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Roche

Anti-digoxigénine-AP, fragments Fab

from sheep

Synonyme(s) :

anti-digoxigénine, digoxigénine

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203

Source biologique

sheep

Niveau de qualité

100

Conjugué

alkaline phosphatase conjugate

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

polyclonal

Forme

solution

Conditionnement

pkg of 200 μL (150 U)

Fabricant/nom de marque

Roche

Isotype

IgG

Température de stockage

2-8°C

Description générale

La digoxigénine est un haptène utilisé pour le marquage et la détection d′acides nucléiques. Ce produit contient des fragments Fab d′anticorps polyclonaux anti-digoxigénine, conjugués à la phosphatase alcaline. L′anti-digoxigénine-AP, fragments Fab, est utilisé pour la détection des composés marqués à la digoxigénine.

Spécificité

L′anticorps polyclonal de mouton est spécifique à la digoxigénine et à la digoxine et ne présente aucune réactivité croisée avec les autres stéroïdes, notamment les œstrogènes et androgènes.
Inactivation à la chaleur : oui

Application

Utiliser l′anti-digoxigénine-AP, fragments Fab, pour la détection des composés marqués à la digoxigénine dans les applications suivantes :
  • Puces à ADNc
  • Hybridation sur colonies/plaques
  • Dot blots
  • ELISA
  • Essai de décalage de gel
  • Immunohistochimie
  • Hybridation in situ
  • Blot de séquençage de l′ADN non radioactif
  • Northern blots
  • Essais de protection à la RNase
  • Southern blots
  • Western blots
  • Hybridation in situ en fluorescence
  • Hybridation in situ sur coupes et Hybridation in situ sur préparations complètes
  • Essai de décalage de mobilité électrophorétique

Notes préparatoires

Après immunisation avec la digoxigénine, l′IgG de mouton a été purifiée par chromatographie d′échange d′ions, et l′IgG spécifique a été isolée par immunosorption. Les fragments Fab obtenus par digestion à la papaïne ont été purifiés par exclusion stérique, conjugués au marqueur spécifique et stabilisés dans du tampon.
Concentration de travail : La concentration de travail du conjugué dépend de l′application et du substrat. Les concentrations suivantes peuvent servir de guide :
  • Dot blots : 150 mU/ml
  • ELISA : 150 à 300 mU/ml
  • Immunohistochimie/immunocytochimie : 250 à 500 mU/ml
  • Hybridation in situ : 1,5 à 7,5 U/ml
  • Southern blots : 150 mU/ml
  • Western blots : 250 à 500 mU/ml

Solution de travail : Northern blots, Southern blots
100 mM acide maléique, 150 mM NaCl, pH 7,5.
Western blots
50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5
Autres applications
100 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH 7,5

Pour réduire la liaison non spécifique : 1 % de réactif de blocage (p/v) ou 1 à 5 % de sérum de veau fœtal inactivé à la chaleur (v/v) ou de sérum de mouton normal.
Conditions de stockage (solution de travail) : Le conjugué dilué est stable entre 2 et 8 °C pendant 12 heures.
Il est impératif de le préparer fraîchement juste avant l′emploi.

Remarque sur l'analyse

  • Réactivité croisée avec la digitoxine et la digitoxigénine : <1 %
  • Aucune réactivité croisée avec les stéroïdes humains œstrogéniques et androgéniques, p. ex. œstradiol ou testostérone
  • Réactivité croisée avec la digoxine : inconnu
  • Le conjugué ne se lie pas du tout à lui-même
  • Normalement, une molécule de conjugué se lie à une molécule de digoxigénine, bien qu′il existe deux sites de liaison possibles pour la digoxigénine
  • Une liaison non spécifique à l′ARN n′est pas anticipée

Autres remarques

Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

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Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

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Point d'éclair (°C)

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