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Mezcla KAPA2G Fast Multiplex

suitable for PCR, 2 ×

• Sinónimos: PCR, PCR múltiple, multiplexado
• Código UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Propiedades

• caducidad: ≤12 mo.
• Nivel de calidad: 100
• envase: kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5801); kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5802)
• fabricante / nombre comercial: Roche
• concentración: 2 ×
• técnicas: PCR: suitable
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

Los kits para PCR KAPA2G Fast Multiplex contienen una enzima de segunda generación (2G) obtenida a través de un proceso de evolución dirigida. La ADN polimerasa KAPA2G FAST HotStart^® es una formulación biotecnológica de inicio en caliente mediada por anticuerpo para una mayor procesividad y velocidad que ofrece tasas de extensión significativamente más rápidas que la ADN polimerasa Taq natural. Además de la velocidad, la KAPA2G Fast proporciona un rendimiento y una sensibilidad superiores a las de las enzimas de la competencia, lo que permite PCR múltiples más uniformes.
Los kits para PCR KAPA2G Fast HotStar están diseñados para una PCR rápida, en la que los tiempos de reacción totales son un 20-70 % más cortos que los de las PCR convencionales realizadas con la ADN polimerasa Taq natural. Esto puede conseguirse sin sacrificar el rendimiento de la reacción y no requiere fungibles ni termocicladores para PCR especializados.

Aplicación

La mezcla KAPA2G Fast Multiplex se ha utilizado para:

• Tipado de los microorganismos transgénicos[1]
• Amplificación de los microsatélites
• Tipado y detección de patógenos[2]
• Amplificación de fragmentos múltiples de ADN para genotipado de polimorfismos de un solo nucleótido (SNP)
• En la PCR semicuantitativa[3][4]
• En la PCR 3-plex[5]

Acciones bioquímicas o fisiológicas

Los fragmentos de ADN generados con la ADN polimerasa KAPA2G Fast tienen las mismas características que los fragmentos de ADN producidos con la ADN polimerasa Taq de tipo natural y pueden utilizarse para secuenciación, digestión con enzimas de restricción y clonación. Igual que la Taq natural, la KAPA2G Fast tiene actividades 5′→3 polimerasa′ y 5′→3′ exonucleasa, pero no actividad 3′→5′ exonucleasa (corrección de errores). La fidelidad de la KAPA2G Fast es similar a la de la Taq natural; tiene una tasa de error de aproximadamente 1 error por cada 1,7 x 10⁵ nucleótidos incorporados. Los productos de la PCR generados con la KAPA2G Fast tienen una cola de 3′-dA y pueden clonarse en vectores de clonación TA.

Características y beneficios

Mayor sensibilidad, especificidad y rendimiento

• Representación uniforme de todos los amplicones
• PCR múltiple satisfactoria con muestras ricas en GC, difíciles

Aumenta la velocidad sin afectar al rendimiento

• Reducción de un 60% del tiempo de ciclado
• Tiempos de extensión de tan sólo 15 segundos

Notas rápidas:

• La mezcla KAPA2G Fast Multiplex contiene la ADN polimerasa rápida de inicio en caliente KAPA2G diseñada mediante ingeniería genética para una PCR múltiple rápida y eficiente.
• La mezcla KAPA2G Fast Multiplex contiene un tampón optimizado para PCR múltiple con 0,2 mM de cada dNTP y MgCl₂ 3mM (a 1X).
• Utilice 0,2 μM de cada cebador y 10-100 ng de la plantilla de ADN por reacción.
• Hibride a 60°C durante 30 segundos.
• Realice extensión durante 15 segundos y aumente para amplicones más largos o reacciones múltiples.

Calidad

Se confirma que cada lote de ADN polimerasa KAPA2G Fast HotStart contiene <2 % de proteínas contaminantes (valoración Agilent Protein 230). Los kits para PCR KAPA2G Fast Multiplex están sometidos a estrictas pruebas de control de calidad, carecen de actividad exonucleasa y endonucleasa contaminante y cumplen estrictos requisitos con respecto a los niveles de contaminación de ADN.

Nota de preparación

Asegúrese siempre de que el producto se ha descongelado por completo y se ha mezclado bien antes de su uso. Los reactivos pueden conservarse a 4°C durante poco tiempo (hasta 1 mes). Para un almacenamiento prolongado, retornar a -20°C. Siempre que la ReadyMix se haya manipulado con cuidado y no se haya contaminado, no cabe esperar que el kit se altere si se deja (accidentalmente) a temperatura ambiente un breve espacio de tiempo (hasta 3 días). No se recomienda su conservación a largo plazo a temperatura ambiente y 4°C. Tenga en cuenta que los reactivos conservados por encima de -20°C son más propensos a la degradación cuando se contaminan durante su uso y, por consiguiente, la conservación a esas temperaturas es por cuenta y riesgo del propio usuario.

Otras notas

*Para uso exclusivo en investigación. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información legal

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

Solo componentes del kit

• KAPA2G Fast HotStart^® DNA Polymerase
• Reaction buffer
• dNTPs
• MgCl₂ 3 mM

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS07,GHS08
• Palabra de señalización: Warning
• Frases de peligro: H302,H371
• Consejos de prudencia: P260 - P264 - P270 - P301 + P312 + P330 - P308 + P311 - P501
• Clasificaciones de peligro: Acute Tox. 4 Oral - STOT SE 2
• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash