormony i ich stężenia są specyficzne dla badanego typu komórek, pożywką uznaną za optymalną dla tych badań była mieszanina 1:1 pożywki Dulbecco Modified Eagle's Medium (DMEM) i Ham's F-12 Nutrient Mixture. Mieszanina ta znana jako pożywka DMEM/F12 zawiera 21 aminokwasów, 10 witamin, glukozę, żelazo i cynk, wśród innych składników.
DMEM/F12 jest bogatszą i bardziej złożoną pożywką niż DMEM. Bufor HEPES może być również zawarty w preparacie w końcowym stężeniu 15 mM, aby zrekompensować utratę zdolności buforowania, która jest spowodowana wyeliminowaniem surowicy. Ta syntetyczna pożywka nie zawiera surowicy, białek, lipidów ani czynników wzrostu, a zatem może wymagać uzupełnienia o płodową surowicę bydlęcą (FBS) w zależności od rodzaju hodowli komórkowej. Niektóre komercyjne preparaty mogą zawierać glutaminę lub czerwień fenolową.
Zastosowania DMEM/F12
Zaawansowana pożywka podstawowa DMEM/F12 jest często używana w zastosowaniach wymagających pożywek o niskiej zawartości surowicy lub bez surowicy, takich jak hodowla organoidów 3D lub hodowla komórek macierzystych. Podłoże DMEM/F12 może być również stosowane do optymalizacji transfekcji komórkowych, które wymagają warunków o niskiej zawartości surowicy lub bez surowicy.
Oprócz hodowli komórek macierzystych, które często wymagają środowiska o obniżonej zawartości surowicy lub bez surowicy, komórki pierwotne mogą być hodowane w podłożu DMEM/F12. Obejmuje to fibroblasty, komórki MDCK, neuronalne linie komórkowe, komórki glejowe i komórki mięśni gładkich, które wykazują równoważny lub lepszy wzrost i funkcję niż komórki pierwotne, które zostały uzupełnione wysokimi stężeniami surowicy. Komórki hodowane w pożywce DMEM/F12 wykazują również taką samą morfologię jak komórki hodowane w warunkach wysokiego stężenia surowicy.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?