HTS121M

ChemiSCREEN Preparat błony ludzkiego receptora motyliny

Human motilin receptor / MTLR / GPR38 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.

• Kod UNSPSC: 41106514
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.84

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: human
• Poziom jakości: 100
• rekombinowane: expressed in Chem-1 cells
• producent / nazwa handlowa: ChemiScreen; Chemicon^®
• metody: ligand binding assay: suitable (GTPγS); radioligand binding assay (RLBA): suitable
• numer dostępu NCBI: NM_001507.1
• numer dostępu UniProt: O43193
• Warunki transportu: dry ice

Opis

Opis ogólny

Ludzki receptor motyliny

Motylina jest 22-aminokwasowym peptydem, który silnie stymuluje kurczliwość przewodu pokarmowego. W biologicznym działaniu motyliny pośredniczy siedmiobłonowe białko sprzężone z _Gq, obecnie określane jako receptor motyliny (MR), które wykazuje znaczne podobieństwo sekwencji do receptora greliny (Feighner i in., 1999). Receptor motyliny jest również aktywowany przez antybiotyk erytromycynę; ta interakcja wydaje się pośredniczyć w niektórych żołądkowo-jelitowych skutkach ubocznych erytromycyny. Chociaż motylidy (nieantybiotykowe pochodne erytromycyny), takie jak ABT-229, były badane pod kątem leczenia gastroparezy cukrzycowej, ich skuteczność była ograniczona przez tachyfilaksję (zmniejszoną odpowiedź na ligand) wynikającą z downregulacji receptora (Thielemans i in., 2005). Agoniści receptora motyliny ze zmniejszoną aktywnością densytyzacji pozostają potencjalnym sposobem leczenia zaburzeń motoryki żołądka. Sklonowana przez Chemicon ludzka linia komórkowa wykazująca ekspresję receptora motyliny jest wytwarzana w gospodarzu Chem-1, który wspiera wysoki poziom ekspresji rekombinowanego receptora motyliny na powierzchni komórki i zawiera wysoki poziom obiecującego białka G Gα15 w celu połączenia receptora ze szlakiem sygnalizacji wapniowej. Linia komórkowa jest zatem idealnym narzędziem do badań przesiewowych w kierunku antagonistów interakcji między receptorem motyliny a jego ligandami. Preparaty błonowe motyliny firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych antagonistów interakcji receptora motyliny z motyliną. Preparaty błonowe wykazują Kd 0,43nM dla^[125I]-Motyliny. Przy 5,0 µg/dołek preparatu membranowego Motilin i 0,5 nM^[125I]-Motilin uzyskano ponad 30-krotny stosunek sygnału do tła.

Zastosowanie

Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.

Działania biochem./fizjol.

GPCR Class: A

Protein Target: motilin receptor / MTLR / GPR38

Target Sub-Family: Motilin

Jakość

Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with varying amounts of Motilin Receptor membrane prep:

	5 µg/well	10 µg/well
Signal:Background	75	65
Specific Binding (cpm)	46348	54457

SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 µg membrane preparation
Bmax: 5.6 pmol/mg
Kd: 0.43 nM

Charakterystyka techniczna

Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.

Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM _MgCl2, 1 mM _CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand: [125I] Motylina (Perkin Elmer # NEX378)
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 30-krotny stosunek sygnału do tła ze ^{znakowaną 125I}motyliną przy 0,5 nM.

Postać fizyczna

Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do wskazanego stężenia w buforze do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.

Informacje prawne

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 2