HTS182M

Preparat błonowy ChemiSCREEN Rekombinowany ludzki receptor prokinetyny PK ₂

• Kod UNSPSC: 41106514
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.45

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: human
• Poziom jakości: 100
• rekombinowane: expressed in Chem-1 cells
• Formularz: liquid
• producent / nazwa handlowa: ChemiScreen; Chemicon^®
• metody: ligand binding assay: suitable (GTPγS); radioligand binding assay (RLBA): suitable
• numer dostępu NCBI: NM_144773.2
• numer dostępu UniProt: Q8NFJ6

Opis

Opis ogólny

Pełnej długości ludzki cDNA GPR73L1 kodujący _PK2

Prokinetyny, znane również jako czynniki wzrostu śródbłonka naczyniowego gruczołów dokrewnych (EG-VEGF), to dwa wydzielane białka o masie ~10 kD, pierwotnie opisane jako pośredniczące w angiogenezie i skurczu mięśni gładkich przewodu pokarmowego (Li i in., 2001; LeCouter i in., 2003). Następnie stwierdzono, że prokinetyny pośredniczą w funkcjach ośrodkowego układu nerwowego, w tym w rytmach okołodobowych i rozwoju opuszki węchowej (Cheng i in., 2002; Ng i in., 2005). Dwa receptory sprzężone z _Gq, _PK1 i _PK2 (znane również jako GPR73a i GPR73b), pośredniczą w odpowiedziach komórkowych na prokinetyny (Lin i in., 2002). Preparaty błonowe _PK2 firmy Millipore są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych agonistów i antagonistów _PK2. Preparaty błonowe wykazują _Kd 0,36 nM dla^[125I]-MIT-1. Przy 0,3 nM^[125I]-MIT-1, preparat membranowy _PK2 o objętości 10 μg/dobę zazwyczaj daje ponad 5-krotny stosunek sygnału do tła.

Zastosowanie

Preparat błonowy ludzkiego PK2 / PKR2 GPCR do testów wiązania radioligandów i wiązania GTPγS.

Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.

Działania biochem./fizjol.

• Klasa GPCR: A
• Białko docelowe: PK2/PKR2
• Podrodzina docelowa: Prokinetyna

Charakterystyka techniczna

Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym w niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore cat. # MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie płukana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) buforem do płukania. Płytka jest suszona i liczona.

Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM _MgCl2, 1 mM _CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.

Radioligand:^[125I] MIT-1 (Perkin Elmer#: NEX-410)

Wash Buffer: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.

Postać fizyczna

Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 5-krotny stosunek sygnału do tła ^{ze znakowanym 125I}MIT-1 przy 0,3 nM

Liquid w buforze opakowaniowym: 50 m

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.

Informacje prawne

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktów, nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanego użytku komercyjnego.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 2