B20224

Mieszanka kolagenazy i elastazy

Tissue dissociation blend, lyophilized powder, suitable for cell culture

• Synonim(y): Clostridium histolyticum, Elastaza, Klostridiopeptydaza A, Pankreatopeptydaza E, kolagenaza, mieszanka dysocjacji tkanek, mieszanka enzymów, mieszanka kolagenazy
• NACRES: NA.71
• UNSPSC Code: 12352204
• Assay: (enzymatic)
• Concentration: 1 mg/mL (Collagenase)

Właściwości

• Quality Level: 200
• assay: (enzymatic)
• form: lyophilized powder
• concentration: 1 mg/mL (Collagenase)
• technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• shipped in: dry ice
• storage temp.: -10 to -25°C

Opis

General description

Mieszanka kolagenazy i elastazy to koktajl enzymów do dysocjacji tkanek w celu izolacji komórek. Proces dysocjacji tkanek polega na uwolnieniu funkcjonalnych i żywotnych komórek z tkanek zwierzęcych, przy minimalnym wpływie na żywotność komórek. Głównym odczynnikiem stosowanym w procesie dysocjacji tkanek jest kolagenaza. Kolagenazy to enzymy, które rozkładają natywny kolagen utrzymujący tkanki zwierzęce razem. Drugim enzymem znajdującym się w naszej mieszance jest elastaza: proteaza serynowa, która również hydrolizuje amidy i estry. Jest ona wytwarzana w trzustce jako nieaktywny zymogen i aktywowana w dwunastnicy przez trypsynę. Podczas gdy elastaza hydrolizuje szeroką gamę substratów białkowych, jest wyjątkowa wśród proteaz pod względem zdolności do hydrolizy natywnej elastyny, substratu nieatakowanego przez trypsynę, chymotrypsynę lub pepsynę. Elastyna, składnik macierzy tkanek biorących udział w procesach rozciągania, występuje w najwyższych stężeniach w elastycznych włóknach tkanki łącznej. Elastaza jest często stosowana do dysocjacji tkanek, które zawierają rozległe sieci włókien międzykomórkowych. W tym celu jest zwykle stosowana z innymi enzymami, takimi jak kolagenaza, trypsyna i chymotrypsyna. Elastaza jest enzymem z wyboru do izolacji komórek typu II z płuc.

Biochem/physiol Actions

Kolagenaza: Skuteczne uwolnienie komórek z tkanki wymaga działania enzymów kolagenazy. Kolagenaza jest aktywowana przez cztery gramy wapnia (^Ca2+) na mol enzymu. Optymalne pH wynosi 6,3-8,8. Enzym ten jest zwykle stosowany do trawienia składników łącznych w próbkach tkanek w celu uwolnienia poszczególnych komórek. Leczenie kolagenazą może spowodować śmierć niektórych komórek. Zazwyczaj do trawienia stosuje się stężenia od 0,1 do 5 mg/ml. Czas trwania reakcji waha się od 15 minut do kilku godzin i zapewnia zadowalającą dysocjację komórek bez powodowania zbyt dużej ich śmierci. Elastaza: hydrolizuje elastynę, specyficzne białko włókien elastycznych i trawi hemoglobinę, kazeinę i fibrynę. Rozszczepia białko po stronie karboksylowej małych aminokwasów hydrofobowych, takich jak Ile, Gly, Ala, Ser, Val i Leu. Enzym hydrolizuje również amidy i estry, takie jak ester metylowy N-benzoilo-L-alaniny. Optymalne pH wynosi 8,0-8,5. Nie wymaga żadnego aktywatora, ale jest hamowany przez fluorofosforan diizopropylu, fluorek fenylometanosulfonylu, α2-makroglobulinę, α1-antytrypsynę, fluorki sulfonylu i dietylofosforan p-dinitrofenylu oraz wysokie stężenia soli. Rozszczepia białko po stronie karboksylowej małych aminokwasów hydrofobowych, takich jak Ile, Gly, Ala, Ser, Val i Leu. Enzym hydrolizuje również amidy i estry, takie jak ester metylowy N-benzoilo-L-alaniny.

Preparation Note

Dla stężenia roboczego: Kolagenaza 1 mg/ml, Elastaza 3 jednostki/ml, odtworzyć liofilizowany proszek z 10 ml zbilansowanego roztworu soli Hanka z wodorowęglanem sodu, bez czerwieni fenolowej, chlorku wapnia i siarczanu magnezu (#H6648).

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• pictograms: GHS08,GHS07
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Klasa składowania: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3