L6397

Concanavalin A aus Canavalia ensiformis (Jack bean)

peroxidase conjugate, lyophilized powder

• Synonym(e): ConA
• NACRES: NA.32
• UNSPSC Code: 12352202
• Form: lyophilized powder
• Biological source: Canavalia ensiformis (jack bean)

Eigenschaften

• biological source: Canavalia ensiformis (jack bean)
• Quality Segment: 200
• conjugate: peroxidase conjugate
• form: lyophilized powder
• technique(s): blood typing: suitable, fractionation: suitable
• impurities: carbohydrate, essentially free
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

Application

Detects glycoproteins containing α-D-mannose, α-D-glucose when used with appropriate peroxidase substrate

General Western Blot Protocol:

• Glycoprotein sample size: 500ng
• Lectin Concentration: 0.1ug/ml

1. Load samples at 500 ng of glycoprotein per lane
2. Run 4-20% Bis-Tris SDS page gel
3. Transfer gel to a PVDF membrane
4. Block membrane for 1 hr at RT with RIPA buffer (R0278 Sigma)
5. Incubate HRP lectin at 0.1ug/ml with RIPA buffer for 2 hours at RT
6. Wash membrane 5 x 5 minutes with 25ml RIPA buffer
7. Detect using chemiluminescent substrate (CPS1-120)

Biochem/physiol Actions

Con A ist nicht blutgruppenspezifisch, hat aber eine Affinität für terminale α-D-Mannosyl- und α-D-Glucosylreste. Für ihre Aktivität sind Ca²⁺- und Mn²⁺-Ionen erforderlich. Bei einem pH-Wert von unter 5,6 löst Con A sich zu Dimeren auf. Bei einem pH-Wert von 5,8 bis 7,0 liegt Con A als Tetramer vor; bei einem pH-Wert über 7,0 bilden sich Aggregate. Con A weist eine mitogene Aktivität auf, die vom Ausmaß der Aggregation abhängt. Succinylierung führt zu einer aktiven dimeren Form, welche bei einem pH-Wert von mehr als 5,6 ihre Form beibehält.

Packaging

Package size based on protein content

Physical form

Lyophilized powder containing tris-citrate buffer salts and trace calcium and manganese

Preparation Note

Prepared from peroxidase type VI (P8375), using the method of Wilson and Nakane, which promotes conjugation but prevents the interaction between Con A and peroxidase sugar residues.

Analysis Note

Falls angegeben, wird die Agglutinationsaktivität in μg/ml ausgedrückt und durch Serienverdünnungen einer phosphatgepufferten 1-mg/ml-Kochsalzlösung mit einem pH-Wert von 6,8, welche Ca²⁺ und Mn²⁺ enthält, bestimmt. Diese Aktivität ist die niedrigste Konzentration, bei der eine 2 % Humanerythrozytensuspension nach einstündiger Inkubation bei 25 °C agglutiniert.

Other Notes

One unit will form 1 mg purpurogallin in 20 sec from pyrogallol at pH 6.0 at 20 °C.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H317,H334,H361
• pcodes: P202 - P261 - P272 - P280 - P302 + P352 - P308 + P313
• Hazard Classifications: Repr. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Faceshields, Gloves, type P3 (EN 143) respirator cartridges