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Thermolysin from Geobacillus stearothermophilus
Type X, lyophilized powder, 30-350 units/mg protein (E1%/280)
Synonym(e):
Protease aus Bacillus thermoproteolyticus rokko, Thermophilic-bacterial protease
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
Geobacillus stearothermophilus
Qualitätsniveau
Typ
Type X
Form
lyophilized powder
Spezifische Aktivität
30-350 units/mg protein (E1%/280)
Mol-Gew.
34.6 kDa by amino acid sequence
Aufgereinigt durch
crystallization
Versandbedingung
wet ice
Lagertemp.
−20°C
Allgemeine Beschreibung
Thermolysin is a protease that has specificity different from other proteases available for sequence investigations.
Anwendung
Eine thermostabile (thermophile) extrazelluläre Metallendopeptidase mit vier Calciumionen. Kofaktoren sind Zink und Calcium. Hydrolysiert Proteinbindungen an der N-terminalen Seite von hydrophoben Aminosäureresten. Der optimale pH-Wert beträgt 8,0 und die optimale Temperatur für Aktivität beträgt 70 °C. Beachtliche Stabilität bei einem pH-Wert von 5 bis 9,5. Thermolysin weist eine geringe Spaltungsspezifizität auf, weshalb es eine Reihe von kurzen Fragmenten erzeugt, die sich zur Sequenzierung eignen. Bevorzugte Spaltung: X-Spaltung-Y-Z, wobei X = eine beliebige Aminosäure; Y = Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala und Z = eine beliebige Aminosäure außer Pro. Eine Spaltung am N-Terminus von Leu wird gegenüber einer Spaltung am N-Terminus von Phe bevorzugt, die gegenüber den anderen bevorzugt wird. Wird häufig verwendet, um eine eingeschränkte Proteolyse für das Peptid-Mapping und Untersuchungen der Proteinstruktur und konformationellen Veränderungen durchzuführen.
Thermolysin has been shown to have a prosequeence that acts as an intramolecular chaperone in vivo. It has also been used in a study to investigate the effects of sodium chloride on thermal stability and catalytic activity.
Thermolysin is also commonly used for the commercial synthesis of N-(benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester, the precursor for the artificial sweetener aspartame.
Qualität
Contains many extraneous enzymes.
Einheitendefinition
One unit will hydrolyze casein to produce color equivalent to 1.0 μmole (181 μg) of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).
Physikalische Form
lyophilized powder containing calcium and sodium acetate buffer salts
Angaben zur Herstellung
The pH optimum is 8.0 and the optimal temperature for activity is 70 °C. Considerably stable from pH 5 to 9.5. Thermolysin has a low cleavage specificity, therefore, it produces a number of short fragments that are suitable for sequencing. Preferential cleavage: X-cleavage-Y-Z where X=any amino acid; Y=Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala and Z is any amino acid other than Pro. Cleavage N-terminal to Leu is preferred over cleavage of N-terminal to Phe which is preferred over the others.
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Resp. Sens. 1
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 3
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
Persönliche Schutzausrüstung
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
Analysenzertifikate (COA)
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