DCAS9PROT

dCas9-3XFLAG^™-生物素蛋白

from Streptococcus pyogenes with D10A and H840A mutations, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

• 别名: Cas9 D10A H840A, dCas9，催化失活的Cas9, 失活Cas 9
• UNSPSC代码: 12352202
• NACRES: NA.51

属性

• 重组: expressed in E. coli
• 质量水平: 200
• 方案: ≥90% (SDS-PAGE)
• 表单: lyophilized powder
• 包装: pkg of 1 kit (3 components)
• 运输: ambient
• 储存温度: −20°C

说明

一般描述

来自化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes ）的重组dCas9-3X FLAG-生物素蛋白（~165KD）是用于基因组工程和基因组DNA检测、分离和成像实验的即用型试剂。当与靶点特异性向导RNA结合时，死亡的酿脓链球菌（Streptococcus pyogenes ）Cas9蛋白作为DNA靶标蛋白，适用于转染细胞培养物、显微注射、DNA下拉、染色质富集、微生物鉴定和原位DNA成像。在C末端，使用SV40大T抗原核定位信号（NLS）标记蛋白质以用于入核转运，使用3XFLAG表位和生物素标记蛋白质以用于基于FLAG抗体^®或链霉抗生物素的实验。

应用

功能基因组学/靶标验证/基因组编辑/分子生物学/合成生物学/DNA检测/分离/DNA成像

特点和优势

• 高特异性
• 适用于基因组DNA检测/分离
• 可立即用于注射/转染

包装

• 50 μg包装（≥ 300 pmol）
• 250 μg包装（≥ 1500pmol）

组分

每个试剂盒包含：

• 一瓶dCas9重组蛋白
• 一瓶1×稀释缓冲液，1 mL
• 一瓶无核酸酶的水和甘油，1 mL

原理

CRISPR/Cas体系被细菌和古细菌用作抵抗入侵病毒和质粒的防御屏障。最近，来自化脓性链球菌（ Streptococcus pyogenes ）的II型CRISPR/Cas系统经过设计可用于真核系统，它采用两种分子组分：单个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA）。两个蛋白质结构域RuvC和HnH（分别为D10A和H840A）负责核酸酶活性，它们发生突变会导致Cas9内切核酸酶失活（dCas9）。随后，可以用gRNA对蛋白质进行编程，并指导其与所需的DNA序列结合。

重悬

dCas9蛋白冻干粉应使用提供的复原(Reconstitution)溶液重悬，获得所需浓度。轻轻敲打试管以完全溶解冻干的粉末，在冰上孵育10分钟，然后离心试管以使内容物离心至试管底部。

其他说明

利用我们的 CRISPR选择工具 订购gRNA

访问SigmaAldrich.com/CRISPRproteins，查看我们的其他 MISSION^® Cas9 蛋白

法律信息

CRISPR 使用许可协议

3xFLAG is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

FLAG is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

安全信息

• 储存分类代码: 10 - Combustible liquids