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DOTAP Liposomales Transfektionsreagenz

>99% (TLC), liquid, suitable for transfection

• Synonym(e): DOTAP-methosulfat, Liposomales Transfektionsreagenz, Dotap, Transfektionsreagenz, Dotap, N-(2,3-Dioleoyloxy-1-propyl)trimethyl-ammoniummethylsulfat, Transfektionsreagenz
• Empirische Formel (Hill-System): C₄₃H₈₃NO₈S
• CAS-Nummer: 144189-73-1
• Molekulargewicht: 774.19
• MDL-Nummer: MFCD16660441
• UNSPSC-Code: 41106502
• PubChem Substanz-ID: 329749323

Eigenschaften

• Beschreibung: N-[1-(2,3-Dioleoyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium methyl-sulfate
• Qualitätsniveau: 100
• Assay: >99% (TLC)
• Form: liquid
• Verpackung: pkg of 5 × 400 μL (10 U/μl)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Methode(n): transfection: suitable
• Lagertemp.: 2-8°C
• SMILES String: [H]C(C[N+](C)(C)C)(OC(CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)=O)COC(CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC)=O.O=S([O-])(OC)=O
• InChI: 1S/C42H80NO4.CH4O4S/c1-6-8-10-12-14-16-18-20-22-24-26-28-30-32-34-36-41(44)46-39-40(38-43(3,4)5)47-42(45)37-35-33-31-29-27-25-23-21-19-17-15-13-11-9-7-2;1-5-6(2,3)4/h20-23,40H,6-19,24-39H2,1-5H3;1H3,(H,2,3,4)/q+1;/p-1/b22-20-,23-21-;
• InChIKey: RSMRWWHFJMENJH-LQDDAWAPSA-M

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

DOTAP Liposomales Transfektionsreagenz ist eine liposomale Formulierung des kationischen Lipids DOTAP. Im Gegensatz zu anderen liposomalen Reagenzien produziert es hocheffiziente Transfektionen, ob mit oder ohne Serum. Es kann auch erfolgreich für In-vivo-Anwendungen eingesetzt werden. Ein Mischen von DOTAP mit DNA resultiert in der spontanen Bildung von stabilen Komplexen. Diese Komplexe können direkt dem Zellkulturmedium zugegeben werden. Diese Methode der DNA-Übertragung ist sehr schonend, da die bei der Lipofektion oder bei anderen Transfektionsmethoden oft auftretenden zytotoxischen Wirkungen vermieden werden.

Anwendung

Das DOTAP (N-[1-(2,3-Dioleoyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium-methylsulfat) Liposomale Transfektionsreagenz ist eine liposomale Formulierung des kationischen Lipids DOTAP. DOTAP kann für die hocheffiziente Transfektion von DNA verwendet werden, einschließlich der Transfektion von künstlichen Hefechromosomen (YAC) in eukaryotische Zellen für eine transiente oder stabile Genexpression, und eignet sich auch für die effiziente Übertragung von anderen negativ geladenen Molekülen, wie RNA, Oligonukleotide, Nukleotide, Ribonukleoprotein-(RNP)-Komplexe und Proteine, in Forschungsproben aus Säugetierzellen.

Kationische Liposomen bildende Verbindung für die Transfektion von DNA, RNA und anderen negativ geladenen Molekülen in eukaryotische Zellen. Die Mischung von DOTAP und DNA führt zu einer spontanen Bildung von stabilen Komplexen, die dem Zellkulturmedium direkt hinzugefügt werden können. Diese Komplexe verschmelzen mit der Zellmembran und setzen DNA im Zytoplasma frei. Die Zellen werden effizient transfektiert und haben keine zytotoxische Wirkung. Verwenden Sie ca. 5–10 μg DOTAP pro μg DNA und ca. 10–20 μg DOTAP pro ml Zellkulturmedium. Die optimale Arbeitskonzentration und Transfektionszeit ist u. a. von der verwendeten Zelllinie und der Art des geladenen Materials (RNA, DNA, Protein) abhängig.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Einfache Anwendung: Die Lipiddispersion wird einfach mit der DNA-Lösung vermischt und dann direkt auf die Zellen aufgetragen
• Hocheffektiv: 5- bis 100-mal effektiver als die Calciumphosphat- oder DEAE-Dextran-Methode
• Schonend: Keine zytotoxischen Wirkungen
• Flexibel: Gleiche Wirksamkeit mit oder ohne Serum Wirksam bei einem weiten Bereich von Spezies (z. B. Insektenzellen, Säugetierzellen) und einer Vielfalt an verschiedenen Zelltypen. Kann sowohl für transiente als auch stabile Tranfektionsverfahren eingesetzt werden.
• Wässrige Dispersion (Liposomen) in MBS (MES-gepufferte Kochsalzlösung, pH 6,2) (unter Argongas in Flaschen abgefüllt), 1 mg/ml, sterilfiltriert.

Angaben zur Herstellung

Arbeitskonzentration: Ca. 5 - 10μg DOTAP/μg DNA und 10 - 20μg DOTAP/ml Zellkulturmedium.
Die optimale Arbeitskonzentration hängt von mehreren Parametern ab, wie z. B. verwendete Zelllinie, Konzentration und Art der Nukleinsäure (DNA, RNA) und Inkubationszeit. Es ist wichtig, dass die Transfektionsbedingungen für den jeweils untersuchten ZellItyp optimiert werden.
Zytotoxizität: Nicht zytotoxisch bis zu einer Konzentration von 100μg/ml (PBL-Zellen, HeLa-Zellen).

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: nwg
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash