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Merck

T4674

Sigma-Aldrich

Trypsin -Lösung aus Schweinepankreas

sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 25 g porcine trypsin per liter in Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

CAS-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352204
NACRES:
NA.78

Biologische Quelle

Porcine pancreas

Qualitätsniveau

Sterilität

sterile-filtered

Produktlinie

BioReagent

Form

solution

Mol-Gew.

23.4 kDa

Methode(n)

cell culture | mammalian: suitable

Verunreinigungen

Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)

pH-Wert

7.6

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

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Anwendung

Für den Trypsinverdau von Peptiden verwenden Sie ein Verhältnis von ca. 1:100 bis 1:20 (Trypsin:Peptid). Dieses Produkt wird typischerweise zum Ablösen adhärenter Zellen von einer Kulturoberfläche eingesetzt. Die zum Ablösen von Zellen von ihrem Substrat erforderliche Trypsinkonzentration hängt in erster Linie vom Zelltyp und dem Alter der Kultur ab. Trypsine werden auch für die Resuspendierung von Zellen während der Zellkultur, in der Proteomikforschung für den Verdau von Proteinen und in verschiedenen In-Gel-Verdaus verwendet. Weitere Anwendungsbereiche sind u. a. die Beurteilung der Kristallisierung mit membranbasierten Methoden und eine Studie zur Feststellung, ob Proteinfaltungsraten und Proteinausbeuten durch das Vorhandensein von sog. „kinetischen Fallen“ begrenzt werden können.

Biochem./physiol. Wirkung

Trypsin spaltet Peptide auf der C-terminalen Seite von Lysin- und Argininresten. Die Hydrolyse dieser Reaktion wird verlangsamt, wenn sich auf einer der Seiten der Spaltstelle ein Säurerest befindet, und die Hydrolyse wird beendet, wenn sich auf der Carboxylseite der Spaltstelle ein Prolinrest befindet. Der optimale pH-Wert für die Trypsinaktivität liegt zwischen 7 und 9. Trypsin kann auch zur Spaltung von Ester- und Amidbindungen synthetischer Aminosäurederivate eingesetzt werden. EDTA wird Trypsinlösungen als Chelatbildner zugegeben, um Calcium- und Magnesiumionen zu neutralisieren, da diese die Peptidbindungen verdecken, auf die Trypsin wirkt. Durch Entfernung dieser Ionen wird die enzymatische Aktivität verstärkt.

Serinprotease-Inhibitoren wie DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF und Aprotinin hemmen Trypsin.

Vorsicht

Dieses Produkt sollte bei -20 °C eingefroren werden.

Einheitendefinition

Eine BAEE-Einheit erzeugt unter Verwendung von BAEE als Substrat ein A253 von 0,001 pro Minute bei einem pH-Wert von 7,6 und einer Temperatur von 25 °C.

Angaben zur Herstellung

Dieses Produkt ist eine Schweine-Trypsin-Lösung mit 25 g/l in ausgeglichener Salzlösung nach Hanks mit Phenolrot.′

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