Roche PCR 시약 및 PCR 프로토콜

• 일상적인 핫스타트 PCR을 위한 Roche PCR 시약 선택 가이드
• 높은 충실도, 까다로운 템플릿 및 긴 PCR 증폭을 위한 Roche PCR 시약 선택 가이드
  
• Taq DNA 중합효소 및 표준 PCR 프로토콜
• FastStart™ Taq DNA 중합효소 및 Master Mix
• FastStart™ High Fidelity PCR 시스템
• Expand™ High Fidelity PCR 시스템 및 Expand™ High Fidelity^PLUS PCR 시스템
• PWO SuperYield DNA 중합효소
• 까다로운 템플릿 PCR을 위한 GC-RICH PCR 시스템
• Expand™ Long Range, dNTPack
• PCR 최적화를 위한 제품

 

일상적인 핫스타트 PCR을 위한 Roche PCR 시약 선택 가이드

PCR 애플리케이션	일상적 PCR	핫스타트(Hot Start)	멀티플렉스/시퀀싱
원하는 효소 선택:	Taq DNA 중합효소	FastStart™ Taq DNA 중합효소	FastStart™ High Fidelity PCR 시스템
숙련도	일관성	특이성	정확성
앰플리콘 크기	최대 3 kb	최대 3 kb	최대 5 kb
특이성
감도
강건성
정확성과 Taq 비교	1x	1x	4x
캐리오버(Carryover) 방지	가능	가능	가능
유닛/50 μL	1.25	2	2.5
분자 클로닝:	TA 클로닝	TA 클로닝	TA 클로닝
효소	Taq DNA 중합효소, 5 U/μL Taq DNA 중합효소, 1 U/μL	FastStart™ Taq DNA 중합효소, 5 U/μL	FastStart™ High Fidelity PCR 시스템
효소, GMP 등급	Taq DNA 중합효소, GMP 등급, 5 U/μL
dNTPack	Taq DNA 중합효소, dNTPack, 5 U/μL Taq DNA 중합효소, dNTPack, 1 U/μL	FastStart™ Taq DNA 중합효소, dNTPack, 5 U/μL	FastStart™ High Fidelity PCR 시스템, dNTPack
마스터 믹스(Master Mix)	PCR Master	FastStart™ PCR Master

높은 충실도, 까다로운 템플릿 및 긴 PCR 증폭을 위한 Roche PCR 시약 선택 가이드

* 캐리오버 방지 및 6배 더 높은 충실도가 필요하십니까? Expand™ High FidelityPLUS PCR 시스템을 선택하세요. ** 20~35 kb 앰플리콘 크기에 대해 Expand™ 20 kbPLUS PCR 시스템을 선택하십시오.

PCR 애플리케이션	광범위한 다양성/간편한 액세스	높은 충실도	까다로운 템플릿	Long Range
원하는 효소 선택:	Expand™ High Fidelity PCR 시스템	PWO SuperYield DNA 중합효소	GC-RICH PCR 시스템	Expand™ Long Range
숙련도	강건성	충실도	신뢰성	다목적
앰플리콘 크기	최대 5 kb	최대 3 kb	최대 5 kb	5~25 kb**
특이성
감도
강건성
정확성과 Taq 비교	3x	18x	3x	3x
캐리오버(Carryover) 방지	불가능*	불가능	불가능	불가능
유닛/50 μl	2.6	2.5	2	3.5
분자 클로닝:	TA 클로닝	평활 말단 클로닝	평활 말단 클로닝보다 더 많이 사용되는 TA 클로닝	TA 클로닝
효소	Expand™ High  Fidelity  PCR 시스템 Expand™ High  FidelityPLUS  PCR 시스템	Pwo SuperYield DNA 중합효소	GC-RICH PCR 시스템
dNTPack	Expand™ High  Fidelity  PCR 시스템,  dNTPack Expand™ High  FidelityPLUS PCR  시스템, dNTPack	Pwo SuperYield  DNA  중합효소,  dNTPack	GC-RICH PCR  시스템,  dNTPack	Expand™  Long Range,  dNTPack
마스터 믹스(Master Mix)	High Fidelity PCR Master	Pwo Master

최첨단 과학 기술은 경제성을 위해 타협해서는 안 됩니다. PCR 기술 도입 이후로 Roche는 PCR 시약에 최적 표준을 제공해 왔습니다. Roche는 향상된 분리, 정화 및 제조 기술을 통해 가장 명확하고 신뢰할 수 있는 결과와 모든 실험실 예산에 적합한 편리성과 경제성을 제공합니다.

• 신뢰성 – 로트 간, 튜브 간 그리고 실험 간에 귀중한 결과를 얻을 수 있습니다.
• 성능 – 고급 효소와 PCR 등급의 뉴클레오티드를 편리한 dNTPack에 결합하여 감도와 수율을 향상시킬 수 있습니다.
• 일관성 – 프라이머와 템플릿만 추가하면 되는 마스터 믹스(master mix)를 사용하여 실험 성능을 극대화할 수 있습니다.

PCR 등급의 뉴클레오티드를 통해 최적 성능을 보장합니다.

PCR의 성공 여부는 효소와 뉴클레오티드의 선택에 크게 좌우됩니다. Roche PCR 효소는 나트륨 무첨가 뉴클레오티드의 예혼합 용액이 포함된 dNTPack으로 편리하게 시용할 수 있습니다. 이러한 기능 테스트를 거친 PCR 등급 뉴클레오티드는 효소 합성으로 제조되어 고유한 프로세스로 정제되며 PCR 결과 품질에 가장 이상적으로 기여합니다.

• 순도 – PCR 민감성을 개선하기 위해 화학적으로 합성된 뉴클레오티드 제제에 대표적으로 사용되는 현재의 품질 절차에 따라 염기 변형, 사인산 또는 피로인산염 오염물이 없는 뉴클레오티드를 선택합니다.
• 안정성 – 최적의 pH로 공급되는 dNTP를 사용하여 제품 수명을 늘리고 반응 안정성을 개선하여 수율을 극대화합니다.

Taq DNA 중합효소 및 표준 PCR 프로토콜

최소한의 템플릿 요건을 사용하여 강력한 증폭을 얻을 수 있는 합리적인 PCR입니다.

Roche Taq DNA 중합효소는 GMP 조건 하에서 생산됩니다. 고도로 정제된 효소는 기능성과 순도에 대한 몇 가지 엄격한 테스트를 거쳐 모든 로트에 대해 신뢰할 수 있는 일관된 결과를 보장합니다. 자세한 정보는 표준 PCR 프로토콜을 확인하십시오.

• 로트 간 뛰어난 일관성으로 신뢰할 수 있으며 재현 가능한 결과를 제공합니다.
• 당사는 테스트를 대신하며, 고객은 새로운 로트마다 테스트할 필요가 없습니다.
• dUTP 통합과 Uracil-DNA 글리코실라아제를 결합하여 PCR 교차 오염을 방지합니다.

그림 1. 로트 간 일관성으로 재현 가능한 결과를 보장합니다. Taq DNA 중합효소의 5가지 서로 다른 로트는 람다 DNA의 0.5 kb 절편을 증폭하는 능력에 대해 테스트되었습니다. Roche Taq DNA 중합효소의 모든 로트가 테스트되었으며 신뢰할 수 있는 일관된 결과를 보장합니다.

GMP 등급의 Taq DNA 중합효소는 고성능의 검증된 증폭 효소 제품군에 속하며 평가 완료된 생산, 품질 관리 및 충진 절차를 통해 제조됩니다.

