A1153

Aprotinin

3-8 TIU/mg solid, lyophilized powder

• Synonym(e): BPTI, Boviner pankreatischer Trypsin-Inhibitor, Trasylol, Trypsin-Inhibitor (basisch, pankreatisch)
• Empirische Formel (Hill-System): C₂₈₄H₄₃₂N₈₄O₇₉S₇
• CAS-Nummer: 9087-70-1
• Molekulargewicht: 6511.44
• EG-Nummer: 232-994-9
• MDL-Nummer: MFCD00130541
• UNSPSC-Code: 12352202
• NACRES: NA.77

Eigenschaften

• product name: Aprotinin aus Rinderlunge, lyophilized powder, 3-8 TIU/mg solid
• Biologische Quelle: bovine lung
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: 3-8 TIU/mg solid
• Mol-Gew.: ~6,500
• Löslichkeit: H₂O: ≥5 mg/mL
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P00974
• Lagertemp.: 2-8°C
• InChIKey: ZPNFWUPYTFPOJU-UHFFFAOYSA-N
• Angaben zum Gen: cow ... PTI(404172)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Aprotinin aus Rinderlunge ist ein globuläres Polypeptid-Monomer mit einem Molekulargewicht von 6,5 kDa. Aprotinin wird häufig als unspezifischer Serinprotease-Inhibitor eingesetzt und besteht aus einem antiparallelen β-Faltblatt, einer N-terminalen 310-Helix und einer C-terminalen und α-Helix. Aprotininreste der Aminosäuren 13–18 sind für die Bindung an Serinproteasen von besonderer Bedeutung.

Anwendung

Aprotinin aus Rinderlunge wird verwendet:

• als Proteasehemmer in Radioimmunpräzipitationspuffer (RIPA) zur Homogenisierung von kardialen mikrovaskulären Endothelialzellen (CMECs)(4) und humanen Brustepithelzellen
• in Angiogenese-Assays von Fibroblasten
• bei der proteomischen Stabilisierung von Speichelüberstand

Aprotinin wird im Wesentlichen als Trypsin-Inhibitor eingesetzt.

Biochem./physiol. Wirkung

Aprotinin hemmt Proteasen wie z. B. Trypsin, Plasmin, Chymotrypsin und Thrombin. Es blockiert die Bradykinin-Synthese aus Kininogen. Es wird zur Behandlung von Blutverlust bei chirurgischen Eingriffen eingesetzt.

Aprotinin ist ein kompetitiver Inhibitor der Serinprotease, der stabile Komplexe mit Enzymen bildet und aktive Enzymstellen blockiert. Diese Bindungen sind reversibel und die meisten Aprotinin-Protease-Komplexe lösen sich bei extremen pH-Werten von >10 oder <3 auf. Strukturell ist Aprotinin ein monomeres globuläres Protein; ein Derivat aus der Rinderlunge, das aus 58 Aminosäuren besteht, die in einer einzelnen Polypeptidkette mit drei vernetzenden Disulfidbrücken angeordnet sind.

Einheitendefinition

Eine Trypsin-Inhibitor-Einheit (TIU) senkt die Aktivität von zwei Trypsin-Einheiten um 50 %, wobei eine Trypsin-Einheit bei pH 7,8 und 25 °C 1,0 μmol N-α-Benzoyl-DL-arginin-p-nitroanilid pro Minute hydrolisiert. Eine weitere häufig verwendete Einheit ist KIU, wobei 1 TIU = 1.300 KIU.

Angaben zur Herstellung

Dieses Produkt ist ein lyophilisiertes Pulver mit einer Aktivität von 3-8 TIU/mg des festen Pulvers. Aprotinin ist frei löslich in Wasser (>10 mg/ml) und wässrigen Puffern mit geringer Ionenstärke. Verdünnte Lösungen sind im Allgemeinen nicht so stabil wie konzentrierte Lösungen, die Stabilität der Lösung hängt jedoch auch vom pH-Wert ab. Aprotinin ist relativ stabil gegen Denaturierung – nur Thermolysin hat sich als fähig erwiesen, es bei 60-80 °C abzubauen. Aprotinin kann durch Filtration mit einem 0,2-μm-Filter sterilisiert werden.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)