L2524

Lyticase aus Arthrobacter luteus

lyophilized powder, ≥2,000 units/mg protein, Protein ≥20 % by biuret

• Synonym(e): Bakterielle Lyticase, Lysierendes Enzym
• CAS-Nummer: 37340-57-1
• MDL-Nummer: MFCD00131560
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bacterial (Arthrobacter luteus)
• Qualitätsniveau: 300
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: ≥2,000 units/mg protein
• Zusammensetzung: Protein, ≥20% biuret
• Methode(n): cell based assay: suitable
• Eignung: suitable for cell lysis
• Anwendung(en): diagnostic assay manufacturing
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Anwendung

Lyticase aus Arthrobacter luteus wird zum Lysen der Pilzzellwand für die DNA-Isolierung eingesetzt.[1][2][3]

Lyticase von Arthrobacter luteus wird wie folgt verwendet:

• zur Herstellung von Sphäroplasten
• als Komponente der Aufschlusslösung, zur Inkubation von Hefezellen zum Aufschluss der Zellwand
• im Rahmen der enzymatischen Hydrolyse des Myzel-Präzipitats zur Herstellung von Protoplasten

Biochem./physiol. Wirkung

Das Enzym Lyticase wird häufig in der Pilzforschung eingesetzt, insbesondere zur Spezies-Identifizierung mittels PCR-basierter (Polymerase-Kettenreaktion) Verfahren. Es kann β-(1→3)- und β-(1→4)-Bindungen zwischen Glucoseeinheiten aufbrechen. Lysozym dient als Indikator für eine Makrophagen-vermittelte Wirtsreaktion, ist mit dem Leukozytentod korreliert und weist eine hohe Fluktuationsrate auf. Erhöhte Serumkonzentrationen von Lysozym werden bei verschiedenen chronischen Entzündungen, entzündlichen Darmerkrankungen, hämatologischen Erkrankungen und Nierenerkrankungen beobachtet. Das C-Typ-Lysozym aus Hühnereiweiß wird häufig als Modell zur Untersuchung der Proteinstruktur und -funktion verwendet. Muramidase zeigt in erster Linie eine bakterizide Wirkung gegen grampositive Bakterien. Die in der Mitteilung beschriebene Methode zur Bestimmung molekularer Massen mittels Gelfiltrationschromatographie ist eine modifizierte Version der bereits veröffentlichten Verfahren. Die in diesem Kit enthaltenen Proteinstandards sind möglicherweise mit anderen chromatographischen Systemen wie der Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (HPLC) kompatibel. Bestimmte Puffersysteme können sich jedoch auf die Elutionsvolumina von Albumin und Carboanhydrase auswirken. Die Proteine in diesem Kit haben einen molekularen Massenbereich von 29 kDa bis 699 kDa.

Hefezellen sind schwer zu zerstören, da ihre Zellwand Kapseln oder resistente Sporen bilden kann. DNA kann durch Lyseenzyme wie Lyticase aus Hefe extrahiert werden, um die partielle Sphäroplastenbildung einzuleiten.[4] Sphäroplasten werden anschließend lysiert, um DNA freizusetzen. Lyticase wird für den Aufschluss der Zellwand von Hefe und zum Erzeugen von Sphäroplasten aus Pilzen für die Transformation bevorzugt. Sie enthält β-(1→3)-Glucanlaminaripentaohydrolase und β-(1→3)-Glucanase-, Protease- und Mannanaseaktivitäten.[5] Lyticase wird für Hefezellen wie Candida, Debaryomyces, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Eremothecium und Schwanniomyces-Spezies eingesetzt.[6]

Lyticase hydrolysiert Poly-β(1→3)-Glucose wie das Zellwand-Glucan der Hefe.

Einheitendefinition

Eine Einheit produziert ein ΔA₈₀₀ von 0,001 pro min bei pH 7,5 und 25 °C mit einer Hefesuspension als Substrat in 3 ml Reaktionsgemisch.

Physikalische Form

Teilweise gereinigtes lyophilisiertes Pulver; enthält Kaliumphosphat-Puffersalze und Stabilisatoren.

Sonstige Hinweise

Für mehr Information siehe enzymes for complex carbohydrate analysis at www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

Nur für Forschungszwecke. Nicht für den Arzneimittel-, Haushalts- oder sonstigen Gebrauch vorgesehen. Informationen zu den Gefahren und zur sicheren Handhabung sind dem Sicherheitsdatenblatt zu entnehmen.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H334
• P-Sätze: P261 - P284 - P501
• Gefahreneinstufungen: Resp. Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)