앰플리콘 크기	특이성	감도	강건성	정확성 과 Taq 비교	캐리오버(Carryover) 방지	유닛 /50 µL	분자 클로닝:
최대 3 kb				1x	가능	1.25	TA 클로닝

제품	SKU	팩 크기
Taq DNA 중합효소 | 효소 + 버퍼
5 U/μL	11 146 173 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 1,000회 반응을 위해 500 U 필요
	11 418 432 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 2,000회 반응을 위해 1,000 U(4 × 250 U) 필요
	11 596 594 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 5,000회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
	11 435 094 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 10,000회 반응을 위해 5,000 U(20 × 250 U) 필요
1 U/μL	11 647 687 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 2,000회 반응을 위해 1,000 U(4 × 250 U) 필요
Taq DNA 중합효소, dNTPack | 효소 + 버퍼 + dNTP 세트
5 U/μL	04 728 866 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 200회 반응을 위해 100 U 필요
	04 728 874 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 1,000회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
	04 728 882 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 2,000회 반응을 위해 1,000 U(4 × 250 U) 필요
	04 728 904 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 5,000회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
	04 728 858 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 10,000회 반응을 위해 5,000 U(20 × 250 U) 필요
1 U/μL	04 738 225 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 500회 반응을 위해 250 U 필요
	04 738 241 001	Taq DNA 중합효소를 각각 0.5 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 2,000회 반응을 위해 1,000 U(4 × 250 U) 필요
PCR Master | 즉시 사용 가능한 제형 - 효소, 버퍼, dNTP
	11 636 103 001	Taq DNA 중합효소를 각각 2.5 U 포함하는 최종 반응 부피 50 μL는 최대 200회 PCR 반응을 위해 키트 1개 필요

FastStart™ Taq DNA 중합효소 및 Master Mix

qPCR 및 LightCycler^® 시스템과 마찬가지로 연구자들이 신뢰하는 중합효소를 선택하십시오.

FastStart™ Taq DNA 중합효소는 내열성을 갖는, 화학적으로 변형된 형태의 재조합형 Taq DNA 중합효소입니다. 이러한 변형 때문에 FastStart™ Taq DNA 중합효소는 고온에서만 활성화되며, 분석의 증폭이 지연되는 경우에 이상적인 효소입니다.

• 더 높은 특이성, 감도 및 수율을 제공합니다. PCR 성능을 향상시킨 핫스타트 PCR은 PCR 설정을 훨씬 간편하게 만듭니다.
• 편리한 로봇 설정 기능을 사용하십시오. 완전한 반응 혼합물은 실온에서 24시간 동안 안정화됩니다.
• PCR 캐리오버를 방지합니다. dUTP 통합과 Uracil-DNA 글리코실라아제를 결합하여 PCR 교차 오염을 방지합니다.

그림 4. 실온에서 반응 설정 후 즉시(E0) 및 24시간이 지난 후(E24) 3-300 ng cDNA에서 증폭한 인간의 적혈구 생성 촉진 인자(erythropoietin) 유전자입니다.

앰플리콘 크기	특이성	감도	강건성	정확성 과 Taq 비교	캐리오버(Carryover) 방지	유닛 /50 µL	분자 클로닝:
최대 3 kb				1x	가능	2 µL	TA 클로닝

제품	SKU	팩 크기
FastStart™ Taq DNA 중합효소 | 효소 + 버퍼
5 U/μL	12 032 929 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 250회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
	12 032 937 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 500회 반응을 위해 1,000 U(4 × 250 U) 필요
	12 032 945 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 1,250회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
	12 032 953 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 2,500회 반응을 위해 5,000 U(20 × 250 U) 필요
FastStart™ Taq DNA 중합효소, dNTPack | 효소 + 버퍼 + dNTP 세트
5 U/μL	04 738 314 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 50회 반응을 위해 100 U 필요
	04 738 357 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 250회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
	04 738 381 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 500회 반응을 위해 1,000 U(4 × 250 U) 필요
	04 738 403 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 1,250회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
	04 738 420 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 2,500회 반응을 위해 5,000 U(20 × 250 U) 필요
FastStart™ PCR Master | 즉시 사용 가능한 제형 - 효소 + 버퍼 + dNTP
	04 710 436 001	20 μL 최종 부피는 최대 250회 반응하기 위해 2 × 1.25 mL 필요
	04 710 444 001	20 μL 최종 부피는 최대 1,000회 반응하기 위해 8 × 1.25 mL 필요
	04 710 452 001	20 μL 최종 부피는 최대 5,000회 반응하기 위해 10 × 5 mL 필요

