MGECKO2G

Gecko2 Mouse Whole Genome CRISPR Pool, gRNA Only Lenti Particles (wektor Gecko2)

• NACRES: NA.51
• UNSPSC Code: 12352200

Właściwości

• packaging: pkg of 8x25 μL (vials)
• Quality Segment: 200
• concentration: 5x10⁸ VP/ml (via p24 assay)
• application(s): CRISPR; CRISPR
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −70°C

Opis

General description

Opracowane przez laboratorium Fenga Zhanga w Broad Institute, mysie biblioteki GeCKO v2 (system dwóch wektorów) składają się z ponad 100 000 unikalnych gRNA do nokautowania genów w genomie myszy. Wykorzystując podwójny wektor lenti CRISPR, w którym połączone biblioteki będą wyrażać tylko gRNA (z wektorem lentiGuide-Puro), system ten wytwarza ponad 100-krotnie wyższe miano wirusa w porównaniu do wersji 1. Pula lentiGuide-Puro powinna być używana tylko w liniach komórkowych z już zintegrowanym Cas9 (który można wygenerować za pomocą oddzielnego wektora lenti-Cas9-Blast). Pula lentiwirusowego mysiego RNA GeCKO firmy Sigma jest dostarczana wyłącznie w podwielokrotnościach 8 x 25 ul przy minimalnym mianie 5X10^8 TU/ml (mierzonym za pomocą testu p24).

Każda biblioteka specyficzna dla gatunku jest dostarczana jako dwie półbiblioteki (A i B). Zaleca się przesiewanie obu bibliotek A i B razem, które będą zawierać 6 sgRNA na gen (3 sgRNA w każdej bibliotece). Obie biblioteki zawierają 1000 niecelujących kontrolnych sgRNA. Biblioteka A jest również ukierunkowana na miRNA (4 sgRNA na miRNA).

Application

Genomika funkcjonalna / screening / walidacja celów

Features and Benefits

• Wykorzystanie nukleaz CRISPR do eliminacji genów kodujących białka w celu oceny ich funkcji.
• Efektywne badanie całego ludzkiego genomu (ponad 16 000 genów) na stanowisku badawczym bez użycia robotów lub specjalistycznego sprzętu.
• Liczne wbudowane kontrole wzbogacania i pozbawiania pozwalają badaczom na pewną ocenę powodzenia ich zbiorczych eksperymentów przesiewowych - Lentiwirusowe CRISPR mogą infekować szeroką gamę komórek ssaków poprzez transdukcję pojedynczego RNA przewodnika (sgRNA) do mysiej linii komórkowej z ekspresją Cas9, aby ułatwić nokaut genów w zastosowaniach przesiewowych.
• Użyj systemu podwójnego wektora dla mysich bibliotek GeCKO w wersji 2 dla mysich linii komórkowych, które mają Cas9 już zintegrowany z genomem.
• Po transdukcji należy zastosować selekcję gRNA puromycyną.

Preparation Note

Krzywa zabijania Puro i określanie CFU (jednostki tworzenia kolonii) na ml. Przed wykonaniem badań przesiewowych w skali biblioteki należy przeprowadzić dwa wstępne eksperymenty. Odwiedź stronę Sigma.com/pooledscreening.

Other Notes

This product is for R&D use only, not for drug, household, or other uses. Please consult the Material Safety Data Sheet for information regarding hazards and safe handling practices. Though the lentiviral transduction particles produced are replication incompetent, it is recommended that they be treated as Risk Group Level 2 (RGL-2) organisms in laboratory handling. Follow all published RGL-2 guidelines for laboratory handling and waste decontamination.

Legal Information

CRISPR Use License Agreement

Lentiviral License Agreement

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Co się dzieje?: WGK 3
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable