The percentage of methylation is not determined, however the enzymes used to produce this product completely cleave non-methylated lambda DNA. The methylated product is purified following this digestion process.
D3779
ラムダファージDNA, メチル化 大腸菌宿主株W3110由来
solution
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この商品について
Form:
solution
Storage temp.:
−20°C
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grade
Molecular Biology
Quality Segment
form
solution
mol wt
31.5 × 103 kDa, 48 kb
concentration
556 μg/mL
suitability
suitable for substrate for restriction endonucleases
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
Phage DNA is isolated from infected E. coli, passed through a series of enzymatic steps before final phenol-chloroform extraction. This methylated lambda DNA is not completely digested by Bcl I, Cla I, Mbo I, Mbo II, Taq I or Xba I whereas non-methylated lambda DNA(product number D3654) is only partially cleaved.
Application
λファ-ジは正20面体の頭部と、単線維の長い尾を持ちます。両5′末端には12塩基対の相互に相補性のある一本鎖ヌクレオチドがあり、DNAへの付着末端(cos部位)となります。ファ-ジの尾部は宿主の外膜レセプタに吸着し細胞内にファ-ジDNAを注入します。ファ-ジが大腸菌を溶原化すると、ファ-ジ機能を抑制して、ファ-ジゲノムを長期間にわたり休止(プロファ-ジ)します。この特徴はバクテリオファ-ジに見られ、CI発現を担うCII及びCIII遺伝子を輸送します。CI遺伝子にCI突然変異をもつバクテリオファ-ジはある一定の温度で溶原状態を維持します。
λC1857株に感染した大腸菌W3110株は、大腸菌溶原株を作ります。ファ-ジをpH 8.0の高塩濃度バッファ-で溶解して大腸菌から放出させます。粗混合液を一連の酵素反応を経て、セシウム密度勾配により精製し、ファ-ジDNAを1mM Tris-HCl溶液(pH 8.0, 1mM 塩化マグネシウム)で透析します。DNAは最終的にフェノ-ル-クロロホルム溶液で抽出しています。
λC1857株に感染した大腸菌W3110株は、大腸菌溶原株を作ります。ファ-ジをpH 8.0の高塩濃度バッファ-で溶解して大腸菌から放出させます。粗混合液を一連の酵素反応を経て、セシウム密度勾配により精製し、ファ-ジDNAを1mM Tris-HCl溶液(pH 8.0, 1mM 塩化マグネシウム)で透析します。DNAは最終的にフェノ-ル-クロロホルム溶液で抽出しています。
Lambda Phage DNA, Methylated from Escherichia coli host strain W3110 has been used:
- in magnetic tweezers measurements[1]
- in the preparation of 35S-labeled DNA
- in the preparation of coupled standards (DNA + RNA)
Lambda Phage DNA, Methylated from Escherichia coli host strain W3110 is suitable for use as a substrate for restriction enzymes. It was used to study the attractive forces between condensed DNA double helix by combining single-molecule magnetic tweezers and osmotic stress.[1] 35S-labeled Lambda Phage DNA, Methylated from Escherichia coli host strain W3110 was also used to standardize a method of measuring dissolved DNA in seawater.
Biochem/physiol Actions
特異的制限酵素認識部位:ApaI,NaeI,NarI,NheI,PaeR7 I,SnaBI,XbaI, XhoI。 メチル化ラムダは部分的にBclI,ClaI,MboI,MboII,TaqI, XbaIで切断されます。
Physical form
DNA is supplied in a solution of 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), with 1mM EDTA.
Other Notes
1O.D.(A260)は約50μgDNAに相当します。
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当該品目 | |||
|---|---|---|---|
| grade Molecular Biology | grade Molecular Biology | grade Molecular Biology | grade - |
| Quality Level 200 | Quality Level 300 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
| form solution | form solution | form lyophilized powder | form aqueous glycerol solution |
| shipped in dry ice | shipped in dry ice | shipped in - | shipped in dry ice |
| concentration 556 μg/mL | concentration - | concentration - | concentration ≥2 unit/μL |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. −70°C |
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保管分類
10 - Combustible liquids
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Not applicable
flash_point_c
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