P2317

10X PCR-Puffer ohne MgCl₂

Optimized for routine PCR without MgCl₂

• Synonym(e): Magnesiumfreier PCR-Puffer
• UNSPSC-Code: 41106306
• NACRES: NA.52

Eigenschaften

• Form: liquid
• Methode(n): PCR: suitable
• Farbe: colorless
• Anwendung(en): agriculture
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

10X PCR Buffer II wurde in einer endgültigen Konzentration von 1X (10 mM Tris-HCl, pH 8,3 bei 25 °C, 50 mM KCl) in Reaktionen getestet, die 1–4 mM MgCl_{2se p} enthalten, je 200 μM pro dNTP; die Primer definieren einen ungefähren Bereich von 500 Basenpaaren je λ-DNA bei jeweils 1,0μM, λ-DNA-Template bei 1ng/100μL und Taq-DNA-Polymerase bei 2,5 Einheiten/100μL. Die Reaktion durchlief 25 Zyklen bei 94 °C zur Denaturierung der doppelsträngigen DNA, bei 55 °C zum Annealing der DNA-Segmente und bei 72 °C zur Extension der DNA-Segmente. Nach der Elektrophorese der Reaktionsprodukte in 1,5%igem Agarosegel wurde bei PCRs mit 1–1,5 mM MgCl₂ ein einzelnes Band von ungefähr 500 Basenpaaren sichtbar gemacht.

Anwendung

10X PCR-Puffer ohne MgCl₂ wird als Komponente für die Amplifikation mittels Polymerase-Kettenreaktion (PCR) von DNA von mykotoxinbildenden Schimmelpilzen,[1] Parasiten[2] und Fusarium oxysporum eingesetzt.[3]Er wird auch als Komponente der PCR-Mischung für die Amplifikation von nukleärem ribosomalem internal transcribed spacer (ITS2) und der partiellen großen Untereinheit des Ribulose-1,5-bisphosphat-carboxylase/-oxygenase-Gens (RuBisCO) für die molekulare und morphologische Charakterisierung von Ulva sp aus dem Persischen Golf verwendet.[4]

10× PCR-Puffer ohne MgCl₂ wird mit PCR-Enzymen von Sigma eingesetzt.[5][6]

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Das Produkt wird auf die Abwesenheit von DNase und RNase getestet.
• Geeignet für die Verwendung mit Magnesiumchlorid.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable