o-Phenylendiamindihydrochlorid (OPD) ist ein chromogenes Substrat, das in Enzyme-linked-Immunosorbent-Assay(ELISA)-Verfahren eingesetzt werden kann, da es Meerrettichperoxidasekonjugate nutzt. Das Substrat produziert ein lösliches Endprodukt mit orange-brauner Farbe, das bei 450 nm spektrofotometrisch gemessen werden kann. Die OPD-Reaktion kann mit 3 N HCl oder 3 mol/l H2SO4 gestoppt und bei 492 nm gemessen werden.
Anwendung
o-Phenylendiamindihydrochlorid wird als Substrat für Meerrettichperoxidase-konjugierte Sekundärantikörper im ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) eingesetzt.
Rekonstituierung
Eine Tablette in 0,05 M Phosphat-Citrat-Puffer, pH-Wert 5,0, auflösen, um die gewünschte Konzentration zu erhalten (in der Regel wird eine OPD-Konzentration von 0,4 mg/mL verwendet). Unmittelbar vor der Verwendung 40 μL frisches 30%iges Wasserstoffperoxid je 100 mL Substratpufferlösung hinzugeben. Die Tabletten sind einzeln in Folienpackungen verpackt.
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