FPCRN-RO

FastStart^™ Taq-DNA-Polymerase, dNTPack

• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.21

Eigenschaften

• Qualität: Molecular Biology
• Qualitätsniveau: 100
• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for ≤1,250 reactions (04738403001); sufficient for ≤2,500 reactions (04738420001); sufficient for ≤250 reactions (04738357001); sufficient for ≤50 reactions (04738314001); sufficient for ≤500 reactions (04738381001)
• Spezifische Aktivität: 5 U/μL
• Verpackung: pkg of 1,000 U (04738381001 [4x250 U]); pkg of 2,500 U (04738403001 [10x250 U]); pkg of 5,000 U (04738420001 [20x250 U]); pkg of 100 U (04738314001); pkg of 500 U (04738357001 [2x250 U])
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 40 U/mL; 55 U/mL
• Parameter: 72 °C optimum reaction temp.
• Methode(n): DNA amplification: suitable; PCR: suitable
• Farbe: colorless
• pH-Wert: 8.0-9.0
• Löslichkeit: water: miscible
• Eignung: suitable for molecular biology
• Anwendung(en): life science and biopharma
• Fremdaktivität: nicking activity, none detected (up to 10U w.pBR 322-DNA); ribonuclease, none detected; unspecified endonuclease, none detected
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das Enzym dNTPack enthält FastStart Taq DNA Polymerase und eine gebrauchsfertige Lösung von Nukleotiden für die PCR. FastStart Taq DNA Polymerase ist ein vielseitiges Enzym, das für eine Vielzahl von Anwendungen und auf unterschiedlichen Instrumentenplattformen eingesetzt werden kann. Diese modifizierte, thermostabile, rekombinante Taq DNA Polymerase ist bei Temperaturen unter +75 °C inaktiv, wird aber durch einen 2- bis 4-minütigen Hitzeaktivierungsschritt bei +95 °C aktiviert. Da sie bei niedrigen Temperaturen inaktiv ist, kann die FastStart Taq DNA Polymerase keine unspezifischen Primer-Template-Hybride verlängern, die sich bei diesen Temperaturen bilden können. Ein optimiertes PCR-Puffersystem und eine GC-RICH-Lösung werden mitgeliefert, damit das Enzym für viele unterschiedliche Templates eingesetzt werden kann.

Anwendung

FastStart^™ Taq DNA Polymerase ist eine thermostabile, chemisch modifizierte Form einer rekombinanten Taq DNA Polymerase. Das Enzym ist während der Vorbereitung der PCR bei +15 bis +25 °C inaktiv und wird dann bei +95 °C während der initialen Denaturierung aktiviert. Dieses Enzym liefert aufgrund seines einzigartigen Enzymdesigns und des optimierten Puffersystems hervorragende Ergebnisse. Die FastStart Taq DNA Polymerase ist ein ideales Hilfsmittel für die Heißstart-PCR, weil das Enzym während der PCR-Vorbereitung und vor dem initialen Denaturierungsschritt inaktiv bleibt. Es kann für folgende PCR eingesetzt werden:

• Heißstart-PCR bis zu 3 kb
• Heißstart-RT-PCR bis zu 3 kb
• Multiplex-PCR
• Schwierige Templates, z. B. Sekundärstrukturen oder GC-reiche Sequenzen
• Automatisierte PCR, z. B. Verarbeitung bei Raumtemperatur
• Quantitative PCR (qPCR)

Für optimalen Anwendungskomfort steht der doppelt konzentrierte, gebrauchsfertige FastStart PCR-Master zur Verfügung.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Volumenaktivität: 5 U/μl
Jeder dNTPack enthält 10 mM additivfreie Natriumsalz-Nukleotide in einer gebrauchsfertigen Mischung.

• Höhere Spezifität, Sensitivität und Ausbeute:

Heißstart-PCR vereinfacht die Vorbereitung der PCR.

• Automatische Vorbereitung.

Die Enzymmischung ist 24 Stunden bei +15 bis +25 °C haltbar.

• Vermeiden von PCR-Kontaminationsübertragung.

Einbau von dUTP und Vorbehandlung der PCR-Master-Mischungen mit Uracil-DNA Glycosylase.

• Kosteneffizient.

