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Merck
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主要文書

安全性情報

MABN1786

Sigma-Aldrich

抗マーリン(NF2)抗体、クローン1C4

clone 1C4, from mouse

別名:

Merlin, Moesin-ezrin-radixin-like protein, Neurofibromin-2, Schwannomerlin, Schwannomin

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About This Item

UNSPSCコード:
12352203
eCl@ss:
32160702
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由来生物

mouse

品質水準

抗体製品の状態

purified antibody

抗体製品タイプ

primary antibodies

クローン

1C4, monoclonal

化学種の反応性

rat, mouse, human

テクニック

immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

アイソタイプ

IgG1κ

NCBIアクセッション番号

UniProtアクセッション番号

輸送温度

ambient

ターゲットの翻訳後修飾

unmodified

遺伝子情報

human ... NF2(4771)

詳細

マーリン(UniProt P35240、別名モエシン-エズリン-ラディキシン様タンパク質、ニューロフィブロミン-2, Schwannomerlin、Schwannomin)は、ヒトにおいてNF2(別名SCH)遺伝子(Gene ID 4771)によってコードされています。最初に家族性神経線維腫症2型(NF2)癌患者の腫瘍抑制遺伝子として発見されたNF2は、FERM(エズリン, ラディキシン, モエシン)ドメインを含むマーリンをコードしています。これは、Hippo経路の上流活性化因子として機能することにより、細胞の成長と増殖に対して負の調節的役割を果たします。マーリンはMst1/2を直接活性化し、Mst1/2によるリン酸化のために細胞膜にLats1/2を動員します。次に、リン酸化されたLats1/2が、YAP/TAZのリン酸化によりYAP/TAZ転写活性を阻害し、細胞質隔離を引き起こします。また、マーリンは核に移行してE3ユビキチンリガーゼCRL4(DCAF1)を阻害し、それによってLats1/2のユビキチン化およびダウンレギュレーションを予防します。不活性化状態では、マーリンのC末端尾部ドメイン(CTD; a.a. 507-595)は分子内でそのFERMドメイン(a.a. 19-313)に結合しています。Angiomotin(AMOT)は、マーリンCTD内の伸長したヘリックス断片に結合することによってマーリンの活性化を誘導し、その後、マーリンの自己抑制された立体構造を開放します。マーリンCTDはまた、p21活性化キナーゼ(PAK)またはサイクリックAMP依存性プロテインキナーゼ(PKA)によってSer518がリン酸化される場合があり、これによりAMOT結合が弱まるとともに、マーリンが自己阻害状態で安定化します。

特異性

クローン1C4は、マーリン(NF2)を検出しますが、3つのERMタンパク質、エズリン、ラディキシン、モエシンはいずれも検出しません(Gonzalez-Agosti, C., et al. (1996). Oncogene. 13(6):1239-1247)。クローン1C4が標的とするエピトープは、ヒトマーリン(NF2)のスプライシングされたアイソフォーム1~6には存在しますが、7、9、10には存在しないことがUniProt(P35240)で報告されています。ヒトのスプライシングされたアイソフォーム8に対する反応性は可能ですが、確認されていません。

免疫原

ヒトマーリン(NF2)アイソフォームIIのC末端側半分に相当するリコンビナントタンパク質(UniProtスプライシングされたアイソフォーム3、P35240-3)。

アプリケーション

免疫細胞染色:代表的なロットは、蛍光免疫細胞染色により、%パラホルムアルデヒド固定、0.2% Triton X-100透過処理済み野生型マウス肝臓由来上皮細胞(LDC)を免疫染色しましたが、Nf2-ノックアウトマウスのものは免疫染色しませんでした。EGF誘発性EGFR内在化は、Nf2-/- LDCでは認められましたが、Nf2+/+ LDCでは認められませんでした(Curto, M., et al. (2007). J. Cell Biol. 177(5):893-903)。

免疫細胞染色:代表的なロットは、3.5%パラホルムアルデヒド固定U2OSヒト骨肉腫細胞の蛍光免疫細胞染色により、細胞周期依存的にマーリン細胞分布およびHEI10共局在を検出しました。(Grönholm, M., et al. (2006). Oncogene. 25(32):4389-4398)。

免疫細胞染色:代表的なロットは、3.5%パラホルムアルデヒド固定胚性E16ラットニューロンの蛍光免疫細胞染色により、マーリン細胞局在を検出しました。マーリンは、斑点状に、細胞体および突起にRIと共局在して認められました(Grönholm, M., et al. (2003). J. Biol. Chem. 278(42):41167-41172)。

免疫細胞染色:代表的なロットは、4%パラホルムアルデヒド固定、0.1 NP-40透過処理ヒト線維芽細胞および原発性髄膜腫細胞の蛍光免疫細胞染色により、マーリン細胞局在を検出しました。マーリンはリーディングエッジとラフリングエッジでF-アクチンと共局在していましたが、ストレスファイバーでは共局在していませんでした。マーリンとエズリンやモエシンとの共局在は認められませんでした(Gonzalez-Agosti, C., et al. (1996). Oncogene. 13(6):1239-1247)。

免疫沈降:代表的なロットは、N-WASPと、HEK293T細胞ライセート由来のマーリンを共免疫沈降させました(Manchanda, N., et al. (2005). J. Biol. Chem. 280(13):12517-12522)。

ウェスタンブロッティング:代表的なロットは、アデノウイルスを感染させたことで野生型またはL64Pマーリンを発現するNf2-/- MEF由来のEGFR免疫沈降物中の野生型マーリンの存在を検出しましたが、L64Pマーリンは検出しませんでした(Curto, M., et al. (2007). J. Cell Biol. 177(5):893-903)。

ウェスタンブロッティング:代表的なロットは、マウス肝臓由来上皮細胞(LDC)からのEGFR免疫沈降物におけるマーリン濃度の低下を、shRNA媒介性NHE-RF1ノックダウンでは検出しましたが、 NHE-RF2ノックダウンでは検出しませんでした。マーリンとエズリンの結合は、NHE-RF1ノックダウンにより影響を受けませんでした(Curto, M., et al. (2007). J. Cell Biol. 177(5):893-903)。

ウェスタンブロッティング:代表的なロットは、ラット新生仔線維芽細胞(RNF)およびS-16ラットシュワン細胞ライセート中の約72 kDaのマーリンバンド、ならびにマウスNIH/3T3およびヒトMRC-5胎児線維芽細胞ライセート中の約66 kDaのマーリンバンドを、3つのERMタンパク質ファミリーメンバー、エズリン、ラディキシン、モエシンと交差反応することなく検出できました(Gonzalez-Agosti, C., et al. (1996). Oncogene. 13(6):1239-1247)。
抗マーリン(NF2)、クローン1C4、カタログ番号:MABN1786は、マーリン (NF2)を特異的に検出するマウスモノクローナル抗体であり、免疫細胞染色、免疫沈降、ウェスタンブロッティングでテストされています。
研究カテゴリー
ニューロサイエンス

品質

HEK293細胞ライセートのウェスタンブロットで評価されています。

ウェスタンブロッティング:4 µg/mLで使用、10 µgのHEK293細胞ライセート中のマーリン(NF2)を検出できます。

ターゲットの説明

約70 kDa、実測69.78/68.71 kDa(マウス/ラット)、69.69/72.51/69.09/59.10/64.19/64.00/85.35 kDa(ヒトアイソフォーム 1/2/3/4/5/6/8)、算出。ヒトのスプライシングされたアイソフォーム3、4、5、6は、それぞれ、アイソフォームII、delE2/3、delE3、delE2とも呼ばれます。一部のライセートに特性評価されていないバンドが認められる場合があります。

物理的形状

0.1 M Tris-グリシン(pH 7.4)、150 mM NaCl、0.05%アジ化ナトリウムを含むバッファー中の精製マウスIgG1。
フォーマット:精製
プロテインG精製

保管および安定性

2~8°Cで受領日から1年間安定です。

その他情報

濃度:ロット固有のデータシートを参照してください。

免責事項

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

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保管分類コード

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

MABN1786:


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