E64-RO

E-64

N-[N-(L-3-Trans-carboxirane-2-carbonyl)-L-leucyl]-agmatine

• 別名: trans-エポキシスクシニル-L-ロイシルアミド(4-グアニジノ)ブタン, L-trans-3-カルボキシオキシラン-2-カルボニル-L-ロイシルアグマチン, N-(trans-エポキシスクシニル)-L-ロイシン 4-グアニジノブチルアミド
• 実験式（ヒル表記法）: C₁₅H₂₇N₅O₅
• CAS番号: 66701-25-5
• 分子量: 357.41
• PubChem Substance ID: 329798998
• UNSPSC Code: 12352202
• Beilstein/REAXYS Number: 1405664
• MDL number: MFCD00080261
• NACRES: NA.54

特性

• assay: >95% (HPLC)
• form: powder
• mol wt: M_r 357.4
• packaging: pkg of 10 mg (10874523001), pkg of 25 mg (11585681001)
• manufacturer/tradename: Roche
• pH range: 2-10
• solubility: ethanol: water (1:1): soluble 20 mg/mL
• storage temp.: 2-8°C
• SMILES string: CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H]1O[C@H]1C(O)=O)C(=O)NCCCCNC(N)=N
• InChI: 1S/C15H27N5O5/c1-8(2)7-9(20-13(22)10-11(25-10)14(23)24)12(21)18-5-3-4-6-19-15(16)17/h8-11H,3-7H2,1-2H3,(H,18,21)(H,20,22)(H,23,24)(H4,16,17,19)/t9-,10+,11+/m0/s1
• InChI key: LTLYEAJONXGNFG-HBNTYKKESA-N

詳細

Application

E-64 is used for the inhibition of papain and other cysteine proteases such as cathepsin B and L, bromelain, and ficin during isolation and purification of proteins and enzymes.
It has been used in the affinity chromatography for the purification of hemoglobin receptors.
The inhibition of thiol proteases by E-64 appears to be of a non-competitive nature between the SH components. The inhibition is also irreversible, and is altered after gel filtration (Sephadex column) or dialysis after incubation of papain with E-64. The enzyme and inhibitor combine in an equimolar ratio.

E-64は、システインプロテアーゼのアフィニティー精製のための有効なリガンドです。チオラートを結合させたアフィニティーマトリックスに固定化すると、結合が不可逆的なものではなくなりますが、特異性は保持されます。

Biochem/physiol Actions

E-64はシステインプロテアーゼに対して不可逆かつ強力に作用する高選択性のインヒビターです。E-64は、L-乳酸脱水素酵素やクレアチンキナーゼなどプロテアーゼ以外の酵素にあるチオール基には反応しません。E-64は、他のシステインプロテアーゼインヒビターであるロイペプチンやアンチパインとは異なり、セリンプロテアーゼ(トリプシンを除く)を阻害することはありません。各種のシステインプロテアーゼ、例えばパパインやアクチニダーゼ、カテプシンB・H・Lなどの活性チオール基に対し、本製品のtrans-エポキシスクシニル基(活性部分)が不可逆的に結合して、チオエーテル結合を形成します。E-64は阻害が特異的に起こり、細胞や組織への浸透が可能で、しかも毒性が低いため、システインプロテアーゼインヒビターを用いるin vivo試験には非常に便利です。

システインプロテアーゼの強力かつ不可逆的なインヒビターです。他の酵素のシステイン残基には作用せず、カルパインやカテプシンBなどの低分子量チオールにも反応しません。有効濃度は1～10 μMです。

The thiol protease inhibitor E-64 specifically inhibits papain and other cysteine proteases such as cathepsin B and L, bromelain, and ficin. Cathepsin A and D are not inhibited. L-lactate dehydrogenase from porcine heart is not inhibited, although the enzyme contains a functional thiol group.

Preparation Note

E-64は水に可溶です。水への溶解性は20 mg/mLです(加熱が必要になる場合があります)。ストック溶液としては1 mMの水溶液をお使いください。プロテアーゼインヒビターとして用いる場合の有効濃度は1～10 μMです。ストック溶液は-20°Cで数ヶ月間安定です。希釈後の溶液は中性のpH で数日間安定です。E-64はpH 2～10で安定ですが、アンモニアやHCl中では不安定です。E-64はDMSOにも可溶であり、無水DMSOへの溶解性は10 mMです。DMSO溶液の保存温度は-20°Cです。希釈は培地で行われます。注射液の調製は、0.9%食塩水に溶かすか、または、炭酸水素ナトリウムにE-64を溶解し、(酢酸でpHを7.0に調節した後)0.9%食塩水で希釈されています。

Working concentration: 0.5 to 1.0 μg/ml (1.4 to 28.0 μM)
Working solution: Soluble to 20 mg/ml (stock solution) in a 1:1 (v/v) mixture of ethanol and water (vortexing or slight warming in water bath (40 °C) may facilitate dissolution). Also soluble in a neutral water/methanol solution, in water, methanol, acetic acid, pyridine and DMSO. Sparingly soluble in ethanol and propanol. Insoluble in acetone, chloroform, ethyl ether and benzene.
Storage conditions (working solution): -15 to -25 °C
Solutions are stable for one month when stored in aliquots at -15 to -25 °C.

Soluble to 20 mg/ml in a 1:1 (v/v) mixture of ethanol and water. Solutions are stable for one month when stored in aliquots at -15 to -25 °C.

Other Notes

For life science research only. Not for use in diagnostic procedures.

安全性情報

• pictograms: GHS08
• signalword: Warning
• hcodes: H371
• pcodes: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Hazard Classifications: STOT SE 2
• 保管分類: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 2
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