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69451-M

Sigma-Aldrich

Kompetente BL21(DE3)pLysS-Zellen – Novagen

Escherichia coli, rod shaped

Synonym(e):

BL21 cell line, Novagen competent cells

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0.4 ML
186,00 €

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Voraussichtliches Versanddatum15. April 2025

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About This Item

UNSPSC-Code:
41106202
NACRES:
NA.81

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Produktbezeichnung

Kompetente BL21(DE3)pLysS-Zellen – Novagen, BL21 host strain that expresses T7 RNA polymerase and also encode T7 lysozyme that suppresses basal expression of toxic target proteins prior to induction.

Biologische Quelle

Escherichia coli

Qualitätsniveau

100

Hersteller/Markenname

Novagen®

Lagerbedingungen

OK to freeze
avoid repeated freeze/thaw cycles

Wachstumsmodus

adherent or suspension

Morphologie

rod shaped

Methode(n)

microbiological culture: suitable

Zelltransformation

transformation efficiency: >2×107 cfu/μg

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−70°C

Allgemeine Beschreibung

Genotyp: F-ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CamR)





Dieses Produkt enthält genetisch veränderte Organismen (GVO). In der EU sind GVO durch die Richtlinien 2001/18/EG und 2009/41/EG des Europäischen Parlaments und Rates und ihre nationale Umsetzung in den Mitgliedstaaten reguliert. Wir sind aufgrund dieser Vorschriften gesetzlich verpflichtet, bestimmte Informationen zu Ihrer Person und zu der Einrichtung, in der die GVO verwendet werden, anzufordern. Das Endverbleibserklärungsformular (EVE-Formular) ist hier here zu finden.
BL21-Stämme sind die am häufigsten verwendeten Wirte für die Proteinexpression aus pET-Rekombinanten und haben den Vorteil, dass ihnen sowohl lon- als auch ompT-Proteasen fehlen.

DE3 weist darauf hin, dass der Wirt ein Lysogen von λDE3 ist und daher eine chromosomale Kopie des T7-RNA-Polymerase-Gens enthält, das durch den lacUV5-Promoter kontrolliert wird. Solche Stämme eignen sich zur Herstellung von Protein aus Zielgenen, die in pET-Vektoren kloniert werden, wobei IPTG als Induktor verwendet wird.

pLysS-Stämme exprimieren T7-Lysozym, das die basale Expression von T7-RNA-Polymerase vor der Induktion weiter unterdrückt, wodurch die pET-Rekombinanten, welche Zielproteine codieren, die das Zellwachstum und die Zellviabilität beeinflussen, stabilisiert werden.
BL21-Wirtsstamm, der die T7-RNA-Polymerase exprimiert und auch für T7-Lysozym kodiert, das die basale Expression von toxischen Zielproteinen vor der Induktion unterdrückt.

Komponenten

0,4 ml1 mlKomponente

•2 × 0,2 ml5 × 0,2 mlKompetente BL21(DE3)pLysS-Zellen

•2 × 2 ml4 × 2 mlSOC-Medium

•2 ng2 ngTest-Plasmid

Warnhinweis

Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)

Rechtliche Hinweise

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 2

Analysenzertifikate (COA)

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Fragen

1-2 von 2 Fragen  

  1. Does chloremphenicol need to be added to the culture media to maintain the presence of the pLys plasmid?

    1 Antwort

    1. The T7 lysozyme is expressed from a plasmid conferring resistance to chloramphenicol. 69451 will need to be cultured with chloramphenicol to maintain this plasmid.

      Hilfreich?

  2. What is the difference between the strain expressing pLysE and pLysS?

    1 Antwort

    1. Products 69451-M and 70236-M are exactly the same competent cells. The only difference is in the packaging. The 70236 is already in 50uL aliquots, which are single-use, each aliquot is used for one reaction. This reference is available in two sizes of 11 or 22 reactions. While product 69451 is available in single 0.4 or 1mL volumes which may be thawed once and dispensed to smaller aliquots.
      The difference between the 69451-M/70236-M products and the CMC0015 BL21 is the type of plasmid that they express for the T7 lysozymes. The expression of T7 lysozyme reduces the basal expression of the target genes, inhibiting the T7 RNA polymerase. Specifically, with the expression of the plasmid pLysE (Ref. CMC0015) a higher expression of the levels of T7 Lysozime is obtained in comparison with the plasmid pLysS (ref. 69451-M/70236-M). Consequently, with reference CMC0015 there is even less risk of basal expression of the target protein in the absence of IPTG stimulation. This could be particularly relevant for toxic proteins that could affect competent cell viability.

      Hilfreich?

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