FastStart™ High Fidelity PCR 시스템

멀티플렉싱 및 시퀀싱이 엄격한 핫스타트 및 향상된 충실도는 멀티플렉싱과 시퀀싱과 같은 복잡한 엔드포인트 PCR 애플리케이션에 매우 중요합니다. 멀티플렉싱 및 시퀀싱에 요구되는 최대 5 kb의 복잡한 핫스타트 PCR에 FastStart™ High Fidelity PCR 시스템을 선택하십시오. 표준 Taq DNA 중합효소 및 FastStart™ Taq DNA 중합효소 모두와 비교하여 최대 6배 더 정확합니다.

• 뛰어난 멀티플렉스 성능을 제공하여 고품질의 결과를 빠르게 얻을 수 있습니다.
• Taq 및 FastStart™ Taq DNA 중합효소 대비 6배 높은 충실도를 경험해 보십시오.
• 까다로운 템플릿 증폭에는 함께 제공된 PCR 첨가제(DMSO)를 사용하십시오.

그림 5. 18-플렉스(74 bp ~ 470 bp) PCR의 감도 테스트입니다. 인간 유전체 DNA의 다양한 농도에 18 세트의 멀티플렉스 프라이머를 적용했습니다.

앰플리콘 크기	특이성	감도	강건성	정확성 과 Taq 비교	캐리오버(Carryover) 방지	유닛 /50 µL	분자 클로닝:
최대 5 kb				6x	가능	2.5	TA 클로닝

제품	SKU	팩 크기
FastStart™ High Fidelity PCR 시스템 | 효소 + 버퍼
	03 553 400 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2.5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 200회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
	03 553 361 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2.5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 1,000회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
FastStart™ High Fidelity PCR 시스템, dNTPack | 즉시 사용 가능한 제형 - 효소, 버퍼, dNTP
	04 738 284 001	FastStart Taq DNA 중합효소를 각각 2.5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 50회 반응을 위해 125 U 필요
	04 738 292 001	FastStart를 각각 2.5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 200회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요

Expand™ High Fidelity PCR 시스템 및 Expand™ High FidelityPLUS PCR 시스템

Expand™ High Fidelity PCR 시약은 광범위한 검사 및 앰플리콘 유형에 대한 강력한 증폭을 위해 설계되었으며 Taq DNA 중합효소와 강력한 PCR을 위한 교정 활동을 가진 중합효소의 효소 혼합으로 구성됩니다. PCR 캐리오버 방지 기능을 갖춘 최대 5 kb의 강력한 PCR을 위한 시스템인 Expand™ High Fidelity^PLUS PCR 시스템을 선택하십시오.

• 모든 응용 분야에 대해 한 가지 효소를 사용합니다. Expand™ High Fidelity PCR 시스템은 광범위한 템플릿을 강력하게 증폭하여 향상된 수율, 충실도 및 유연성을 보장합니다.
• 이전에는 감지할 수 없었던 증폭 생산물을 감지하여 거짓 음성을 예방합니다.
• 소량의 DNA 템플릿으로 성공적인 PCR 결과를 제공합니다.

Expand™ High Fidelity^PLUS PCR 시스템은 방사성 또는 비방사성으로 변형된 뉴클레오티드로 DNA 절편을 복제 및 표지화(labeling)하는 등 강력하고 높은 충실도를 요구하는 애플리케이션에 이상적입니다. 또한, dUTP 통합과 Uracil-DNA 글리코실라아제를 결합하여 PCR 교차 오염을 방지합니다.

그림 6. 4가지 상용화된 중합효소 혼합물과 Expand™ High FidelityPlus PCR 시스템의 비교입니다. 각 제조업체에서 권장하는 조건에 따라 조직 플라스미노겐 활성화 인자(tPA) 유전자에서 4.8 kb 절편을 증폭하는 데 다양한 정도(ng)의 인간 유전체 DNA가 사용되었습니다. Expand High FidelityPLUS PCR 시스템은 1 ng의 인간 유전체 DNA에서도 뛰어난 특이성, 감도 및 수율을 제공합니다.

공급업체 A: Taq DNA 중합효소(N-말단에서 제거), 교정 중합효소 및 핫스타트 항체의 혼합물.
공급업체 B 및 D: Taq DNA 중합효소 및 교정 중합효소의 혼합물.
공급업체 C: Taq DNA 중합효소,교정 중합효소 및 강화 인자의 혼합물.

앰플리콘 크기	특이성	감도	강건성	정확성 과 Taq 비교	캐리오버(Carryover) 방지	유닛 /50 µL	분자 클로닝:
최대 5 kb				3x	불가능*	2.6	TA 클로닝

제품	SKU	팩 크기
Expand™ High Fidelity PCR 시스템 | 효소 + 버퍼
	11 732 641 001	효소 혼합물을 각각 2.6 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 40회 반응을 위해 100 U 필요
	11 732 650 001	효소 혼합물을 각각 2.6 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 200회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
	11 759 078 001	효소 혼합물을 각각 2.6 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 1,000회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
Expand™ High Fidelity PCR, dNTPack | 효소 + 버퍼 + dNTP 세트
	04 738 250 001	효소 혼합물을 각각 2.6 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 40회 반응을 위해 100 U 필요
	04 738 268 001	효소 혼합물을 각각 2.6 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 200회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
	04 738 276 001	효소 혼합물을 각각 2.6 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 1,000회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
High Fidelity PCR Master | 즉시 사용 가능한 제형 - 효소, 버퍼, dNTP
	12 140 314 001	최종 반응 부피 20 μL는 최대 500회 반응을 위해 1키트 필요

제품	SKU	팩 크기
Expand™ High FidelityPLUS PCR 시스템 | 효소 + 버퍼
	03 300 226 001	효소 혼합물을 각각 1 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 500회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
	03 300 234 001	효소 혼합물을 각각 1 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 2,500회 반응을 위해 2,500 U(10 × 250 U) 필요
Expand™ High FidelityPLUS PCR 시스템, dNTPack | 효소 + 버퍼 + dNTP 세트
	04 743 725 001	효소 혼합물을 각각 1 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 125회 반응을 위해 125 U 필요
	04 743 733 001	효소 혼합물을 각각 1 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 500회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요

PWO SuperYield DNA 중합효소

수율을 저해하지 않으면서 시퀀스 정확도가 중요한 응용 분야에서는 High fidelity PCR이 필요합니다. Pwo SuperYield DNA 중합효소를 사용하여 일관된 높은 충실도로 높은 수율의 PCR 생산물을 얻을 수 있습니다. 최대 충실도를 선택하고 Transcriptor High Fidelity cDNA 합성 키트 등의 교정 역전사와 결합할 때 시퀀스 오류, 염기 교환 및 프레임 이동을 방지합니다. 이 조합은 클로닝, 부위 특이적 돌연변이 유도 및 유전자 발현 분석과 같은 응용 분야에 이상적입니다.

• 뛰어난 충실도 및 높은 수율을 제공합니다. 최적화할 필요 없이 Taq DNA 중합효소 대비 18배 높은 충실도를 제공합니다.
• 까다로운 템플릿으로 높은 성능을 제공합니다. GC-RICH 솔루션을 사용하여 GC 함량이 높은 DNA의 증폭이 가능합니다.
• 클로닝 작업 단계를 줄입니다. Pwo SuperYield PCR 혼합물에서 효소 소화를 직접 수행합니다.

그림 7. RT-PCR의 정확도를 개선합니다. 교정 역전사 효소, Transcriptor High Fidelity 역전사 효소(Roche) 및 교정 중합효소, 증폭에 사용되는 Pwo SuperYield DNA 중합효소(Roche)의 조합으로 제공됩니다. 일반적으로 사용되는 M-MuLV 역전사 효소 및 Taq DNA 중합효소에 대해 비교한 데이터입니다. 오류율은 454 시퀀싱 시스템을 사용하여 역전사(reverse transcription) 및 25 PCR 사이클 이후 결정되었습니다. 효소에 대한 오류율은 최소 3.1 × 106 염기가 시퀀스된 4개의 독립적인 실험의 평균값으로 제공되었습니다. M-MuLV 역전사 및 Taq DNA 중합효소의 경우 4.5 × 106 염기가 시퀀스되었습니다. 정확도는 오류율-1로 표시됩니다.

앰플리콘 크기	특이성	감도	강건성	정확성 과 Taq 비교	캐리오버(Carryover) 방지	유닛 /50 µL	분자 클로닝:
최대 3 kb				18x	불가능	2.5	평활 말단 클로닝

제품	SKU	팩 크기
Pwo Super Yield DNA 중합효소 | 효소 + 버퍼
	04 340 850 001	Pwo SuperYield DNA 중합효소를 각각 2.5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 200회 반응을 위해 500 U(2 × 250 U) 필요
Pwo Super Yield DNA 중합효소, dNTPack | 효소 + 버퍼 + dNTP 세트
	04 743 750 001	Pwo SuperYield DNA 중합효소를 각각 2.5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 40회 반응을 위해 100 U 필요
Pwo 마스터 | 즉시 사용 가능한 제형 - 효소, 버퍼, dNTP
	03 789 403 001	Pwo SuperYield DNA 중합효소를 각각 2.5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 100회 반응을 위해 2.5 ml(10 × 250 μL) 필요

까다로운 템플릿 PCR을 위한 GC-RICH PCR 시스템

교정 중합효소와 Taq DNA 중합효소를 혼합한 GC-RICH PCR 시스템을 선택하여 다른 중합효소나 다른 중합효소 및 첨가제 혼합물로 증폭하기 어렵거나 불가능한 템플릿을 증폭합니다. 혼합물의 향상된 공정성과 고유한 GC-RICH 분해능 솔루션을 결합하여 우수한 성능을 제공합니다.

• GC 함량이 높은 표적 및 반복 시퀀스를 포함하여 까다로운 템플릿을 증폭할 수 있습니다.
• GC-RICH 분해능 솔루션을 포함하여 제공된 PCR 등급의 물과 최적화된 시약을 사용하십시오.
• DNA 절편을 최대 5 kb까지 증폭합니다.

그림 8. GC-RICH PCR 시스템으로 GC 함량이 높은 템플릿을 성공적으로 증폭하십시오. GC-RICH PCR 시스템 또는 Expand High Fidelity PCR 시스템을 사용하여 인간 ApoE 유전자 내에서 264 bp 템플릿(GC 함량 74 %)을 증폭합니다.

결과: GC-RICH PCR 시스템은 GC-RICH 분해능 솔루션을 사용하여 높은 특이성과 수율로 GC 함량이 높은 절편을 증폭합니다.

