Production de vaccins à vecteur viral
Fig 1.Étapes d'un procédé de production d'un vaccin à vecteur viral
Un vaccin à vecteur vivant utilise un micro-organisme atténué ou inoffensif (adénovirus par exemple) pour transporter des morceaux d'antigène et stimuler une réponse immunitaire. Les vaccins basés sur un vecteur sont capables d'induire une immunité cellulaire puissante, qui est cruciale pour les maladies comme le SIDA, le paludisme ou le cancer, pour n'en citer que quelques-unes.
Même si le procédé de production des vecteurs pour vaccin est relativement standardisé, certaines difficultés peuvent survenir du fait de l'utilisation de plusieurs virus différents aux propriétés variées. Pour les vecteurs viraux de grande taille, la stérilité du procédé est un point critique, du fait de la perte de rendement liée à la filtration stérilisante. Il peut aussi y avoir des problèmes d'agrégation et de stabilité des vecteurs.
De plus, nombre de procédés de phase I/II font intervenir des cultures de cellules adhérentes ; de ce fait, la transposition d'échelle pour la phase III et la fabrication à l'échelle commerciale peuvent nécessiter des ajustements opérationnels pour atteindre les objectifs de production. Pour les dernières étapes du procédé de fabrication, le rendement et la pureté du produit ont un rôle déterminant, car le produit final doit avoir un titre élevé.
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Accélérer le passage à la phase clinique tout en garantissant une transposition d'échelle fiable
Les procédés de culture upstream mis au point pour la fabrication des vaccins à vecteur viral doivent être optimisés de façon à respecter les objectifs de productivité. Cette optimisation inclut les étapes de lyse cellulaire et de clarification qui sont cruciales pour le retrait des cellules et des débris cellulaires et pour garantir une récolte robuste des vecteurs. Le procédé upstream n'est toutefois concluant que s'il peut être transposé de manière fiable et de façon à répondre aux prévisions de la demande du marché.
Atteindre les objectifs de rendement et d'efficacité avec une élimination robuste des impuretés
Les acides nucléiques provenant des cellules lysées sont un contaminant courant des procédés de production de vaccin à vecteur viral. Les réglementations imposent un niveau de contamination par les acides nucléiques issus des cellules hôtes inférieur à 10 ng/dose de vaccin viral atténué. L'association d'un traitement à l'endonucléase Benzonase® puis d'une filtration à flux tangentiel est un moyen puissant et robuste de dégrader et d'éliminer les fragments d'acides nucléiques résiduels.
Maximiser la quantité de produit récupéré en aval
Les petits lots cliniques sont typiquement purifiés par ultracentrifugation à gradient de densité avec CsCl, tandis que la production à grande échelle requiert un procédé chromatographique en deux ou trois étapes. L'échange d'anions est généralement employé pour retirer les HCP, l'ADN, l'ARN et les autres contaminants majeurs. La chromatographie d'exclusion stérique sert quant à elle à éliminer les contaminants à l'état de traces.
Garantir la sécurité des patients
La filtration stérilisante permet d'assurer la stérilité du produit formulé final et la sécurité des patients. Pour éliminer les contaminants microbiens, il est nécessaire d'utiliser un filtre avec une dimension de pores de 0,22 µm ou moins. Un élément essentiel dont il faut tenir compte pour le procédé de filtration stérilisante est le taux d'agrégats viraux. Ces agrégats doivent être limités en optimisant la formulation ; dans le cas contraire, le procédé de filtration stérilisante sera difficile et risque de provoquer une forte chute de rendement.
Traitement avec des nucléases et clarification
Assurez une transposition d'échelle robuste.
- Traitement avec la nucléase Benzonase® pour la production biopharmaceutique EMPROVE® bio
- Détection de la Benzonase® avec le kit ELISA II Benzonase® permettant de détecter l'endonucléase Benzonase® résiduelle dans le procédé
- Clarification primaire/secondaire avec les filtres en profondeur Millistak+® HC POD
- Clarification primaire avec les filtres en profondeur Clarisolve®
- Solutions de prétraitement et filtres en profondeur pour la clarification
- Clarification avec les filtres en PES Milligard®
Filtration à flux tangentiel downstream
Atteignez vos objectifs de rendement, d'efficacité et de quantité d'ADNp récupéré tout en garantissant une élimination robuste des impuretés.
- Ultrafiltration / Diafiltration avec les cassettes Pellicon® 2
- Ultrafiltration / Diafiltration avec les cassettes Pellicon® 3
- Ultrafiltration / Diafiltration avec la capsule Pellicon® équipée de la membrane Ultracel®
- Système Mobius® TFF 80, solution Mobius® FlexReady pour la TFF, systèmes de laboratoire Cogent® et système de filtration à flux tangentiel à l'échelle industrielle Cogent®
Chromatographie downstream
- Chromatographie sur membrane avec la résine Eshmuno® Q
- Chromatographie sur membrane avec les membranes de chromatographie Natrix® Q Recon Mini
- Chromatographie sur membrane avec les membranes de chromatographie Natrix® Q Pilot
- Chromatographie sur membrane avec Natrix®Q Recon Mini
- Chromatographie sur membrane avec la résine Eshmuno® Q
- Chromatographie de capture et/ou de polissage avec les résines de chromatographie Fractogel® EMD DEAE
- Chromatographie de capture et/ou de polissage avec les résines de chromatographie Fractogel® EMD DMAE
- Solution Mobius® FlexReady pour la chromatographie
Formulation et produits chimiques pour les procédés downstream
Tampons et milieux de culture cellulaire liquides pour le bioprocessing
Nous proposons la meilleure qualité de liquides stérilisés par filtration du marché : nos produits de NEP et de SEP, nos tampons et nos milieux de culture cellulaire prêts à l'emploi proviennent de sites conformes aux BPF répartis dans le monde entier et vous permettent d'optimiser votre production biopharmaceutique.
Filtration stérilisante finale et remplissage final
Garantissez la sécurité des patients avec un procédé de filtration stérilisante fiable et robuste.
- Filtration stérilisante finale et remplissage final
- Stratégies de filtration stérilisante
- Prélèvement stérile avec les solutions d'échantillonnage stérile NovaSeptum® GO
- Remplissage-finition avec les solutions de remplissage-finition à usage unique Mobius®
- Filtres pour remplissage final Millipak®
- Ensembles 2D et 3D Mobius® et systèmes de stockage
Ressources apparentées
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Outil de recherche qui vous aide à surmonter vos problèmes de production.
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Le procédé de fabrication des vecteurs du type adénovirus est simple et assez standardisé ; une description générale en est donnée dans ce manuel.
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