04716728001
Roche
ADNasa I recombinante, sin ARNasa
from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
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Productos recomendados
origen biológico
bovine pancreas
Nivel de calidad
recombinante
expressed in Pichia pastoris
Formulario
solution
mol peso
~39 kDa
envase
pkg of 10,000 U
fabricante / nombre comercial
Roche
pH óptimo
7.0-8.0
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Descripción general
La ADNasa I recombinante es una endonucleasa específica del ADN. La enzima cataliza la degradación aleatoria de ADN bicatenario y monocatenario hidrolizando los enlaces fosfodiéster del ADN, lo que produce una mezcla de oligonucleótidos y mononucleótidos. Todo el material utilizado durante el proceso de producción de la ADNasa I recombinante es de origen no animal, por lo que es un producto no procedente de animales.
Contenido
Contenido
- ADNasa I recombinante, sin ARNasa, 10 U/μl
- Tampón de incubación, concentrado x10
Especificidad
Inactivación por calor: Una unidad de ADNasa I recombinante, sin ARNasa, se inactiva por calor durante 10 minutos de incubación a 75 °C.
Nota importante: La ADNasa I recombinante, sin ARNasa, también puede inactivarse y eliminarse mediante extracción con fenol de acuerdo con los protocolos normalizados, por ejemplo , los protocolos vigentes en biología molecular.
Nota importante: La ADNasa I recombinante, sin ARNasa, también puede inactivarse y eliminarse mediante extracción con fenol de acuerdo con los protocolos normalizados, por ejemplo , los protocolos vigentes en biología molecular.
Aplicación
La ADNasa I recombinante sin ARNasa puede utilizarse para degradar el ADN en aplicaciones sensibles a la presencia de ARNasa.[1][2][3] Por ejemplo, la ADNasa I suele utilizarse para:
- Retirar el ADN genómico de las preparaciones de ARN antes de una RT-PCR
- Aislar el ARN sin ADN después de las reacciones de transcripción in vitro
- Realizar desplazamiento de muescas
- Cartografiar regiones sensibles a la ADNasa en el ADN eucariótico
Características y beneficios
- Elimina la contaminación del ADN procedente de cualquier muestra de ARN
- No contiene actividad ARNasa ni proteasa detectable
- Puede ser termoinactivada, eliminando así la necesidad de extracción orgánica
- Se entrega con un tampón de incubación optimizado, que admite la máxima actividad ADNasa
- Se produce mediante un proceso totalmente libre de animales para eliminar cualquier riesgo asociado con los materiales de origen animal
Envase
1 kit que contiene 2 componentes
Calidad
Ausencia de contaminantes: Cada lote se analiza para garantizar la ausencia de ARNasas y proteasas de acuerdo con los procedimientos de control de calidad vigentes.
Especificaciones
Forma glucosilada
La ADNasa I recombinante está heterogéneamente N-glucosilada, por lo que aparece como dos bandas en la electroforesis en gel.
Requisito de iones divalentes
La ADNasa I requiere cationes divalentes para su máxima actividad. Iones como el magnesio activan la endonucleasa específica del ADN y los iones calcio la estimulan. Por consiguiente, la enzima es inhibida por quelantes metálicos como el EDTA.
La ADNasa I recombinante está heterogéneamente N-glucosilada, por lo que aparece como dos bandas en la electroforesis en gel.
Requisito de iones divalentes
La ADNasa I requiere cationes divalentes para su máxima actividad. Iones como el magnesio activan la endonucleasa específica del ADN y los iones calcio la estimulan. Por consiguiente, la enzima es inhibida por quelantes metálicos como el EDTA.
Definición de unidad
Una unidad es la actividad enzimática que afecta a un aumento de la absorbancia de 0,001/minuto en condiciones de ensayo en 1 ml a 260 nm.
Condiciones de ensayo:
La actividad volumétrica se determina de acuerdo con la siguiente mezcla del ensayo. Se incuban 100 μg de ADN de timo de ternero en 2,5 ml 1x de tampón de incubación con 40 a 70 unidades de ADNasa I recombinante, sin ARNasa a +25 °C. El aumento de la absorbancia se mide a 260 nm.
Condiciones de ensayo:
La actividad volumétrica se determina de acuerdo con la siguiente mezcla del ensayo. Se incuban 100 μg de ADN de timo de ternero en 2,5 ml 1x de tampón de incubación con 40 a 70 unidades de ADNasa I recombinante, sin ARNasa a +25 °C. El aumento de la absorbancia se mide a 260 nm.
Nota de preparación
Activador: Iones metálicos bivalentes
Disolución de trabajo: Tampón de almacenamiento: Tris-HCl 20 mM, NaCl 50 mM, CaCl2 2 mM, MgCl2 2 mM, ditioeritritol 1 mM, 0,1 mg/ml de Pefabloc SC, glicerol al 50 % (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Tampón de incubación (x10): Tris-HCl 400 mM , NaCl 100 mM, MgCl2 60 mM, CaCl2 10 mM, pH 7.9.
Tampón de dilución enzimática: Tris-HCl 25 mM, glicerol al 50 % (v/v), pH 7.6 (a 4 °C).
Disolución de trabajo: Tampón de almacenamiento: Tris-HCl 20 mM, NaCl 50 mM, CaCl2 2 mM, MgCl2 2 mM, ditioeritritol 1 mM, 0,1 mg/ml de Pefabloc SC, glicerol al 50 % (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Tampón de incubación (x10): Tris-HCl 400 mM , NaCl 100 mM, MgCl2 60 mM, CaCl2 10 mM, pH 7.9.
Tampón de dilución enzimática: Tris-HCl 25 mM, glicerol al 50 % (v/v), pH 7.6 (a 4 °C).
Almacenamiento y estabilidad
Almacene la disolución enzimática sin diluir a una temperatura de -15 a -25°C; el tampón de almacenamiento a 4 °C.
Otras notas
Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos de diagnóstico.
Código de clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
Clase de riesgo para el agua (WGK)
WGK 1
Punto de inflamabilidad (°F)
does not flash
Punto de inflamabilidad (°C)
does not flash
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