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Merck

MAB3026

Sigma-Aldrich

Anti-NFκB Antibody, p65 subunit, active subunit, clone 12H11

clone 12H11, Chemicon®, from mouse

別名:

Rel A

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About This Item

UNSPSCコード:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

由来生物

mouse

品質水準

抗体製品の状態

purified immunoglobulin

抗体製品タイプ

primary antibodies

クローン

12H11, monoclonal

化学種の反応性

human, rabbit, rat

化学種の反応性(ホモロジーによる予測)

mouse

包装

antibody small pack of 25 μg

メーカー/製品名

Chemicon®

テクニック

electrophoretic mobility shift assay: suitable
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
western blot: suitable

アイソタイプ

IgG3

NCBIアクセッション番号

UniProtアクセッション番号

輸送温度

ambient

保管温度

2-8°C

ターゲットの翻訳後修飾

unmodified

遺伝子情報

human ... NFKB1(4790)

関連するカテゴリー

詳細

転写因子NF-κB(核内因子κB)は、増殖、発達、アポトーシス、免疫・炎症反応、さまざまなウイルスプロモーター(ヒト免疫不全ウイルスの長い末端反復配列など)の活性化など多数の重要な細胞プロセスや生理的プロセスの発現と制御に関与しています。NF-κBは、構造的に関連のある進化的に保存されたタンパク質のグループのことを表しており、これらのタンパク質は哺乳類で5種類(Rel (cRel)、RelA (p65)、RelB、NFkappaB1(p50とその前駆体p105)、およびNFkappaB2(p52およびその前駆体p100))ある癌原遺伝子c-Relと関連しています。NF-κB/Relタンパク質は、ホモ/ヘテロ二量体の形で存在して、転写能を持つ複合体または抑制複合体を形成します。ほとんどのNF-κB二量体は転写活性因子ですが、p50/50ホモ二量体とp52/52ホモ二量体は標的遺伝子の転写を抑制することができます。NF-κBのp50/p65ヘテロ二量体は、細胞内で最も多く存在しています。

特異性

NF-kBヘテロ二量体のp65サブユニットの核局在化シグナル(.NLS)と重複するエピトープを認識します。そのため、NF-kBの活性型に選択的に結合します(Zabel et al., 1993)。この抗体は、電気泳動移動度スーパーシフトアッセイ(EMSA)にも使用できます。核因子kB (NF-kB)は、配列特異的DNA結合タンパク質です(Sen & Baltimore, 1986)。多面発現性転写因子であり、さまざまな細胞・ウイルス遺伝子の発現に関与しています(Lenardo & Baltimore, 1989)。NF-kBは、分子量に応じてp50およびp65という名前が付けられた2つのサブユニットで構成されています(Kawakami et al., 1988)。これらのサブユニットは、いわゆる阻害鎖IkBにより安定化されています(Baeuerle & Baltimore, 1988)。静止細胞において、不活性型の細胞質のNFkB残基は、サイトカインやプロテインキナーゼ活性化因子で細胞を処理することによりin vivo活性化できます。In vitroでは、sodium deoxycholate、formadine、または電気泳動サイズ分画の処理により活性型のNF-kBを生成することができます。活性型のNFkBはヘテロ四量体タンパク質で、2つのp50サブユニットと2つのp65サブユニットで構成されています(Lenardo et al., 1987)。活性化後、NF-kBは、細胞質から細胞核へと移動し、特定のDNA配列に結合し、転写を開始します。

免疫原

BSA共役ヒトp65に相当するペプチド。
エピトープ:p65サブユニット、活性サブユニット

アプリケーション

NFκB(別名:Rel A)の検出における抗NFκB抗体、p65サブユニット、活性サブユニット、クローン12H11(マウスモノクローナル抗体)の使用は、EMSA、FC、ICC、IF、IHC、IHC(P)、WBにおいて検証されています。
免疫蛍光染色:
1-10 μg/mLで使用、免疫蛍光染色で使用できます。

免疫組織染色(パラフィン切片):
濃度5-10 μg/mL(APAAP)で使用、免疫組織染色で使用できます。

免疫組織染色(凍結切片):
濃度5-10 μg/mL(APAAP)で使用、免疫組織染色で使用できます。

免疫組織染色:
クローン12H11は、新鮮・凍結・アセトン固定ヒト組織で最もうまくいきますが、ヒト由来組織では、従来のホルマリン固定組織において反応性が複数のグループで確認されています。アセトン/ホルマリン固定組織の場合には、最良の可視化のためにABCまたは増強検出システムを使用することが推奨されます。抗体はヒト組織と最も良く反応します。ラット組織も反応しますが親和性が低く、マウスとは反応せず、他の種に関しては調べられていません。電子レンジ加熱クエン酸バッファー/トリプシン消化による抗原回収はいずれも、ホルマリン固定組織において12H11を用いて成功しています。

ウェスタンブロッティング:5-10 μg/mL (ECL)

電気泳動移動度スーパーシフトアッセイ:
濃度0.5-1 μg/mLでスーパーシフトアッセイに使用できます。

フローサイトメトリー:
フローサイトメトリーで使用できます。固定細胞のみ、アセトン固定細胞。

最適な希釈濃度は、ご自身で決定してください。
研究のサブカテゴリ
転写因子
研究カテゴリー
エピジェネティクス・核内機能分子&

品質

PC12ライセートでウェスタンブロッティングによりルーチン評価済み。

ウェスタンブロッティング:
希釈倍率1:500で使用、10 μgのPC12ライセートでNF KAPPA B、P65を検出できます。

ターゲットの説明

65 kDa

物理的形状

フォーマット:精製
精製プロテインA
精製マウスモノクローナルIgG3抗体、0.02 M Phosphate buffer、0.25 M NaCl(pH 7.6)、0.1% sodium azide含有バッファーに溶解。

保管および安定性

2~8ºCで受領日から6か月間安定です。
凍結・融解サイクルの繰り返しを避けるため、分注してください。製品を最大限回収するために、融解後のキャップを外す前に元のバイアルを遠心分離します。

アナリシスノート

コントロール
TNFα処理HeLa細胞、PMA・カルシウムイオノフォア処理Jurkat細胞。

その他情報

濃度:ロットに固有の濃度につきましては試験成績書をご参照ください。

法的情報

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責事項

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

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Theta-burst stimulation of hippocampal slices induces network-level calcium oscillations and activates analogous gene transcription to spatial learning.
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The avian brainstem serves as a useful model to answer the question of how afferent activity influences the viability of target neurons. Approximately 20-30% of neurons in the avian cochlear nucleus, nucleus magnocellularis (NM) die following deafferentation (i.e., deafness produced
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Ovarian cancer is one of the most lethal types of female malignancy. Although most patients are initially responsive to platinum-based chemotherapy, almost all develop recurrent chemoresistant tumors and succumb to their diseases. Elucidating the pathogenesis underlying drug resistance is fundamental
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Brain, behavior, and immunity, 53, 207-222 (2016-01-17)
Most psychiatric and neurological diseases are exacerbated by stress. Because this may partially result from stress-induced inflammation, we examined factors involved in this stress response. After a paradigm of inescapable foot shock stress that causes learned helplessness depression-like behavior, eighteen

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