17-285
Kit con plasmide reporter TCF
Set of transfection grade T cell factor (TCF) reporter plasmids for use in TOPFlash and FOPFlash wnt/b-catenin activity assays.
Sinonimo/i:
TOPFlash/FOPFlash, TOPFlash plasmid, FOPFlash plasmid
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Livello qualitativo
Produttore/marchio commerciale
Upstate®
tecniche
transfection: suitable
N° accesso NCBI
applicazioni
genomic analysis
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dry ice
Descrizione generale
FOPflash: plasmide reporter con T cell factor (TCF), per transfezione, contenente due copie complete e una copia incompleta del sito di legame a TCF (mutato) seguito da tre copie di questo a orientamento inverso a monte del promotore minimo della timidina chinasi (TK) e della open reading frame della luciferasi. Questo plasmide funge da controllo negativo per il plasmide TOPflash che contiene i siti di legame a TCF wild-type.
TOPflash: plasmide reporter con T cell factor (TCF), per transfezione, contenente due set (il secondo dei quali a orientamento inverso) di tre copie ciascuno del sito di legame a TCF (wild-type) a monte del promotore minimo della timidina chinasi e dell′open reading frame della luciferasi. FOPflash contenente siti di legame a TCF mutati è disponibile anche come controllo negativo.
TOPflash: plasmide reporter con T cell factor (TCF), per transfezione, contenente due set (il secondo dei quali a orientamento inverso) di tre copie ciascuno del sito di legame a TCF (wild-type) a monte del promotore minimo della timidina chinasi e dell′open reading frame della luciferasi. FOPflash contenente siti di legame a TCF mutati è disponibile anche come controllo negativo.
La famiglia di geni Wnt codifica per una serie di glicoproteine secrete che sono implicate nella regolazione della crescita cellulare, nella determinazione del destino cellulare, nell'organogenesi e nell'oncogenesi. Come dedotto dall'analisi genetica della trasduzione del segnalazione di wingless (wg) in Drosophila, nelle cellule di mammifero Wnts trasmette il segnale attraverso la famiglia di recettori Frizzled, fino a Dishevelled. Dishevelled regola negativamente l'attività della glicogeno sintasi chinasi-3ß (GSK-3ß). Ciò si traduce nella stabilizzazione e nell'accumulo nel citosol di ß-catenina, un substrato di GSK-3ß, che quando fosforilata da GSK-3ß, è indirizzata alla proteolisi mediata dall'ubiquitina. ßLa ß-catenina trasloca quindi nel nucleo, dove forma complessi con proteine appartenenti alla famiglia dei regolatori della trascrizione Tcf/LEF e attiva la trascrizione dei geni responsivi al Tcf. Il plasmide reporter contenente Tcf, usato insieme a FOPFLASH (N° Cat. 21-169), permette di quantificare la trasduzione del segnale Wnt/Wg nelle cellule transfettate con questi costrutti.
Applicazioni
TOPFlash e FOPFlash, set di plasmidi reporter con T cell factor (TCF), per transfezione, per l'uso nei saggi di attività di wnt/b-catenina.
Componenti
FOPflash (con siti di legame a TCF mutato) (N°. Cat.21-169)
TOPflash (plasmide reporter con TCF) (N° Cat. 21-170)
TOPflash (plasmide reporter con TCF) (N° Cat. 21-170)
Qualità
Testato regolarmente mediante analisi della sequenza del DNA per confermare l'identità dei siti di legame per TCF.
Stato fisico
FOPflash, N° Cat. 21-169, N° Lotto 30860, 5,5 kb. 5 μg di DNA purificato per affinità eluito e confezionato asetticamente in 50 μL di Tris-HCl 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM. Soluzione congelata.
TOPflash, N. Cat 21-170, N. lotto 27752, 5,5 kb. 5 μg di DNA purificato per affinità eluito e confezionato asetticamente in 50 μL di Tris-HCl 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM. Soluzione congelata.
TOPflash, N. Cat 21-170, N. lotto 27752, 5,5 kb. 5 μg di DNA purificato per affinità eluito e confezionato asetticamente in 50 μL di Tris-HCl 10 mM, pH 8,0, EDTA 1 mM. Soluzione congelata.
Stoccaggio e stabilità
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Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
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