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Merck

HPLCによる分析、Ascentis® Express C18、リン脂質除去処理、HybridSPE®-Phospholipid使用

HPLCによる分析、Ascentis® Express C18、リン脂質除去処理、HybridSPE®-Phospholipid使用 application for SPE, application for LC-MS

材料

SPEチューブまたはプレート

製品番号
詳細
価格

HybridSPE®-Phospholipid

96-well Plate, bed wt. 50 mg, volume 2 mL, pk of 1

分析カラム

製品番号
詳細
価格

Ascentis® Express C18, 2.7 µm HPLCカラム

2.7 μm particle size, L × I.D. 5 cm × 2.1 mm

CONDITIONS

sample preparation

SPE (Solid Phase Extraction)

sample/matrix

rat plasma

SPE well plate

HybridSPE-Precipitation 96-well Plate, 50 mg/well (575656-U)

sample addition

100 μL rat plasma followed by 300 μL 1% formic acid in acetonitrile

elution

apply vacuum

column

Ascentis Express C18, 5 cm x 2.1 mm I.D., 2.7 μm particles (53822-U)

mobile phase

[A] 10 mM ammonium acetate; [B] 10 mM ammonium acetate in acetonitrile

gradient

0 min - 95% (A); 10 min - 50% (A); 18 min - 50% (A); 18.1 min - 95% (A); 22 min - 95% (A)

flow rate

0.5 mL/min

column temp.

35 °C

detector

ABI 3200QT; ESI (+), MRM (184/103 m/z)

injection

5 μL

詳細

アプリケーション

HybridSPE-沈殿:
沈殿
最初に100 μLのラット血漿をHybridSPE-PPTプレートに加えたあと、300 μLの1%ギ酸入りアセトニトリルを加えてタンパク質を沈殿させます。真空には適用しないでください。
撹拌 HybridSPE-PPTプレートをボルテックスで短時間撹拌してください。
真空適用 96ウェル真空多岐管を用いて真空を適用し、溶出液を解析用に回収してください。

標準タンパク質の沈殿:
混合
100 μLのラット血漿と300 μLの1%ギ酸入りアセトニトリルを混合してください。
撹拌 ボルテックスと遠心分離機で撹拌してください。
単離上清を解析用に回収してください。

法的情報

Ascentis is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
HybridSPE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany