Przejdź do zawartości
Merck

Podwójnie znakowane sondy są najpopularniejszym typem sond do qPCR i są często określane jako sondy hydrolizujące. Te wszechstronne sondy mogą być używane do różnych zastosowań, w tym

  • Walidacja mikromacierzy
  • Wiele genów docelowych / kilka próbek
  • Wykrywanie patogenów
  • Multipleksowanie
  • Kwantyfikacja obciążenia wirusem
  • Analiza ekspresji genów
  • Określanie kopii genu

Podwójnie znakowane sondy są idealne do walidacji MISSION® siRNA i shRNA knockdown. Ich zalety obejmują prostotę projektowania dla specyficzności sekwencji, szeroką dostępność kombinacji reporter/quencher i zwiększoną czułość.

Podwójnie znakowane sondy z zablokowanym kwasem nukleinowym

Dodanie zablokowanych kwasów nukleinowych do sondy zwiększa stabilność termiczną i specyficzność hybrydyzacji.  Pozwalają one na większą dokładność w wykrywaniu SNP, rozróżnianiu alleli i in vitro kwantyfikacji lub wykrywaniu. Zablokowane kwasy nukleinowe umożliwiają również łatwiejsze i bardziej czułe projektowanie sond dla problematycznych sekwencji docelowych.

Jak działają podwójnie znakowane sondy?

Sonda podwójnie znakowana to jednoniciowy oligonukleotyd znakowany dwoma różnymi barwnikami. Barwnik reporterowy znajduje się na końcu 5', a cząsteczka wygaszająca na końcu 3'. Cząsteczka wygaszacza hamuje naturalną emisję fluorescencji reportera poprzez transfer energii rezonansu fluorescencji (FRET). Poniższa ilustracja przedstawia ten mechanizm.

Sondy podwójnie znakowane

Starter jest wydłużany przez polimerazę, a sonda wiąże się z określoną matrycą DNA. Hydroliza uwalnia reporter z hybrydy sonda-cel, powodując wzrost fluorescencji. Zmierzony sygnał fluorescencji jest wprost proporcjonalny do ilości docelowego DNA.

Zaprojektuj i dostosuj sondy qPCR, aby jak najlepiej pasowały do Twojego zastosowania.

Specyfikacja podwójnie znakowanej sondy:

Tabela właściwości widmowych

1JOE/TET alternatywa
2VIC® alternatywa
3Cyanine 3 alternatywa
4TAMRA alternatywa
5Cyanine 5 alternatywa

Gwarantowane zyski

*Szacowana liczba jest oparta na 4 nmolach lub 32 µg dla 1 OD i 200 nM w 25 µl reakcji (5,0 pmol/reakcję). Szacowana liczba jest oparta na średniej długości sekwencji wynoszącej 25 zasad.

Harmonogram produkcji

*Czasy dostawy mogą być dłuższe ze względu na międzynarodowy tranzyt, opóźnienia w odprawie celnej itp. Duże projekty będą umieszczane w harmonogramie dostaw w oparciu o potrzeby projektu.


Zaloguj się, aby kontynuować

Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.

Nie masz konta użytkownika?