Verwenden der komfortablen Fertiglösung von Nukleotiden in PCR-Qualität.

Verpackung

1 Kit mit 6 Komponenten

Qualität

Jede Charge wird mit humangenomischer DNA und Primern, die spezifisch für das 365 bp-Fragment des menschlichen tPA-Gens sind, und einem 284 bp-Fragment des Apo E-Gens mit 74 % GC-Gehalt auf ihre korrekte Funktionalität geprüft. Jede Charge wird auch auf das Fehlen von Exo- und Endonukleasen sowie auf Nicking-Aktivität getestet.
Weitere Details finden Sie in den entsprechenden Anwendungshinweisen.

Einheitendefinition

Eine Einheit FastStart-DNA-Polymerase ist definiert als die Enzymmenge, die innerhalb von 30 Minuten bei +75 °C unter den unter ′Assay′ angegebenen Assay-Bedingungen 10 nmol der gesamten Desoxyribonukleosidtriphosphate in Säure-fällbare DNA einbaut.

Assay: 1 μg M13mp9ss DNA, 0,3 μg M13 Sequenzierungsprimer und 0,1 μCi [α--^32P] dCTP werden mit unterschiedlichen Mengen aus Einheiten der FastStart Taq DNA Polymerase in 50 μl Inkubationspuffer bei 65 °C für 60 min inkubiert. Es wird die Menge der eingebauten dNTPs bestimmt.

Volumenaktivität: 5 U/μl

Lagerung und Haltbarkeit

Behälter dicht verschlossen an einem trockenen und gut belüfteten Ort aufbewahren.

Sonstige Hinweise

Nur für die Life Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Heißstart-Protokolle verbessern die Spezifität, Sensitivität und Ausbeute der PCR. Thermolabile blockierende Gruppen bewirken, dass das modifizierte Enzym bei Temperaturen von +15 bis +25 °C inaktiv ist. Wenn Primer unspezifisch binden, findet keine Elongation statt. Das Enzym wird durch die Entfernung der blockierenden Gruppen bei +95 °C für 2 bis 6 Minuten aktiviert. PCR-Produkte mit 3′-Single-A-Überhängen werden produziert, die ideal für die T/A-Klonierung sind. Zur Vorbeugung von Verschleppung bei der PCR dienen der PCR Nucleotide Mix^PLUS und die Uracil-DNA-Glycosidase, hitzelabil.

Rechtliche Hinweise

HINWEIS FÜR DEN KÄUFER: BESCHRÄNKTE LIZENZ<br />Die Verwendung dieses Produkts unterliegt dem US-Patent Nr. 6,127,155 und den entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA.  Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers.  Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen.  Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Human- oder veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche.  Alle anderen Verwendungen, die keine interne Forschung und keine human- und veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen sind, erfordern eine gesonderte Lizenz von Thermo Fisher Scientific. Weitergehende Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Roche erhalten Sie von der Lizenzabteilung von Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA oder Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Straße 116, 68305 Mannheim, Deutschland.  Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Thermo Fisher Scientific erhalten Sie von der Lizenzabteilung von  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.</ br>HINWEIS AN DEN KÄUFER: BESCHRÄNKTE LIZENZ<br />Die Verwendung dieses Produkts unterliegt den US-Patenten Nr. 5,677,152 und 5,773,258 sowie den entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA.  Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers.  Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen.  Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen.  Human- oder veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche.  Alle anderen Verwendungen, die keine interne Forschung und keine human- und veterinärdiagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen sind, erfordern eine gesonderte Lizenz von Thermo Fisher Scientific. Weitergehende Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Roche erhalten Sie von der Lizenzabteilung von Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA oder Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Straße 116, 68305 Mannheim, Deutschland.  Weitere Informationen zum Erwerb von Lizenzen von Thermo Fisher Scientific erhalten Sie von der Lizenzabteilung von  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.

FastStart is a trademark of Roche

Nur Kit-Komponenten

• FastStart Taq DNA Polymerase, in storage and dilution buffer 5 U/μl
• PCR Reaction Buffer, with 20 mM MgCl₂ 10x concentrated
• PCR Reaction Buffer, without MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• GC-RICH Solution 5x concentrated
• PCR Nucleotide Mix

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash