D9768
ラムダファージDNA, メチル化 大腸菌宿主株W3110由来
lyophilized powder
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この商品について
CAS番号:
UNSPSC Code:
41106310
EC Number:
293-505-2
NACRES:
NA.52
MDL number:
eCl@ss:
32160414
Form:
lyophilized powder
Storage temp.:
2-8°C
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grade
Molecular Biology
Quality Segment
form
lyophilized powder
mol wt
31.5 × 103 kDa, 48 kb
suitability
suitable for substrate for restriction endonucleases
storage temp.
2-8°C
General description
Phage DNA is isolated from infected E. coli, passed through a series of enzymatic steps before final phenol-chloroform extraction. This methylated lambda DNA is partially cleaved by Bcl I, Cla I, Mbo I, Mbo II, Taq I and Xba I.
Application
λファ-ジは正20面体の頭部と、単線維の長い尾を持ちます。両5′末端には12塩基対の相互に相補性のある一本鎖ヌクレオチドがあり、DNAへの付着末端(cos部位)となります。ファ-ジの尾部は宿主の外膜レセプタに吸着し細胞内にファ-ジDNAを注入します。ファ-ジが大腸菌を溶原化すると、ファ-ジ機能を抑制して、ファ-ジゲノムを長期間にわたり休止(プロファ-ジ)します。この特徴はバクテリオファ-ジに見られ、CI発現を担うCII及びCIII遺伝子を輸送します。CI遺伝子にCI突然変異をもつバクテリオファ-ジはある一定の温度で溶原状態を維持します。
λC1857株に感染した大腸菌W3110株は、大腸菌溶原株を作ります。ファ-ジをpH 8.0の高塩濃度バッファ-で溶解して大腸菌から放出させます。粗混合液を一連の酵素反応を経て、セシウム密度勾配により精製し、ファ-ジDNAを1mM Tris-HCl溶液(pH 8.0, 1mM 塩化マグネシウム)で透析します。DNAは最終的にフェノ-ル-クロロホルム溶液で抽出しています。
λC1857株に感染した大腸菌W3110株は、大腸菌溶原株を作ります。ファ-ジをpH 8.0の高塩濃度バッファ-で溶解して大腸菌から放出させます。粗混合液を一連の酵素反応を経て、セシウム密度勾配により精製し、ファ-ジDNAを1mM Tris-HCl溶液(pH 8.0, 1mM 塩化マグネシウム)で透析します。DNAは最終的にフェノ-ル-クロロホルム溶液で抽出しています。
Lambda Phage DNA, Methylated from Escherichia coli host strain W3110 is suitable for use as a substrate for restriction enzymes. It was used for immunoprecipitation in ChIP assays.[1]
Lambda Phage DNA, Methylated from Escherichia coli host strain W3110 has been used in DNA combing to determine the conversion factor.
Biochem/physiol Actions
特異的制限酵素認識部位:ApaI,NaeI,NarI,NheI,PaeR7 I,SnaBI,XbaI, XhoI。 メチル化ラムダは部分的にBclI,ClaI,MboI,MboII,TaqI, XbaIで切断されます。
Preparation Note
Add the appropriate amount of 1x Tris-EDTA buffer, pH 8.0 (Product No. T9285, diluted to 1x, or comparable), to the vial.
Incubate the DNA sample vial at 65 °C for 4 hrs with frequent mixing.
After reconstitution, the product should be stored at -20 °C.
Incubate the DNA sample vial at 65 °C for 4 hrs with frequent mixing.
After reconstitution, the product should be stored at -20 °C.
Other Notes
1O.D.(A260)は約50μgDNAに相当します。
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当該品目 | |||
|---|---|---|---|
| grade Molecular Biology | grade Molecular Biology | grade Molecular Biology | grade Molecular Biology |
| Quality Level 200 | Quality Level 300 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
| form lyophilized powder | form solution | form solution | form lyophilized powder |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. 2-8°C |
| mol wt 31.5 × 103 kDa, 48 kb | mol wt 31.5 × 103 kDa, 48 kb | mol wt 31.5 × 103 kDa, 48 kb | mol wt >45 kb |
| suitability suitable for substrate for restriction endonucleases | suitability suitable for substrate for restriction endonucleases | suitability suitable for substrate for restriction endonucleases | suitability - |
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保管分類
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 3
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)