Podwójnie znakowane sondy są najpopularniejszym typem sond do qPCR i są często określane jako sondy hydrolizujące. Te wszechstronne sondy mogą być używane do różnych zastosowań, w tym
- Walidacja mikromacierzy
- Wiele genów docelowych / kilka próbek
- Wykrywanie patogenów
- Multipleksowanie
- Kwantyfikacja obciążenia wirusem
- Analiza ekspresji genów
- Określanie kopii genu
Podwójnie znakowane sondy są idealne do walidacji MISSION® siRNA i shRNA knockdown. Ich zalety obejmują prostotę projektowania dla specyficzności sekwencji, szeroką dostępność kombinacji reporter/quencher i zwiększoną czułość.
Podwójnie znakowane sondy z zablokowanym kwasem nukleinowym
Dodanie zablokowanych kwasów nukleinowych do sondy zwiększa stabilność termiczną i specyficzność hybrydyzacji. Pozwalają one na większą dokładność w wykrywaniu SNP, rozróżnianiu alleli i in vitro kwantyfikacji lub wykrywaniu. Zablokowane kwasy nukleinowe umożliwiają również łatwiejsze i bardziej czułe projektowanie sond dla problematycznych sekwencji docelowych.
Jak działają podwójnie znakowane sondy?
Sonda podwójnie znakowana to jednoniciowy oligonukleotyd znakowany dwoma różnymi barwnikami. Barwnik reporterowy znajduje się na końcu 5', a cząsteczka wygaszająca na końcu 3'. Cząsteczka wygaszacza hamuje naturalną emisję fluorescencji reportera poprzez transfer energii rezonansu fluorescencji (FRET). Poniższa ilustracja przedstawia ten mechanizm.
Starter jest wydłużany przez polimerazę, a sonda wiąże się z określoną matrycą DNA. Hydroliza uwalnia reporter z hybrydy sonda-cel, powodując wzrost fluorescencji. Zmierzony sygnał fluorescencji jest wprost proporcjonalny do ilości docelowego DNA.
Zaprojektuj i dostosuj sondy qPCR, aby jak najlepiej pasowały do Twojego zastosowania.
Specyfikacja podwójnie znakowanej sondy: |
---|
Tabela właściwości widmowych |
---|
Gwarantowane zyski |
---|
Harmonogram produkcji |
---|
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?