P6782

过氧化物酶 来源于辣根

Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)

• 别名: 供体：过氧化氢氧化还原酶, 辣根过氧化物酶
• CAS号: 9003-99-0
• EC 号: 1.11.1.7 (BRENDA, IUBMB)
• EC號碼: 232-668-6
• MDL號碼: MFCD00071339
• 分類程式碼代碼: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• NACRES: NA.54

属性

• 種類: Type VI-A
• 形狀: essentially salt-free, lyophilized powder
• 比活性: ≥250 units/mg solid (using pyrogallol); 950-2000 units/mg solid (using ABTS)
• 分子量: ~44 kDa
• 溶解度: 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0); H₂O: soluble
• 應用: diagnostic assay manufacturing
• 儲存溫度: 2-8°C
• InChI: 1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
• InChI 密鑰: JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N

说明

一般說明

辣根过氧化物酶是从辣根（Amoracia rusticana）中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量（约44 kDa）包括多肽链（33,890道尔顿）、氯化血红素加Ca²⁺ （约700道尔顿）和碳水化合物（约9,400道尔顿）。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

應用

Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器，以便检测半乳糖。它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB）的培养基（MRS琼脂板）的组分，用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H₂O₂ 催化分解为O₂，并且TMB在O₂存在下将菌落染成蓝色。因此，在含5% CO₂ 的空气环境下孵育48小时后，MRS琼脂上产生H₂O₂ 的菌落呈深蓝色。不产生H₂O₂ 的菌落仍为无色。它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。它还被用于测定溶液中的葡萄糖 和过氧化物 。

辣根过氧化物酶（HRP）分离自辣根中（Amoracia rusticana）。 它可用于生物化学应用，如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子（例如蛋白质）的可检测性。 产品P6782是VI-A型，本质上是一种无盐冻干粉。 它被用于定量胆固醇和胆固醇酯，并用于研究水凝胶和硅水凝胶隐形眼镜的体外脂质沉积。

生化／生理作用

HRP容易与过氧化氢（H₂O₂）结合，生成的[HRP-H₂O₂]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5，在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此，它是最理想的标记物。同时，其糖基化会产生较低的非特异性结合。已有研究发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸以及 Cd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺和Pb²⁺离子可抑制该酶活性。

辣根过氧化物酶与底物一起孵育时，产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物，以便可以定量。 辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。

包裝

包装单位为mg固体

聯結

与P8375相似

單位定義

一个ABTS单元将在25°C、pH 5.0条件下每分钟氧化1 μM的ABTS

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

準備報告

本品以1 mg/mL的浓度溶于0.1 M磷酸盐缓冲液（pH 6.0）中，可在室温下保持活性至少两周。该溶液在5次冻融循环后仍保留活性。

分析報告

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A₄₀₃/A₂₇₅ 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。

本品使用ABTS测定，以便与其他供应商的单位进行比较：每mg固体约1,000单位

其他說明

有关过氧化物酶的更多信息，请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer。

安全信息

• 象形圖: GHS08
• 訊號詞: Danger
• 危險聲明: H334
• 防範說明: P261 - P284 - P501
• 危險分類: Resp. Sens. 1
• 儲存類別代碼: 11 - Combustible Solids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 1
• 個人防護裝備: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)