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Merck

L2769

Sigma-Aldrich

Lektin aus Phaseolus vulgaris (rote Kidneybohne)

Leucoagglutinin PHA-L, lyophilized powder

Synonym(e):

Phaseolus vulgaris Agglutinin, PHA

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About This Item

UNSPSC-Code:
12352202
NACRES:
NA.32

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Biologische Quelle

Phaseolus vulgaris

Form

lyophilized powder

Wirksamkeit

erythroagglutination activity (Does not agglutinate a 2% suspension of human erythrocytes at <62.5 μg lectin/ml.)
≤1.0 μg/mL leucoagglutination activity
≤5 μg/mL mitogenic activity

Zusammensetzung

Protein, ≥60% biuret

Verunreinigungen

salt, free

Lagertemp.

2-8°C

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Allgemeine Beschreibung

Phytohämagglutinin (PHA) aus Phaseolus vulgaris ist ein tetrameres Glykoprotein. Es enthält zwei verschiedene Untereinheiten, die 120 kDa wiegen.[1]

Anwendung

Lectin aus Phaseolus vulgaris (rote Kidneybohne) wird wie folgt verwendet:
  • als Positivkontrolle in ELISpot-Assay[2]
  • (Enzyme Linked Immunospot), um die Th2-Polarisierung für die T-Zelldifferenzierung in vitro einzuleiten[3]
  • als Kontrolle in Lymphozytenproliferations-Assays[4]

Biochem./physiol. Wirkung

PHA besteht aus zwei Molekularspezies, einem Erythroagglutinin (PHA-E) mit niedriger mitogener und hoher erythroagglutinierender Aktivität sowie einem Leucoagglutinin (PHA-L) mit hoher mitogener und hoher leucoagglutinierender Aktivität, aber sehr niedriger erythroagglutinierender Aktivität.
PHA-E ist nicht blutgruppenspezifisch, die Agglutination kann aber durch bestimmte Oligosaccharide gehemmt werden. PHA-P ist die Proteinform von PHA vor Trennung und Aufreinigung von Erythroagglutinin und Leucoagglutinin. PHA-M ist die Mucoproteinform. Konjugate werden aus den entsprechenden aufgereinigten Lektinen zubereitet.

Angaben zur Herstellung

Durch eine Modifikation des Verfahrens nach Leavitt aufgereinigt.[5]

Hinweis zur Analyse

Agglutinationsaktivität wird in μg/ml angegeben und wird durch Serienverdünnungen einer 1-mg/ml-Lösung bestimmt. Diese Aktivität ist die niedrigste Konzentration bei der eine Suspension von entweder menschlichen Erythrozyten (2 % in phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH-Wert 6,8) oder menschlichen Leukozyten (107 je ml in Kochsalzlösung) nach 1 Std. Inkubation bei 25 °C agglutiniert.

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 3

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

Persönliche Schutzausrüstung

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Adeno-Associated Virus (AAV)-based gene therapy vectors are in development for many inherited human disorders. In nonclinical studies, cellular immune responses mediated by cytotoxic T cells may target vector-transduced cells, which could impact safety and efficacy. Here, we describe the bioanalytical
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Clinical and Vaccine Immunology : CVI, 17(7), 1094-1103 (2010)
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Zhang F, et al.
Faseb Journal, 31(2), 519-525 (2016)
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Sirima SB, et al.
Vaccine, 25(14), 2723-2732 (2007)
Kirsten E Lyke et al.
Vaccine, 27(15), 2171-2176 (2009-04-10)
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Artikel

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Fragen

  1. What do the designations -P, -L, -M, and -E represent in the names of PHA products?

    1 Antwort
    1. Generally, PHA-P or PHA-L is utilized to stimulate lymphocytes, although PHA-M will also work, but not to the same degree. The most active form is PHA-L (the mitogenic concentration is < 5μg/ml). PHA, or Phytohemagglutinin, comprises two molecular species:

      1. Erythroagglutinin (PHA-E), which demonstrates low mitogenic activity and high erythroagglutinating activity.

      2. Leucoagglutinin (PHA-L), which possesses high mitogenic and leucoagglutinating activity, accompanied by very low erythroagglutinating activity.

      PHA-P represents the protein form of PHA before the erythroagglutinin and leucoagglutinin components are separated and purified. PHA-M refers to the mucoprotein form of Phytohemagglutinin.

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