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P8038
Proteinase, bakteriell
Type XXIV, 7.0-14.0 units/mg solid, lyophilized powder
Synonym(e):
Proteinase aus Bacillus licheniformis, Alkalische Protease, Protease aus Bacillus licheniformis, Subtilopeptidase A
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Empfohlene Produkte
Typ
Type XXIV
Qualitätsniveau
Form
lyophilized powder
Spezifische Aktivität
≤0.05 Kunitz units/mg solid RNase
≤5.0 Kunitz units/mg solid DNase
7.0-14.0 units/mg solid
Mol-Gew.
27 kDa
Aufgereinigt durch
crystallization
Versandbedingung
wet ice
Lagertemp.
−20°C
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Spezifität
Subtilisin A gehört zur Familie der Serin S8-Endoproteinasen. Es weist eine breite Spezifität mit Präferenz für ein großen ungeladenen Rest an Position P1 auf. Es hydrolysiert native und denaturierte Proteine und ist unter alkalischen Bedingungen aktiv.
Anwendung
Das Enzym von Sigma wurde zur Optimierung der Freisetzung aller mitochondrialen Populationen aus homogenisiertem Ventrikelgewebe von Rattenherzen eingesetzt. [1] Es wurde außerdem bei der Vorhybridisierungsbehandlung formalinfixierter Paraffinschnitte von Leberproben zum Nachweis humaner und viraler DNA verwendet.[2]
Dieses Produkt ist ein proteolytisches Enzym, das aus der Fermentation von Bacillus licheniformis isoliert wird. Es ist eine Serin-Endoproteinase mit einer breiten Spezifität für native und denaturierte Proteine, die unter alkalischen Bedingungen aktiv ist. Produkt P8038, auch als Subtilisin Carlsberg bekannt, wurde zur Hydrolyse von Herzzellen für die Untersuchung der Stilllegung von kardialen mitochondrialen NHE1[3] eingesetzt.
Biochem./physiol. Wirkung
Proteinase katabolisiert Proteine durch Hydrolyse von Peptidbindungen. Proteasen werden durch Serin-Aktivstelleninhibitoren wie Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) und Diisopropylfluorphosphat inaktiviert.
Physikalische Eigenschaften
Subtilisin ist eine nicht-glycosylierte Einzelpolypeptidkette ohne Disulfidbindungen und besitzt ein Molekulargewicht von 27 KDa.
Einheitendefinition
Eine Einheit hydrolysiert die Caseinmenge, die eine Färbung entsprechend 1,0 μmol (181 μg) Tyrosin pro min bei pH 7,5 und 37 °C produziert (Farbe vom Folin-Ciocalteu Reagenz).
Hinweis zur Analyse
Aminosäureanalyse und isoelektrische Fokussierungselektrophorese entsprechend Subtilisin Carlsberg.
Signalwort
Danger
Gefahreneinstufungen
Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 2
Persönliche Schutzausrüstung
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
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What is the pH optimum for Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 Antwort-
Two references cite pH 7.5 as optimal for this enzyme: (a) Ricks et al., Biotechnol. Prog., 8, 197-203 (1992), (b) Doswald et al., Bioorg. Med. Chem., 2, 403-410 (1994).
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What is the pI of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 Antwort-
One reference gives a pI of 9.4 for subtilisin Carlsberg. See: Zacharis, E. et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 96, 1201-1205 (1999).
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How long can I store stock solutions of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 Antwort-
Our notes indicate that a 0.1% solution (1 mg/mL) in PBS or TBS can be stored for about a week at 0-4°C. For longer term storage, we would advise freezing the stock solution in aliquots.
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What is the molecular weight (MW) of Product P8038, Proteinase, bacterial?
1 Antwort-
The enzyme has a MW of 27.5-27.6 kDa. See DeLange & Smith, J. Biol. Chem., 243(9), 2134-2142 (1968).
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