Allgemeine Beschreibung
Proliferating-Cell-Nuclear-Antigen (UniProt: P04961; auch als PCNA bekannt) wird bei Ratten durch das Pcna-Gen (Gen-ID: 25737) kodiert. PCNA ist ein homotrimeres Zellkernprotein, das als Hilfsprotein von DNA-Polymerase delta dient und durch Steigern der Verarbeitbarkeit der Polymerase während der Elongation des Leitstrangs an der Steuerung der eukaryotischen DNA-Replikation beteiligt ist. Es leitet eine robuste stimulierende Wirkung an der 3′-5′-Exonuklease und 3′-Phosphodiesterase ein, jedoch nicht die Aktivität der apurinisch-apyrimidinischen (AP) Endonuklease APEX2. Es wurde beschrieben, dass es mit CREBBP, EP300 und POLD1 an Stellen mit DNA-Schäden kolokalisiert. Es dient als Ladeplattform zum Rekrutieren von DDR-Proteinen, die einen Abschluss der DNA-Replikation nach DNA-Schäden ermöglichen und die Reparatur nach der Replikation fördern. PCNA kann an Tyrosin 211 eine Phosphorylierung durch EGFR durchlaufen, die Chromatin-assoziiertes PCNA stabilisiert. Nach DNA-Schäden kann es eine Monoubiquitinierung, um eine direkte Umgehung von DNA-Läsionen durch spezialisierte DNA-Polymerasen zu stimulieren oder eine Polyubiquitinierung, um die Rekombinations-abhängige DNA-Synthese über DNA-Läsionen durch Matrizenwechsel-Mechanismen zu fördern, durchlaufen. Mutationen im PCN-Gen lösen Ataxia-Teleangiectasia-ähnliche Krankheit 2 (ATLD2) aus, die durch verzögerte Entwicklung, Ataxie, Gehörverlust und Kleinwuchs charakterisiert ist.
Spezifität
Klon PC10 erkennt PCNA von allen getesteten Wirbeltier- und Insektenspezies und wurde zur Identifizierung von transformierten Zellen (Kurki, 1988), proliferierenden Zellen in soliden Tumoren (Smetana, 1983) und Blastenzellen bei Leukämiepatienten (Takasaki, 1984) verwendet. Die Immunhistochemie mit dem Klon PC10 wurde zur Untersuchung der PCNA-Expression in Paraffinschnitten von normalem Gewebe und lymphoiden Neoplasmen verwendet (Hall, 1990). In proliferierenden Zellen ist das PCNA-Färbemuster überwiegend nuklear. In Western-Blot weist der Antikörper ein Polypeptid nach, das bei 36 kDa mit einem isoelektrischen Punkt von 4,8 migriert.
Immunogen
Ratten-PCNA, induziert im Protein-A-Expressionsvektor pR1T2T.
Anwendung
Anti-PCNA-Antikörper, Klon PC10, ist ein monoklonaler Maus-Antikörper zum Nachweis von PCNA, auch als Proliferating-Cell-Nuclear-Antigen, DNA Polymerase delta Processivity Factor bekannt, der in ELISA, FC, IP, WB und IHC(P) validiert wurde.
Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion
Forschungsunterkategorie
Zellzyklus, DNA-Replikation & -Reparatur
Physikalische Form
Der monoklonale Antikörper liegt in einer Konzentration von 100 μg/ml in phosphatgepufferter Kochsalzlösung mit 10 mmol/l Natriumazid und 1 mg/ml Rinderserumalbumin vor. Wir empfehlen, dass jedes Labor einen optimalen Arbeitstiter zur Verwendung in seiner speziellen Anwendung bestimmt.
Format: Aufgereinigt
Lagerung und Haltbarkeit
Zur Verwendung innerhalb 1 Monats ab dem Erwerb bei +4 °C aufbewahren; für die Langzeitlagerung den Antikörper in kleine Volumina aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden.
Hinweis zur Analyse
Kontrolle
POSITIVKONTROLLE: Mandeln oder reaktive Lymphknoten.
Sonstige Hinweise
Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.
Rechtliche Hinweise
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Haftungsausschluss
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