C2905

Chondroitinase ABC aus Proteus vulgaris

lyophilized powder, 0.3-3 units/mg solid

• Synonym(e): Chondroitin-ABC-Lyase
• CAS-Nummer: 9024-13-9
• EC-Nummer: 4.2.2.4 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-777-9
• MDL-Nummer: MFCD00130795
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bacterial (Proteus vulgaris)
• Qualitätsniveau: 300
• Konjugat: (Glucosaminoglycan)
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: 0.3-3 units/mg solid
• Mol-Gew.: ~120 kDa by gel filtration
• Zusammensetzung: Protein, ~35% biuret
• Anwendung(en): diagnostic assay manufacturing
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Anwendung

Chondroitinase ABC von Sigma wird zum Aufschluss von O-gebundenen Chondroitinsulfat-ähnlichem Glykosaminoglykan (CSGAG) eingesetzt.[1] Das Enzym wird auch zum Aufschluss von Glykosaminoglykanketten in Proteoglykanen während der Bildung und Expression eines rekombinanten Versican-Gens in Säugetiersystemen eingesetzt.[2] Darüber hinaus wird es zum Aufschluss von Chondroitinsulfat in den Proteoglykankomplexen eingesetzt.[3] Das Enzym wird auch zum Entfernen von Glykanketten aus Aggrecan verwendet, wodurch die axonwachstumshemmende Wirkung von Aggrecan entfernt wird.[4]

Biochem./physiol. Wirkung

Chondroitinase ABC katalysiert den eliminativen Abbau von Polysacchariden, die (1-4)-β-D-Hexosaminyl- und (1-3)-β-D-Glucuronosyl- (oder (1-3)-α-L-Iduronosyl)-Bindungen an Disaccharide enthalten, die 4-Desoxy-β-D-gluc-4-enuronosyl-Gruppen enthalten. Es wirkt auf Chondroitin-4-sulfat, Chondroitin-6-sulfat und Dermatansulfat. Es wirkt langsam auf Hyaluronat. Die Molekülmasse beträgt etwa 120 kDa, wobei zwei nicht identische Untereinheiten Molekülmassen von 86 kDa bzw. 32 kDa aufweisen. Der optimale pH-Wert beträgt 8,0 für Chondroitinsulfat und 6,8 für Hyaluronsäure. Die optimale Temperatur beträgt 37 °C. 1 mM Zn²⁺ dient als Inhibitor, während 0,05 M Acetat ein Aktivator des Enzyms sind.

Verpackung

Packungsgrösse bezogen auf die Chondroitinase C-Aktivität

Einheitendefinition

Eine Einheit setzt bei einem pH-Wert von 8,0 und 37 °C je Minute 1,0 μmol einer Mischung aus 2-Acetamid-2-desoxy-3-O-(β-D-gluc-4-en-pyranosyluronsäure)-4-O-sulfo-D-galactose und 1,0 μmol 2-Acetamid-2-desoxy-3-O-(β-D-gluc-4-en-pyranosyluronsäure)-6-O-sulfo-D-galactose aus Chondroitinsulfat aus Haifischknorpel frei.

Physikalische Form

Lyophilisiertes Pulver, enthält Tris-Puffersalze

Angaben zur Herstellung

In einer 0,01 % wässrigen Rinderserumalbuminlösung (BSA-Lösung) rekonstituieren. Nachfolgende Verdünnungen können zu einem Puffer mit 50 mM Tris, pH-Wert 8,0, mit 60 mM Natriumacetat und 0,02 % BSA gemacht werden. Die Lösungen sollten frisch zubereitet werden.

Sonstige Hinweise

Für weitere Informationen siehe enzymes for complex carbohydrate analysis at www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)