Allgemeine Beschreibung
Poly-L-Lysin (PLL) ist ein vielseitiges synthetisches Polymer, das aus Lysin gewonnen wird. Es dient als positiv geladenes, wasserlösliches Polymer mit Anwendungen in Biologie und Biomedizin. Eine wichtige Rolle spielt PLL in der Zellkultur, bei der es auf Schalen und Platten aufgetragen wird, um die Zelladhäsion zu verbessern, insbesondere bei Zellen mit schlechten Adhäsionseigenschaften. Dies ist für Primärzellen und bestimmte Krebszelltypen äußerst wichtig. Die positive Ladung von PLL bildet eine Schicht, die negativ geladene Moleküle auf Zelloberflächen anzieht, was die Adhäsion erleichtert und gleichzeitig die Zelltoxizität im Vergleich zu herkömmlichen Kulturoberflächen minimiert.Darüber hinaus findet PLL einen Nutzen in der Mikroskopie und in der Forschung im Bereich der Neurowissenschaften. Mit beschichteten Substraten können Zellen, Gewebe und Neuronen an Objektträgern und Kulturschalen anhaften, wodurch detaillierte Beobachtungen und längere Studien erleichtert werden. PLL macht zellschädigende Fixiermittel überflüssig und ermöglicht eine erweiterte Zell- und Gewebekultur. Neben diesen Anwendungen wird PLL in folgenden Gebieten eingesetzt: der Immunchemie zur Anhaftung von Gewebe an Objektträger für die Färbung, in der Arzneimittelabgabe, um Arzneimittel zu verkapseln und zu verabreichen, und in der Gentherapie, um genetisches Material zu den Zielzellen zu transportieren. Insgesamt gilt PLL als biokompatibel, was seine Sicherheit in verschiedenen biomedizinischen Anwendungen sicherstellt, und ist somit ein wertvolles Instrument in der biochemischen und biomedizinischen Forschung.
Anwendung
Poly-L-Lysin-Polymere können zur Erhöhung der Zelladhäsion an festen Substraten, zur Konjugation an Methotrexat für einen verbesserten Wirkstofftransport, zur Mikroverkapselung von Inselzellen, für die Mikroverkapselungstechnologie, zur Beschichtung von Glas-Objektträgern für Microarrays und für Chromosomenzubereitungen eingesetzt werden. Poly-L-Lysin (30.000-70.000) mit niedrigerem Molekulargewicht ist in Lösung weniger viskos, höhermolekulare Ausführungen bieten jedoch mehr Bindungsstellen pro Molekül.
Biochem./physiol. Wirkung
Poly-L-Lysin ist ein unspezifischer Bindungsfaktor für Zellen und erhöht die Zelladhäsion an festen Substraten, indem es die elektrostatische Interaktion zwischen negativ geladenen Ionen der Zellmembran und der Kulturoberfläche verstärkt. Nach der Adsorption an die Zellkulturoberfläche erhöht Poly-L-Lysin die Anzahl der positiv geladenen Zellbindungsstellen. Bei Zellen, die Poly-L-Lysin verdauen können, sollte Poly-D-Lysin als Bindungsfaktor verwendet werden.
Leistungsmerkmale und Vorteile
- Geeignet für Zellkulturen und die biochemische Forschung
- Hochwertige Verbindung, geeignet für mehrere Forschungsanwendungen
Komponenten
Poly-L-Lysin ist ein positiv geladenes Aminosäurepolymer mit etwa einem HBr pro Lysin-Rest. Das Hydrobromid ermöglicht die kristalline, wasserlösliche Form des Poly-L-Lysins. Eine geringe Produktmenge kann in der ß-Struktur zu finden sein, da das HBr die Wasserstoffbindung zwischen Aminogruppen und den Carboxylgruppen oder N oder O enthaltenden Gruppen beeinträchtigt.
Vorsicht
Sterile Lösungen sind bei Lagerung zwischen 2 und 8 °C bis zu 2 Jahre haltbar. Das Lyophilisat sollte bei -20 °C aufbewahrt werden.
Angaben zur Herstellung
Dieses Produkt hat ein Molekulargewicht von 150.000 - 300.000. Zur Entfernung der HBr lösen Sie das Produkt in einem neutralen Puffer und dialysieren es, um die Salze zu entfernen. Keine der Poly-L-Lysin-Produkte waren Trifluoressigsäure ausgesetzt; sie werden dialysiert, um jegliche Monomere, Dimere oder Trimere zu entfernen, was mittels Dünnschicht-Chromatographie bestätigt wird. Um dieses Produkt als Bindungsfaktor zu verwenden, geben Sie 50 ml steriles Wasser für Gewebekulturen zu 5 mg Polylysin und beschichten die Oberfläche unter aseptischen Bedingungen mit 1 ml Lösung pro 25 cm2. Nach 5 Minuten entfernen Sie die Lösung durch Aspiration und spülen die Oberfläche gründlich ab. Lassen Sie die Oberfläche zwei Stunden trocknen, bevor Sie Zellen und Medium aufbringen.
Hinweis zur Analyse
Das Molekulargewicht basiert auf der Viskosität und wird auch mittels MALLS analysiert.
Sonstige Hinweise
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