03-248

RIPAb+ pan Ago - przeciwciało i zestaw primerów zweryfikowane pod kątem RIP

clone 2A8, from mouse

• Synonim(y): Eukariotyczny czynnik inicjacji translacji 2C, 2, Białko argonaute-2, Ago2, Krajalnica białek, Argonaute2, Białko domeny PAZ Piwi, Ago4, Argonaute4, Białko argonaute-4
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.32
• eCl@ss: 32160702

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• antibody form: purified immunoglobulin
• clone: 2A8, monoclonal
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: RIPAb+, Upstate^®
• technique(s): RIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NP_001158095
• UniProt accession no.: Q9UKV8
• shipped in: dry ice

Opis

General description

Przeciwciała RIPAb+ są oceniane przy użyciu testu immunoprecypitacji białka wiążącego RNA (RIP). Każdy zestaw przeciwciał RIPAb+ zawiera ujemne przeciwciało kontrolne w celu zapewnienia swoistości reakcji RIP i jest weryfikowany pod kątem koimmunoprecypitacji RNA związanego specyficznie z immunoprecypitowanym białkiem wiążącym RNA będącym przedmiotem zainteresowania. W stosownych przypadkach zestaw RIPAb+ zawiera również startery kontrolne do ilościowego RT-PCR (startery RIP) w celu biologicznego potwierdzenia wyników IP poprzez udaną ko-precypitację określonych docelowych RNA, takich jak informacyjny RNA. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów RIP podczas stosowania przeciwciała w ich kontekście eksperymentalnym. Jeśli nie dostarczono testu specyficznego dla celu, zestaw RIPAb+ jest walidowany przy użyciu zautomatyzowanego testu opartego na mikroprzepływach poprzez wzbogacenie wykrywalnego RNA w stosunku do kontrolnej immunoprecypitacji.
Białka argonautowe (Ago) to rodzina białek o masie około 95 kDa, które wiążą się bezpośrednio z dojrzałymi miRNA. U ssaków występują cztery białka Ago (Ago1-4). Ta rodzina białek jest centralnym składnikiem większości miRNP ssaków, który pośredniczy w ważnych funkcjach w szlakach regulacyjnych kierowanych przez małe RNA.

~ 95 i 70 kDa. To przeciwciało rozpoznaje Ago1, Ago2, Ago3 i Ago4.
Należy zauważyć, że to przeciwciało reaguje krzyżowo z radiksyną (~70 kDa). (Nelson, P., et al. (2007). RNA. 13:1787-1792.)

Immunogen

Znakowane histydyną rekombinowane białko odpowiadające ludzkiemu Ago.

Application

Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Lizat komórek HeLa sondowano przeciwciałem Anti-pan Ago, klon 2A8 (0,5 μg/ml). Białka wizualizowano przy użyciu przeciwciała wtórnego Goat Anti-Mouse IgG sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji.
Strzałki wskazują Ago (~ 95 kDa) i Radixin (~ 70 kDa) (Rysunek 2).
Analiza immunoprecypitacji: Reprezentatywna partia została wykorzystana przez niezależne laboratorium w IP. (Nelson, P., et al. (2007). RNA. 13:1787-1792.)
Analiza immunocytochemiczna: Reprezentatywna partia została użyta przez niezależne laboratorium w IC. (Nelson, P., et al. (2007). RNA. 13:1787-
1792.)
Analiza immunohistochemiczna: Reprezentatywna partia została użyta przez niezależne laboratorium w IH. (Nelson, P., et al. (2007). RNA. 13:1787-
1792.)

Kategoria badawcza
Epigenetyka i funkcje jądrowe

Podkategoria badawcza
Czynniki transkrypcyjne

Metabolizm i wiązanie białek RNA

Zestaw RIPAb+ pan Ago -RIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Biochem/physiol Actions

To przeciwciało rozpoznaje Ago1, Ago2, Ago3 i Ago4. Należy zauważyć, że to przeciwciało reaguje krzyżowo z radixin (~ 70 kDa). (Nelson, P., et al. (2007). RNA. 13:1787-1792.)

Packaging

10 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~5 μg przeciwciała na RIP (w zależności od kontekstu biologicznego).

Physical form

Anti-pan Ago (Mouse Monoclonal) Jedna fiolka zawierająca 50 μg oczyszczonej mysiej IgG1κ w 0,1 M Tris-Glicynie (pH 7,4) i 150 mM NaCl z 0,05% azydkiem sodu przed dodaniem glicerolu do 30%. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Normalne mysie IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 µg oczyszczonej mysiej IgG w 125 µl buforu do przechowywania zawierającego 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
RIP Primer IGF2. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiego mRNA IGF2. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: GCG GCT TCT ACT TCA GCA G
REV: CAG GTG TCA TAT TGG AAG AAC

Białko G

Format: Oczyszczony

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.
Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu, a przed zdjęciem nasadki, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu. Uwaga: Zmienność temperatur w zamrażarce poniżej -20°C może powodować zamarzanie roztworów zawierających glicerol podczas przechowywania.

Analysis Note

Kontrola
Obejmuje kontrolę ujemną normalnego mysiego przeciwciała IgG i startery kontrolne specyficzne dla cDNA ludzkiego IGF2 mRNA.

RNA Binding Protein Immunoprecipitation:
Representative lot data.
RIP Lysate prepared from 293 cells (2 X 10E7 cell equivalents per IP) were subjected to immunoprecipitation using 5 µg of either a normal mouse IgG or 5 µg of Anti-pan Ago antibodyand the Magna RIP^® RNA-Binding Protein Immunoprecipitation Kit (Cat. # 17-700).
Successful immunoprecipitation of Argonaute proteins-associated RNA was verified by qPCR using RIP Primers IGF2, (Figure 1).
Please refer to the Magna RIP (Cat. # 17-700) or EZ-Magna RIP (Cat. # 17-701) protocol for experimental details.

Other Notes

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Legal Information

MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10-13 - German Storage Class 10 to 13