MGECKO2A

Pula CRISPR całego genomu myszy Gecko2, 864 cząsteczki Lenti (wektor Gecko2)

• Kod UNSPSC: 12352200
• NACRES: NA.51

Właściwości

• opakowanie: pkg of 8x25 μL (vials)
• Poziom jakości: 200
• stężenie: 5x10⁸ VP/ml (via p24 assay)
• Zastosowanie: CRISPR
• Warunki transportu: dry ice
• temp. przechowywania: −70°C

Opis

Opis ogólny

Opracowane przez laboratorium Fenga Zhanga w Broad Institute, mysie biblioteki GeCKO v2 (wektor all-in-one) składają się z ponad 100 000 unikalnych gRNA do nokautowania genów w genomie myszy. Wykorzystując wektor all-in-one lenti CRISPR, który współeksprymuje Cas9, gRNA z markerem selekcyjnym puromycyny, wektor w wersji 2 wytwarza prawie 10-krotnie wyższe miano niż wersja 1. Lentiwirusowa mysia pula GeCKO all-in-one firmy Sigma jest dostarczana w podwielokrotnościach 8 x 25 ul przy minimalnym mianie 5X10^8 TU/ml (mierzonym testem p24).

Każda biblioteka specyficzna dla gatunku jest dostarczana jako dwie półbiblioteki (A i B). Zaleca się przesiewanie obu bibliotek A i B razem, które będą zawierać 6 sgRNA na gen (3 sgRNA w każdej bibliotece). Obie biblioteki zawierają 1000 niecelujących kontrolnych sgRNA. Biblioteka A jest również ukierunkowana na miRNA (4 sgRNA na miRNA).

Zastosowanie

Genomika funkcjonalna / screening / walidacja celów

Cechy i korzyści

• Wykorzystanie nukleaz CRISPR do eliminacji genów kodujących białka w celu oceny ich funkcji.
• Efektywne badanie całego ludzkiego genomu (ponad 16 000 genów) na stole laboratoryjnym bez użycia robotów lub specjalistycznego sprzętu.

Liczne wbudowane kontrole wzbogacania i pozbawiania pozwalają badaczom z pewnością ocenić sukces ich eksperymentów przesiewowych.

• Użyj jednego systemu wektorowego dla mysich bibliotek GeCKO w wersji 2 w zastosowaniach, w których Cas9 nie może być wprowadzony do komórek myszy (np. w komórkach pierwotnych).
• Lentiwirusy CRISPR mogą infekować szeroką gamę komórek ssaków poprzez współekspresję nukleazy Cas9 zoptymalizowanej pod kątem kodonów ssaków wraz z pojedynczym RNA prowadzącym (sgRNA) w celu ułatwienia nokautowania genów.
• Użyj puromycyny do selekcji po transdukcji.

Uwaga dotycząca przygotowania

Krzywa zabijania Puro i określanie CFU (jednostki tworzenia kolonii) na ml. Przed wykonaniem badań przesiewowych w skali biblioteki należy przeprowadzić dwa wstępne eksperymenty. Odwiedź stronę Sigma.com/pooledscreening.

Inne uwagi

This product is for R&D use only, not for drug, household, or other uses. Please consult the Material Safety Data Sheet for information regarding hazards and safe handling practices. Though the lentiviral transduction particles produced are replication incompetent, it is recommended that they be treated as Risk Group Level 2 (RGL-2) organisms in laboratory handling. Follow all published RGL-2 guidelines for laboratory handling and waste decontamination.

Informacje prawne

CRISPR Use License Agreement

Lentiviral License Agreement

All-in-One is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 3
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable