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Merck

A6964

Sigma-Aldrich

Accutase® -Lösung

sterile-filtered, suitable for cell culture

Synonym(e):

Cell detachment solution

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352204
NACRES:
NA.75
Preise und Verfügbarkeit sind derzeit nicht verfügbar.

Sterilität

sterile-filtered

Qualitätsniveau

Form

liquid

Konzentration

400-600 units/mL

Methode(n)

cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable

Verunreinigungen

≤1 EU/mL endotoxin

pH-Wert

6.8-7.8

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

Allgemeine Beschreibung

Accutase®-Lösung (in Dulbeccos Phosphatgepufferter Kochsalzlösung (DPBS) ohne Ca++ oder Mg++) enthält proteolytische und kollagenolytische Enzyme für die Zellablösung. Sie eignet sich zum Ablösen von Zellen von Standardbehältnissen aus Kunststoff für die Gewebekultur und von adhäsionsbeschichteten Kunststoffbehältnissen in Routineanwendungen. Accutase wird bei der Zellablösung gegenüber Trypsin bevorzugt, da sie für die Zellen schonender ist. Daher wird Accutase häufig für die Behandlung empfindlicher Zellen oder für die Analyse von Oberflächenmarkern verwendet.

Anwendung

Accutase® Lösung wird zur Dissoziation oder zum Aufschluss nicht-adhärenter, im Aggregat wachsender Zellen wie Hirntumorzellen,[1] induzierte pluripotente Stammzellen (IPSC)[2] und Glioblastomzellen[3] in einzelne Zellen verwendet.

Geeignet zur Verwendung bei der Herstellung einer Einzelzellsuspension für die Sequenzierung.
Nachweislich effektiv bei der Ablösung von primären Fibroblasten, Endothelzellen, Neuronen, Tumorzelllinien und Insektenzellen. Ausgezeichnete Leistung bei der Ablösung von Zellen zur Analyse von Zelloberflächenmarkern, Virenwachstumsassays, Durchflusszytometrie und beim Bioreaktor-Scaleup. Enthält keine Säuger- oder Bakterienprodukte.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Gebrauchsfertige Lösung mit einem proprietären Gemisch aus proteolytischen und collagenolytischen Enzymen zur Dissoziation von Zellen von haftbeschichteten und Standard-Kunststoffmaterialien.

Alternative Formulierung

Zubereitet in Dulbeccos PBS (0,2 g/l KCl, 0,2 g/l KH2PO4, 8 g/l NaCl und 1,15 g/l Na2HPO4) mit 0,5 mM EDTA•4Na und 3 mg/l Phenolrot. Informationen zur Produktanwendung finden Sie online im Produktdatenblatt.

Angaben zur Herstellung

Dieses Produkt enthält Phenolrot. Das Produkt wird auf Trockeneis versandt; in der Verpackung kann ein bedeutender CO2-Aufbau stattfinden. Dieses CO2 kann in die Lösung übergehen und den pH-Wert leicht senken (auf etwa 6,8), was einen gelborangfarbenen Ton zur Folge hat. Die Lösung sollte dennoch verwendbar sein. Es kann auch Natriumhydroxid zugegeben werden, um den pH-Wert einzustellen. Eine vollständig gefrorene Accutase-Flasche weist eine gelbe Farbe auf, die beim Auftauen in einen orangefarbenen Ton umschlägt. Nach dem Auspacken kann das Produkt wieder eingefroren oder zur späteren Verwendung direkt in den Kühlschrank gegeben werden. Das Produkt nicht in einem warmen Wasserbad auftauen. Accutase ist empfindlich gegenüber Temperaturen über 37 °C und wird nach 45 Minuten bei 37 °C inaktiv. Empfohlen wird ein Auftauen über Nacht im Kühlschrank oder für 1 bis 1,5 Stunden in einer Wanne mit kaltem Leitungswasser. Die Flasche mit Accutase nach dem Auftauen gut schütteln, damit die Inhaltsstoffe gleichmäßig in der Lösung verteilt werden. Diese Produkte müssen vor der Verwendung nicht erwärmt werden. Nach der Entnahme aus dem Kühlschrank sofort verwenden und nach Gebrauch wieder in den Kühlschrank zurückstellen.

