The contents of the Tris base are added to the phenol:chloroform:isoamyl alcohol mixture, and the contents are well mixed. The amount added is 6.5 mL equilibration buffer per 100 mL phenol, designed so that only one treatment is necessary to raise the pH. Allow the mixture to separate, which may take 2-4 hours. The upper aqueous phase is removed and discarded. The remaining lower organic phase is divided into aliquots and stored at -20 °C. The solution should be stable for up to 12 months. The pH of the phenol should be raised from 6.7 to about 7.9-8. Only one treatment is needed.
P2069
Fenolo:cloroformio:alcol isoamilico 25:24:1 saturato con 10 mM Tris, pH 8,0, 1 mM EDTA
Supplied with Equilibration buffer, Molecular Biology
Sinonimo/i:
DNA extraction
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| A voi/SKU | Disponibilità | Prezzo |
|---|---|---|
100 mL | Per informazioni sulla disponibilità, contatta il Servizio Clienti. | 183,00 € |
400 mL | Per informazioni sulla disponibilità, contatta il Servizio Clienti. | 496,00 € |
Informazioni su questo articolo
NACRES:
NA.52
UNSPSC Code:
12190000
Assay:
≥99.0%
Grade:
Molecular Biology
183,00 €
Per informazioni sulla disponibilità, contatta il Servizio Clienti.
Servizio Tecnico
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Permettici di aiutartigrade
Molecular Biology
Quality Segment
assay
≥99.0%
form
liquid
pH
6.5-6.9(pH of phenolic phase), 7.8-8.2(pH of phenolic phase after the addition of Equilibration Buffer)
application(s)
agriculture
storage temp.
2-8°C
Application
Fenolo:cloroformio:alcol isoamilico è stato usato nella preparazione dell′RNA per lo studio dell′isolamento dell′RNA totale da biopsie di miocardio.[1] È stato usato anche per estrarre il DNA durante il saggio di clonalità del recettore umano degli androgeni (HUMARA).[2]
Per le applicazioni che richiedono un pH superiore, come l′isolamento di DNA genomico intatto di grandi dimensioni, si raccomanda l′aggiunta del tampone di equilibrazione.
Questo lotto di fenolo:cloroformio:alcol isoamilico 25:24:1 è stato analizzato per l′uso estraendo una preparazione grezza della preparazione di pBR322 DNA di E. coli. In base alla valutazione effettuata con l′elettroforesi su gel di agarosio il DNA estratto non risultava degradato o in concentrazione ridotta. La stessa procedura è stata applicata a pBR322 DNA purificato e a DNA lambda digerito con Hind III. In base alla valutazione elettroforetica non è stata rilevata degradazione o riduzione della concentrazione delle preparazioni purificate.
Packaging
Fornito/a con P3803 e un flacone distinto con il tampone di equilibrazione per regolare la fase fenolica a un pH di 8,0 ± 0,2.
Preparation Note
Aggiungere tutto il contenuto del piccolo flacone con il tampone di equilibrazione al flacone di fenolo:cloroformio:alcol isoamilico. Miscelare delicatamente e consentire la separazione delle fasi prima dell′uso, per circa 2-4 ore. In questo modo il pH della soluzione di fenolo sarà corretto da 6,7 ± 0,2 a 8,0 ± 0,2,
Other Notes
Dopo l′aggiunta del tampone di equilibrazione il prodotto è stabile per 6 mesi; senza il tampone aggiunto, per 2 anni. La conservazione a -20 °C al riparo dalla luce allunga la durata a oltre 1 anno dopo l′aggiunta del tampone di equilibrazione.
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Questo articolo | |||
|---|---|---|---|
| assay ≥99.0% | assay ≥99.0% | assay ≥99.0% | assay - |
| Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
| grade Molecular Biology | grade Molecular Biology | grade Molecular Biology | grade Molecular Biology |
| application(s) agriculture | application(s) agriculture | application(s) life science and biopharma | application(s) - |
| form liquid | form liquid | form liquid | form liquid |
| pH 6.5-6.9(pH of phenolic phase), 7.8-8.2(pH of phenolic phase after the addition of Equilibration Buffer) | pH 6.5-6.9(pH of phenolic phase) | pH 4.3-4.7 | pH 4.1-4.5 (25 °C) |
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signalword
Danger
Hazard Classifications
Acute Tox. 3 Oral - Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Aquatic Chronic 2 - Carc. 2 - Eye Dam. 1 - Muta. 2 - Repr. 2 - Skin Corr. 1B - STOT RE 1 Oral - STOT RE 2 - STOT SE 3
target_organs
Central nervous system, Liver,Kidney, Nervous system,Kidney,Liver,Skin
Classe di stoccaggio
6.1A - Combustible acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials
wgk
WGK 3
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Elenchi normativi
Forniamo informazioni su eventuali restrizioni prevalentemente per i prodotti chimici. Per altre tipologie di prodotto siamo in grado di fornire soltanto informazioni limitate. Nessuna segnalazione significa che nessuno dei componenti è citato in un elenco. È dovere dell’utilizzatore assicurarsi che il prodotto venga impiegato in maniera sicura e a norme di legge.
67-66-3
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Hello, I used P2069 for DNA extraction from mouse tails. After adding the equilibration buffer, I wait for 2~4hrs until phase seperation. At this point, I have a question. I heard that lower phase is the phase I utilize, so Can I aliquot the lower phase?
1 risposta-
Utile?
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Hello, I used this material for DNA extraction from mouse tail. After mixing the equilibration buffer, there was two phase. Which phase should I use? Also, Can I aliquot the liquid?
1 risposta-
The lower phase should be used for DNA extraction. It is possible to aliquot the liquid immediately after mixing, before the phases separate.
Utile?
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After equilibrating with the supplied Tris buffer, can I aliquot this for use, if so, should I just top each aliquot with additional Tris pH 8?
1 risposta-
Please see the link below to review the product datasheet. Note that the prepration instructions require the addition of the entire vial (6.5 mL) of equilabration buffer to the contents of the product. Aliquot immediately after the gentle mixing step. During the 2 - 4 hour incubation period the mixure will phase separate. At this point the aliquots may be stored for long term use according to the instructions.
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/144/892/p2069dat.pdfUtile?
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There is an Equilibration Buffer (Product B5658) that is included with Product P2069, Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol 25:24:1. Is B5658 also available separately?
1 risposta-
No, it is only available as part of P2069.
Utile?
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I see that you list two equilibrated Phenol:Chloroform:Isoamyl alcohol products. When should I use Product P3803, and when should I use Product P2069?
1 risposta-
In short, P3803 is for RNA work, and P2069 is for DNA work. Product P2069 consists of one bottle of Product P3803 and one bottle of Product B5658. The B5658 is added to the P3803 to raise the pH of the organic phase from 6.7 to 8.0; pH 8.0 is not suitable for RNA work, because RNA can degrade at the higher pH.
Utile?
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I ordered Product P2069, Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol 25:24:1; I got one bottle of the Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol and one bottle of B5658, Equilibration buffer. When and how am I supposed to use the B5658?
1 risposta-
B5658 is a Tris buffer that is used to raise the pH of the phenol:chloroform:isoamyl alcohol mixture, to make it suitable for isolation of genomic DNA. The contents of the two bottles need to be well mixed. Then allow the mixture to separate; this may take 2-4 hours. This procedure should raise the pH of the phenol phase from 6.7 to about 8.0. Only one "treatment" is needed. This solution should be stable for up to 12 months.
Utile?
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 risposta-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
Utile?
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There are two layers in the bottle of Product P2069, Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol 25:24:1; which layer should I use?
1 risposta-
The lower phase is the phase that is to be used.
Utile?
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