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DUO92012

Sigma-Aldrich

Duolink® In Situ Detection Reagents Brightfield

Synonym(e):

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item

UNSPSC-Code:
12352200
NACRES:
NA.32

Produktlinie

Duolink®

Verpackung

pkg of Box A (-20°C)
pkg of Box B (2-8°C)

Methode(n)

proximity ligation assay: suitable

Eignung

suitable for brightfield

Lagertemp.

−20°C

Verwandte Kategorien

Anwendung

Der Duolink®Proximity Ligation Assay (PLA®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Beachten Sie das Duolink®-In-situ-Hellfeldprotokoll zur Anwendung dieses Produkts.

Besuchen Sie unser Duolink®-PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink®-Versuchen, Anwendungen, Fehlerbehebungen und andere Sachverhalten finden.

Zur Durchführung eines kompletten Duolink®-PLA-In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Detektionsreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink®-PLA-Sonden. Die Analyse wird mit HRP zur Detektion im Hellfeld durchgeführt.

Spezifität
Hellfeld-Detektionsreagenzien werden für Proben mit starker Autofluoreszenz eingesetzt.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz- (IF), immunhistochemischen (IHC) oder immunzytochemischen (ICC) Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, formalinfixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine minimale Zellzahl erforderlich.

Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! Informieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung Ihrer Duolink®-Projekte

Vollständige Duolink®-Produktliste
Spezifität
Hellfeld-Nachweisreagenzien werden für Proben mit deutlicher Autofluoreszenz verwendet.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz-(IF-), immunhistochemischen (IHC-) oder immunzytochemischen (ICC-)Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, Formalin-fixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine Mindestanzahl von Zellen erforderlich.

Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! lnformieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung der Duolink®-Projekte

Sehen Sie sich die vollständige Duolink®-Produktliste an

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
  • Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
  • Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling-Circle-Amplifikation)
  • Relative Quantifizierung möglich
  • Keine Spezialgeräte erforderlich
  • Schneller und einfacher als FRET
  • Höhere Präzision als co-IP
  • Publikationsreife Ergebnisse

Komponenten

Dieses Produkt besteht aus folgenden Komponenten:
Box A:
  • 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
  • 1x Ligase (1 Einheit/μL)
  • 5x Amplifikation - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling-Circle-Amplifikation (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase
  • 5x Hellfeld-Detektion - Enthält Oligonukleotid-Sonden, die mit Meerrettichperoxidase (HRP) markiert sind und an das RCA-Produkt hybridisieren
  • 1x Polymerase (10 Einheiten/μL)

Box B:
  • 1x Wasserstoffperoxid - Enthält 0,3 % Wasserstoffperoxid
  • Substrat-Reagenzien A–D - Enthalten alle für die enzymatischen Reaktionen von HRP benötigten Substratkomponenten
  • 1x Kernfärbung - Enthält Mayers Hämatoxylinlösung für die Zellkernfärbung
Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Nicht im Detektionskit enthalten:

Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel

Sonstige Hinweise

Lagerung und Stabilität
Box A und alle Komponenten bei -20 °C lagern. Die Enzyme müssen kontinuierlich eingefroren sein (-20 °C). Beim Entfernen aus dem Gefrierschrank einen Gefrierblock verwenden.
Box B und alle Komponenten bei 2–8 °C lagern.

Rechtliche Hinweise

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Signalwort

Danger

Gefahreneinstufungen

Acute Tox. 3 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 2 - Muta. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1

Lagerklassenschlüssel

3 - Flammable liquids

Flammpunkt (°F)

42.8 °F

Flammpunkt (°C)

6 °C

Analysenzertifikate (COA)

Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.

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Free fatty acid receptors 2 and 3 (FFAR2/FFA2/GPR43 and FFAR3/FFA3/GPR41) are mammalian receptors for gut microbiota-derived short-chain fatty acids (SCFAs). These receptors are promising drug targets for obesity, colitis, colon cancer, asthma, and arthritis. Here, we demonstrate that FFAR2 and
Agata Zieba et al.
Clinical chemistry, 56(1), 99-110 (2009-11-21)
The in situ proximity ligation assay (PLA) allows a protein or protein complex to be represented as an amplifiable DNA molecule. Recognition is mediated by proximity probes consisting of antibodies coupled with oligonucleotides. Upon dual binding of the proximity probes
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Sonic hedgehog (SHH) is a regulator of forebrain development that acts through its receptor, patched 1. However, little is known about cellular mechanisms at neurulation, whereby SHH from the prechordal plate governs specification of the rostral diencephalon ventral midline (RDVM)
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PSA is the most useful prostate cancer marker. However, its levels are increased also in some non-malignant conditions. In circulation, the majority of PSA is complexed with protease inhibitors, including α(1) -antichymotrypsin (ACT). The proportion of the PSA-ACT complex is
Michaela Graf et al.
Human reproduction (Oxford, England), 26(1), 59-66 (2010-11-30)
Dysfunction of cellular processes in the testes can lead to infertility, tumourigenesis or other testicular disorders. 14-3-3 proteins are known to play pivotal roles in cellular communication, signal transduction, intracellular trafficking, cell-cycle control, transcription and cytoskeletal structure and have been
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