Rechtliche Hinweise

Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

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Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben

Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


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Ruchi Bajpai et al.
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Human embryonic stem cells (hESCs) hold great promise for cell-based therapies and drug screening applications. However, growing and processing large quantities of undifferentiated hESCs is a challenging task. Conventionally, hESCs are passaged as clusters, which can limit their growth efficiency
Recent Zika virus isolates induce premature differentiation of neural progenitors in human brain organoids
Gabriel E, et al.
Cell Stem Cell, 20(3), 397-406 (2017)
DISC1 Regulates the Proliferation and Migration of Mouse Neural Stem/Progenitor Cells through Pax5, Sox2, Dll1 and Neurog2.
Qian Wu et al.
Frontiers in cellular neuroscience, 11, 261-261 (2017-09-14)
Yanting Xue et al.
Stem cell research, 24, 151-154 (2017-10-17)
Human MSX1 gene is mapped to chromosome 4 and encodes a 303aa homeobox protein MSX1. MSX1 expression appears during early tooth development of vertebrate embryogenesis. Mutations in this protein are related to human tooth anomalie, cleft lip and palate and
Frank-Peter Wachs et al.
Laboratory investigation; a journal of technical methods and pathology, 83(7), 949-962 (2003-07-16)
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Questions

1–10 of 11 Questions  
  1. Is Accutase Solution A6964 animal-origin free? Is serum free?

    1 answer
    1. As per the Product Information Sheet, the Accutase solution does not contain mammalian or bacterial-derived products. This solution is supplied as a sterile, ready-to use, frozen liquid. This product is serum free.

      Helpful?

  2. Can accutase be thawed, aliquoted, and refrozen at -20 to preserve it longer?

    1 answer
    1. Yes, this product is stable after undergoing several freeze/thaw cycles. The thawed product may be aliquoted and stored at –20 °C or stored for up to 2 months at 4°C.
      The graphic below demonstrates the freeze/thaw stability of Accutase.

      Helpful?

  3. On the Innovative cell technologies website it says that accumax is the same as accutase but with 3x the amount of enzymes. Why did the technician here answer that it contains DNAse?

    1 answer
    1. Thank you for calling this to our attention. The manufacturer, Innovative Cell Technologies, has been contacted regarding this matter. The manufacturer has confirmed that both Accutase and Accumax products DO contain a small amounts of DNAse. The concentration is not measured, but it is present in the formulation. In addition, both products also contain 0.5 mM EDTA.

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  4. How can I inactivate Accutase® with fetal bovine serum?

    1 answer
    1. Due to its gentle nature Accutase® cell detachment solution usually does not need to be neutralized following cell passaging. Accutase® is also heat inactivated after 45 minutes at 37°C. If this method of neutralization does not work for your cells, or if you want to neutralize Accutase® in a shorter period of time, the addition of 10% FBS containing media will accomplish this task. Experiments have shown that diluting a sample of Accutase® with 10% with fetal bovine serum achieved an environment similar to that found in cell culture. Measurements of the enzyme activity in this diluted sample showed decreased activity over time, falling below that of the required level for cell detachment (>175 units/mL). After about 6 minutes of serum interaction, the enzyme activity of Accutase® was well below this level, demonstrating effective inhibition by FBS.

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  5. Will Product A6964, Accutase® solution, work on tissue?

    1 answer
    1. This product is not tested for tissue, but it should work on soft tissue.

      Helpful?

  6. Does Product A6964, Accutase® solution, contain animal components?

    1 answer
    1. Accutase is purified from a marine invertebrate.  There are no other animal or bacterial derived proteins present.

      Helpful?

  7. What is the difference between Accutase and Accumax?

    1 answer
    1. Accutase is a mixture of non-mammalian proteases.  Accumax is accutase that has been augmented with DNase to reduce clumping associated with DNA release from damaged cells.

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  8. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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  9. What is the appropriate cell dissociating product to be used for ES cells that will be injected into blastocysts?

    1 answer
    1. Accutase®, product A6964, or Accumax™ (Accutase® with DNase), product A7089, will work well for dissociation of ES cells. The Accutase® product has protease and dispase activity to dissociate the cells.  The Accumax™ product also has DNase to limit the aggregation that is caused by DNA released from ruptured cells during the dissociation/scraping.Please see the reference and link below for more information on the use of Accutase® with ES cells:Mol Reprod Dev. 2008 May;75(5):818-27

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  10. What is the concentration of Product A6964, Accutase® solution?

    1 answer
    1. This product is typically at a concentration of 400-600 units/mL.

      Helpful?

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