PP2369

Zestaw wektorów YFP

plasmid vectors for molecular cloning

• Synonim(y): cloning vector, expression vector, molecular cloning vector, plasmid, plasmid vector, vector
• NACRES: NA.85
• UNSPSC Code: 12352200
• Promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• Origin of replication: pUC (500 copies)
• Bacteria selection: ampicillin
• Reporter gene: YFP

Właściwości

• form: buffered aqueous solution
• bacteria selection: ampicillin
• origin of replication: pUC (500 copies)
• promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• reporter gene location: 2nd promoter, MCS
• reporter gene: YFP
• shipped in: ambient
• storage temp.: −20°C

Opis

General description

Klonowanie molekularne często korzysta z optymalizacji wektora używanego do ekspresji.

Ten pakiet pozwala określić najlepszą konfigurację dla genu reporterowego Yellow Fluorescence Protein (wariant nie-Aequorea o nazwie Kringle YFP) i zoptymalizować ekspresję pod kątem konkretnych potrzeb. Każdy plazmid składowy zawiera reporter żółtej fluorescencji regulowany w inny sposób - w MCS pod promotorem CMV, pod IRES lub regulowany przez własny wybrany promotor, lub regulowany przez niezależne promotory bezpośrednio za MCS (dzielące polyA z genem wstawionym do MCS) lub w innej części plazmidu. Ten pakiet powinien umożliwić porównanie różnych strategii ekspresji żółtej fluorescencji i wybranie tej, która najlepiej odpowiada Twoim potrzebom. Ten zestaw plazmidów został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie używanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny można wstawiać przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.

Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: Istnieje kilka ważnych miejsc w MCS. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca poniżej do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI. Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA z kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania. Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początek i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne lokalizacje kodonów start i stop.

Zakończenie transkrypcji: Plazmidy te zawierają trzy alternatywne terminatory transkrypcji dla ekspresji bakterii ssaków i bakteriofagów (T7). Oznacza to, że tylko promotor musi zostać zmieniony, aby zmienić używany system ekspresji. Sprzedajemy wiele promotorów, które mogą być używane w każdym z tych systemów. Obecność każdego terminatora nie zmniejsza ekspresji w alternatywnych systemach.

Analysis Note

To view the Certificate of Analysis for this product, please visit www.oxfordgenetics.com.

Other Notes

Szukasz więcej opcji wektorów, aby przyspieszyć swoje eksperymenty? Rozważ niestandardowy wektor do klonowania zaprojektowany i zbudowany przez Oxford Genetics^™. Więcej informacji można znaleźć na stronie Oxford Genetics - partnera firmy Sigma w zakresie wektorów do klonowania i ekspresji do zastosowań w biologii molekularnej i biologii syntetycznej.

Legal Information

Plazmidy te są sprzedawane bez praw dostępu i mogą być wykorzystywane do wytwarzania produktów komercyjnych. Jednak same plazmidy (lub ich pochodne) nie mogą być sprzedawane.

Oxford Genetics is a trademark of Oxford Genetics Ltd

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Elementy zestawu są też dostępne oddzielnie

• OGS611 PSF-CMV-PGK-KRYFP - YFP MAMMALIAN PGK PROMOTER PLASMID, plasmid vector for molecular cloning
• OGS513 PSF-CMV-UB-KRYFP - MAMMALIAN YFP REPORTER VECTOR, plasmid vector for molecular cloning
• OGS521 PSF-CMV-FMDV-KRYFP - FMDV IRES YFP REPORTER VECTOR, plasmid vector for molecular cloning
• OGS614 PSF-PA-PROMMCS-KRYFP - PROMOTERLESS MULTIPLE CLONING SITE YFP PLASMID, plasmid vector for molecular cloning

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable