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Merck

COLLD-RO

Roche

Colagenasa D

from Clostridium histolyticum

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About This Item

Comisión internacional de enzimas:
Código UNSPSC:
12352204

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origen biológico

Clostridium histolyticum

Nivel de calidad

esterilidad

non-sterile

Formulario

lyophilized

collagenase activity

>0.15 U/mg lyophilizate

envase

pkg of 100 mg (11088858001)
pkg of 2.5 g (11088882001)
pkg of 500 mg (11088866001)

fabricante / nombre comercial

Roche

concentración

(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)

técnicas

tissue processing: suitable

color

light brown

Descripción general

La colagenasa D se prepara a partir de cultivos de Clostridium histolyticum mediante filtración, precipitación de sulfato de amonio, diálisis y liofilización.

Especificidad

La colagenasa degrada el colágeno nativo. La clostripaína, las enzimas tripsinoides y las proteasas neutras degradan también otras proteínas.

Aplicación

La colagenasa de C. histolyticum se utiliza ampliamente para la desagregación de muchos tipos de tejidos (por ejemplo, pulmón, corazón, músculo, hueso, tejido adiposo, hígado, riñón, cartílago, glándula mamaria, placenta, vasos sanguíneos, cerebro, tumores) y para la preparación de suspensiones de células individuales para el establecimiento de sistemas de cultivo celular primario. Se recomienda la colagenasa D cuando son importantes la funcionalidad y la integridad de las proteínas de superficie celular.
La colagenasa de Clostridium de Roche se ha utilizado para preparar células de muchos tipos de tejido, como hepatocitos, adipocitos, islotes pancreáticos, células epiteliales, células musculares, células endoteliales, etc.[1][2][3][4] Sin embargo, debe determinarse empíricamente la idoneidad de cada lote de la enzima para la ruptura de un tejido concreto.

Características y beneficios

Contenido
Liofilizada, no estéril

Definición de unidad

La colagenasa de Roche se valora en unidades Wünsch (1 μmol de producto formado por minuto a +25 °C con sustrato Wünsch).
A menudo, las actividades colagenasa se dan en unidades Mandl (1 μl de leucina liberada del colágeno en 5 horas a +37 °C).
Por desgracia, no hay un factor de conversión uniforme entre las dos unidades de actividad, ya que la unidad Mandl depende en parte de la concentración de las proteasas contaminantes en la preparación de colagenasa, una variable indefinible. Una preparación de colagenasa más pura daría de hecho una menor actividad específica en unidades Mandl que una preparación bruta. Las preparaciones de Clostridium dan normalmente factores de conversión de aproximadamente 1:1800 (por ejemplo, un lote concreto de colagenasa de Clostridium contenía aproximadamente 0,15 U Wünsch/mg y 250 U Mandl/mg).

Forma física

Liofilizada, no estéril.

Nota de preparación

Activador: Ca2+
Concentración de trabajo: 0,5 – 2,5mg/ml
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25°C
Roche recomienda reconstituir sólo la cantidad de liofilizado necesario para uso inmediato. La disolución reconstituida puede conservarse entre -15 y -25°C durante un máximo de una semana. Evite la congelación y descongelación repetidas ya que la actividad disminuye después de la reconstitución.

Inhibidores:

Inhibidores de la colagenasa: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanol
La colagenasa no es inhibida por el suero.
Inhibidores de la clostripaína: TLCK
Inhibidores de la tripsina: aprotinina, inhibidor de la tripsina (clara de huevo, soja)

Actividad enzimática:
Actividad de la colagenasa: >0,15 U/mg (según Wünsch) (+25°C, 4-fenilazobenciloxicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg como sustrato)
Actividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína y actividad proteolítica total
La colagenasa D tiene una actividad colagenasa de normal a elevada y una baja actividad tríptica (normalmente <0,2 unidades/mg, BAEE como sustrato).

Reconstitución

Reconstitución en cualquier disolución salina equilibrada (por ejemplo, HBSS)

Almacenamiento y estabilidad

Manténgalo alejado de la luz.

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Pictogramas

Exclamation markHealth hazard

Palabra de señalización

Danger

Frases de peligro

Clasificaciones de peligro

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órganos de actuación

Respiratory system

Código de clase de almacenamiento

11 - Combustible Solids

Clase de riesgo para el agua (WGK)

WGK 1

Punto de inflamabilidad (°F)

does not flash

Punto de inflamabilidad (°C)

does not flash


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