앰플리콘 크기	특이성	감도	강건성	정확성 과 Taq 비교	캐리오버(Carryover) 방지	유닛 /50 µL	분자 클로닝:
최대 5 kb				3x	불가능	2	평활 말단 클로닝보다 더 많이 사용되는 TA 클로닝

제품	SKU	팩 크기
GC-RICH PCR 시스템 | 효소 + 버퍼
	12 140 306 001	효소 혼합물을 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 50회 반응을 위해 100 U 필요
GC-RICH PCR 시스템, dNTPack | 효소 + 버퍼 + dNTP 세트
	04 743 784 001	효소 혼합물을 각각 2 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 50회 반응을 위해 100 U 필요

Expand™ Long Range, dNTPack

긴 템플릿 PCR 분야를 개척한 Roche의 차세대 시스템을 이용하십시오. 유전체 DNA에서 얻은 5 ~ 25 kb의 PCR 생성물에 대한 일관된 증폭을 위해 Expand™ Long Range dNTPack을 선택하십시오. 20 kb보다 긴 절편을 증폭하는 경우, use Expand™ 20 kb^PLUS PCR 시스템을 사용하십시오. 이 고유한 시스템은 최적화된 버퍼와 효소 혼합물 기능을 제공합니다.

• 최대 25 kb의 긴 템플릿을 연속적으로 증폭하여 높은 특이성, 수율 및 향상된 충실도를 제공합니다.
• 편리하고 유연한 키트로 시간과 자원을 절약하십시오. 모든 절편 크기에 대해 하나의 버퍼가 사용되며, 제공된 DMSO 및 MgCl₂ 용액을 사용하여 반응을 미세 조정합니다.
• 원하는 절편에 대해서만 높은 수율로 얻을 수 있으며, 모든 긴 템플릿 응용 분야에서 사용됩니다.
• PCR 등급의 뉴클레오티드가 사전 배합된 비용 효율적인 dNTPack을 주문하십시오.

그림 9. Expand™ Long Range, dNTPack을 사용한 다양한 유전체 템플릿의 증폭

앰플리콘 크기	특이성	감도	강건성	정확성 과 Taq 비교	캐리오버(Carryover) 방지	유닛 /50 µL	분자 클로닝:
5 ~ 25 kb				3x	불가능	3.5	TA 클로닝

제품	SKU	팩 크기
Expand™ Long Range, dNTPack | 효소 + 버퍼 + dNTP 세트
	04 829 034 001	효소 혼합물을 각각 1.4 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 125회 반응을 위해 175 U 필요
	04 829 042 001	효소 혼합물을 각각 1.4 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 500회 반응을 위해 700 U 필요
	04 829 069 001	효소 혼합물을 각각 1.4 U 포함하는 최종 부피 20 μL는 최대 2,500회 반응을 위해 3,500 U(5 × 700 U) 필요

* 20~35 kb 앰플리콘 크기에 대해 Expand 20 kbPLUS PCR 시스템을 선택하십시오.

제품	SKU	팩 크기
Expand™ 20 kbPLUS PCR 시스템 | 효소 + 버퍼
	11 811 002 001	효소 혼합물을 각각 5 U 포함하는 최종 부피 50 μL는 최대 40회 반응을 위해 200 U 필요

PCR 최적화를 위한 제품

제품	SKU	팩 크기
PCR 최적화 키트	11 636 138 001	최종 반응 부피 100 μL는 최대 100회 1단계 또는 최대 50회 2단계 최적화 분석을 위해 1 키트 필요
Uracil-DNA 글리코실라아제	11 444 646 001	100 U
Uracil-DNA 글리코실라아제, 이열성	11 775 367 001	100 U
	11 775 375 001	500 U
T4 유전자 32 단백질	10 972 983 001	100 µg
	10 972 991 001	500 µg
PCR 버퍼 세트	11 699 121 001	2 x 2 mL (솔루션당 2 × 1 mL)
MgCl2 10x conc 비포함 PCR 버퍼	11 699 105 001	3 × 1 mL
MgCl2 저장액	11 699 113 001	3 × 1 mL
물, PCR 등급	03 315 843 001	100 mL(25 mL 4바이알)
	03 315 932 001	25 mL(1 mL 25바이알)
	03 315 959 001	25 mL (25 mL 1바이알)
스트립 PCR 튜브 및 캡	11 667 009 001	125 스트립(8 튜브/스트립)