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應用
在分离DNA和RNA的过程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道,其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
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来源于白色念球菌(Tritirachium album)的蛋白酶K已被用于:
- 牛子宫内膜上皮细胞疱疹病毒DNA的提取
- 从鼻拭子中提取病毒RNA
- 作为锁相和直接PCR裂解缓冲液的成分
该产品已被用于研究其对丝素蛋白的预处理效果。该研究对羟基磷灰石(HAp)的晶体学性质,以及复合材料的微观结构和显微硬度进行了分析。该酶还可用于利用FISH技术促进探针对rRNA的标记,从而对致病性 金黄色葡萄球菌进行检测。
生化/生理作用
蛋白酶K具有广泛的特异性,即使在天然状态下也可降解许多蛋白质。它主要切割脂肪族和芳香族氨基酸(带有封闭的α-氨基)的羧基相邻的肽键。根据氨基酸序列,蛋白酶K的分子量为28,930Da 根据SDS-PAGE,其分子量为28,500Da。最适pH值在7.5-9.0之间 其等电点为8.9。其需要Ca2+(1-5mM)进行激活。蛋白酶K可被DIFP(二异丙基氟磷酸盐)或PMSF(苯甲基磺酰氟)抑制。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族,具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定:pH,缓冲盐,去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下,蛋白酶K可保持活性,在不损害分离DNA完整性的前提下,可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。
單位定義
在pH7.5,37℃条件下,一个单位每分钟可将尿素变性血红蛋白水解并生成相当于1.0 μmole酪氨酸的颜色(利用Folin-Ciocalteu试剂进行显色)。
外觀
溶于含有10mM Tris-HCl(pH 7.5)和1mM乙酸钙的40%甘油(v / v)溶液中。
法律資訊
PicoGreen is a registered trademark of Life Technologies
訊號詞
Danger
危險聲明
危險分類
Resp. Sens. 1
儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 2
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
個人防護裝備
Eyeshields, Faceshields, Gloves, type ABEK (EN14387) respirator filter
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The molecular mass of proteinase K was determined by gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulfate and by active site labelling with diisopropyl fluorophosphate. Both methods indicate molecular masses in the range of 27 000-29 000 Da. These
商品
Proteinase K aids in molecular biology applications by digesting structural proteins, removing nucleases, and isolating intact genomic DNA.
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