Przejdź do
PP2394
Zestaw wektorów znaczników bakteryjnych FLAG®
plasmid vectors for molecular cloning
Synonim(y):
szybki wektor
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Informacje o tej pozycji
NACRES:
NA.85
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: OXB20
Promoter activity: constitutive
Promoter type: bacterial
Promoter activity: constitutive
Promoter type: bacterial
Origin of replication:
pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Peptide cleavage:
TEV, no cleavage
tag
FLAG® tagged
form
buffered aqueous solution
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
pUC (500 copies)
peptide cleavage
TEV, no cleavage
peptide tag location
C-terminal, N-terminal
promoter
Promoter name: OXB20
Promoter activity: constitutive
Promoter type: bacterial
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
Klonowanie molekularne często korzysta z optymalizacji wektora używanego do ekspresji.
Ten pakiet umożliwia porównanie umieszczania znaczników epitopowych FLAG na N lub C końcu interesującego genu (wstawionego do MCS, pod kontrolą transkrypcji silnego promotora bakteryjnego OXB20) z miejscem rozszczepienia proteazy TEV (Tobacco Etch Virus), a także bez niego. Miejsce TEV umożliwia usunięcie znacznika FLAG z białka po jego wyprodukowaniu. Porównanie tych czterech konfiguracji powinno umożliwić ocenę najlepszego sposobu ekspresji i wykrywania interesującego genu z komórek bakteryjnych. Ten zestaw plazmidów został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie używanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny można wstawiać przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.
Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: Istnieje kilka ważnych miejsc w MCS. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca poniżej do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI. Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA od kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania. Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początki i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne lokalizacje kodonów start i stop.
Zakończenie transkrypcji: Plazmidy te zawierają trzy alternatywne terminatory transkrypcji dla ekspresji bakterii ssaków i bakteriofagów (T7). Oznacza to, że tylko promotor musi zostać zmieniony, aby zmienić używany system ekspresji. Sprzedajemy wiele promotorów, które mogą być używane w każdym z tych systemów. Obecność każdego terminatora nie zmniejsza ekspresji w alternatywnych systemach.
Ten pakiet umożliwia porównanie umieszczania znaczników epitopowych FLAG na N lub C końcu interesującego genu (wstawionego do MCS, pod kontrolą transkrypcji silnego promotora bakteryjnego OXB20) z miejscem rozszczepienia proteazy TEV (Tobacco Etch Virus), a także bez niego. Miejsce TEV umożliwia usunięcie znacznika FLAG z białka po jego wyprodukowaniu. Porównanie tych czterech konfiguracji powinno umożliwić ocenę najlepszego sposobu ekspresji i wykrywania interesującego genu z komórek bakteryjnych. Ten zestaw plazmidów został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie używanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny można wstawiać przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.
Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: Istnieje kilka ważnych miejsc w MCS. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca poniżej do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI. Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA od kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania. Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początki i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne lokalizacje kodonów start i stop.
Zakończenie transkrypcji: Plazmidy te zawierają trzy alternatywne terminatory transkrypcji dla ekspresji bakterii ssaków i bakteriofagów (T7). Oznacza to, że tylko promotor musi zostać zmieniony, aby zmienić używany system ekspresji. Sprzedajemy wiele promotorów, które mogą być używane w każdym z tych systemów. Obecność każdego terminatora nie zmniejsza ekspresji w alternatywnych systemach.
Analysis Note
To view the Certificate of Analysis for this product, please visit www.oxfordgenetics.com.
Other Notes
Linki do sekwencji Genebank, sekwencji FASTA, mapy plazmidu Quick-reference i pełnej mapy plazmidu znajdują się na stronie poszczególnych produktów wektorowych.
Szukasz więcej opcji wektorów, aby przyspieszyć swoje eksperymenty? Rozważ niestandardowy wektor do klonowania zaprojektowany i zbudowany przez Oxford Genetics™. Więcej informacji można znaleźć na stronie Oxford Genetics - partnera firmy Sigma w zakresie wektorów do klonowania i ekspresji do zastosowań w biologii molekularnej i biologii syntetycznej.
Legal Information
Plazmidy te są sprzedawane bez praw dostępu i mogą być wykorzystywane do wytwarzania produktów komercyjnych. Jednak same plazmidy (lub ich pochodne) nie mogą być sprzedawane.
FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oxford Genetics is a trademark of Oxford Genetics Ltd
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Tylko elementy zestawu
Numer produktu
Opis
- PSF-OXB20-NH2-FLAG®-TEV - N-TERMINAL FLAG® TAG BACTERIAL PLASMID, plasmid vector for molecular cloning
- PSF-OXB20-COOH-TEV-FLAG® - C-TERMINAL FLAG® TAG BACTERIAL PLASMID, plasmid vector for molecular cloning
Klasa składowania
12 - Non Combustible Liquids
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.