NGLYFL-RO

N-Glycosidase F

recombinant form of the gene from Flavobacterium meningosepticum

• Synonym(e): N-Glykosidase F, PNGase F, Peptid-N-Glycosidase F, Peptid-N⁴-(Acetyl-β-glucosaminyl)-Asparaginamidase
• EC-Nummer: 3.5.1.52 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC-Code: 12352204

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bacterial (Flavobacterium meningosepticum)
• Qualitätsniveau: 100
• Rekombinant: expressed in E. coli
• Konjugat: (N-linked)
• Assay: ≥90% (SDS-PAGE)
• Form: lyophilized
• Spezifische Aktivität: >25000 units/mg protein
• Mol-Gew.: 35.5 kDa
• Aufgereinigt durch: electrophoresis
• Verpackung: pkg of 100 U (11365185001); pkg of 250 U (11365193001)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Lagerbedingungen: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• Methode(n): activity assay: suitable
• Farbe: colorless
• Optimaler pH-Wert: 7.0-8.0
• Löslichkeit: water: soluble
• Eignung: suitable for enzyme test
• Fremdaktivität: Endoglycosidase F, none detected; a-Fucosidase, present; b-Galactosidase, present; b-N-Acetylhexosaminidase, present; dA(17h ≤100 units, present
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

N-Glycosidase F (PNGase F) ist ein hochwirksames Enzym, das an der Glycosylamin-Bindung hydrolysiert. Es hilft auch bei der Bildung eines kohlenhydratfreien Peptids und Oligosaccharids mit der di-N-Acetylchitobiose-Einheit.

N-Glycosidase F, auch als PNGase F bezeichnet, ist ein Asparaginamidase-Enzym, das aus Flavobacterium meningosepticum gewonnen wird. Es wird weithin als unverzichtbares Werkzeug in der Proteinforschung zur Untersuchung und Analyse der N-Glykosylierung eingesetzt.

Spezifität

Hydrolysiert alle Typen von N-Glycan-Ketten von Glycopeptiden und Glycoproteinen, außer wenn diese α1,3-verknüpfte Fucosereste tragen, die bei Insekten- und Pflanzen-Glycoproteinen vorhanden sind. Frei von kontaminierenden proteolytischen Aktivitäten (x = H oder Zucker) gemäß aktueller Qualitätskontrollverfahren.

Anwendung

N-Glycosidase F wird zur Deglykosylierung von N-Glykoproteinen verwendet.

Verwenden Sie N-Glycosidase F zur Spaltung aller Typen von Asparagin-gebundenen N-Glykanen, vorausgesetzt dass sowohl die Aminogruppe als auch die Carboxylgruppe in einer Peptidverbindung vorhanden sind und das Oligosaccharid mindestens die Länge der Chitobiose-Kerneinheit aufweist. Die Reaktionsprodukte sind Ammoniak, Aspartamsäure (in der Peptidkette) und das komplette Oligosaccharid.
Hinweis: N-Glycosidase F, rekombinant ist auch als Lösung erhältlich.

Einheitendefinition

Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die 1 nmol Dabsylfibringlycopeptid oder 0,2 nmol Dansylfetuinglycoprotein innerhalb 1 Minute bei 37 °C und einem pH von 7,8 hydrolysiert.

Physikalische Form

Klare, farblose Lösung nach der Rekonstituierung

Angaben zur Herstellung

Lagerbedingungen (Arbeitslösung): 2 bis 8 °C
Die rekonstituierte Lösung ist bei 2 bis 8 °C mindestens vier Wochen haltbar.

Rekonstituierung

Das Auflösen des Inhalts in 0,1 ml nachdestilliertem Wasser (Packung mit 100 Einheiten) bzw. 0,25 ml bidestilliertem Wasser (Packung mit 250 Einheiten) ergibt eine Konzentration von 100 mM Natriumphosphat-Puffer, 25 mM EDTA, pH 7,2.
Hinweis: N-Glycosidase F, rekombinant ist auch als Lösung mit 50 % Glycerin erhältlich.

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 13 - Non Combustible Solids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash