17-10191

Cell Comb^™ Scratch-Assay

• Synonym(e): Cell layer wound repair assay
• UNSPSC-Code: 12352207
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.84

Eigenschaften

• Hersteller/Markenname: Cell Comb^™; Chemicon^®; QCM
• Qualitätsniveau: 100
• Methode(n): activity assay: suitable; cell based assay: suitable; western blot: suitable
• Versandbedingung: ambient

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Lesen Sie unseren Anwendungshinweis in Nature Methods!
Hier klicken!

Die Zellmigration kann durch eine Reihe von Verfahren untersucht werden, doch der Scratch-Assay ist durch die Einfachheit der erforderlichen Materialien, des Experimentenaufbaus, der Datensammlung und -interpretation weiterhin ein beliebtes Verfahren (Lian, C., et al., 2007; Cory, G., 2011). Der Scratch-Assay wird in der Regel durch das Ankratzen einer konfluenten Zellmonoschicht mit einer Pipettenspitze, um einen schmalen, wundenähnlichen Spalt zu erzeugen, gestartet. Kurz nach dem Verletzen initiieren die Zellen am Rand der Wunde ein Programm zum Migrieren in den Spalt, ein Prozess, der so lange läuft, bis der Spalt vollständig neu mit Zellen besiedelt ist. Das Ausmaß der Wundschließung wird in der Regel durch Lichtmikroskopie beobachtet und Proteinexpressionsmuster, die während des Wundheilungsprozesses auftreten, können mittels Immunfluoreszenz charakterisiert werden.

Fortschritte beim Verstehen der Reparaturmechanismen von verletzten Zellmonoschichten wurden durch die Entwicklung neuer Verfahren zum Durchführen des Assays in Multiwell-Platten erleichtert. Zu diesen Verfahren zählen das Zufügen von Wunden an existierenden Monoschichten in Wells oder das Verdecken der Mitte des Wells bei der Monoschichtbildung, um einen Spalt zu erzeugen (Yarrow, J.C., et al., 2004; Simpson K.J., et al., 2008; Gough, W., et al., 2011). Jedes Verfahren involviert die Quantifizierung des Ausmaßes der Zellmigration in den Spalt.

Diese Verfahren sind jedoch nicht optimal für die biochemische Analyse der molekularen Ereignisse, welche die Wundreparatur vermitteln. Zum Beispiel kann die geringe Größe einer grundlegenden durch Pipettenspitzen erzeugten Wunde unzureichendes und mangelhaftes Material für die biochemische Analyse bereitstellen. Das Verwenden derselben Pipettenspitze zum Ankratzen einer Zellmonoschicht in einer größeren Platte ist aufwendig und nicht reproduzierbar und der Anteil von migrierenden Zellen gegenüber ruhenden Zellen ist gering. Mehrere Verfahren zum Aufskalieren des Scratch-Assays durch das Erzeugen mehrerer Wunden in Zellmonoschichten wurden beschrieben, doch diese Verfahren erfordern spezielle Werkzeuge (Turchi, L., et al., 2002; Lauder, H., et al., 1998).

EMD Millipore hat den Cell Comb^™ Scratch-Assay entwickelt, um die Notwendigkeit für ein einfach zu verwendendes Werkzeug zum Erzeugen mehrerer Kratzwunden zu adressieren. Das angemeldete Patent für den Cell Comb<TMSYMBOL></TMSYMBOL> wurde optimiert, um ein Scratch-Feld mit hoher Dichte anzuwenden, um den Bereich der Wundkanten zu maximieren und gleichzeitig ausreichend unbeschädigte Zellen zur Migration in den Spalt zu erhalten. Diese Form der Wunden mit hoher Dichte erzeugt einen hohen Anteil migrierender Zellen gegenüber ruhenden Monoschichtzellen, was einen sensitiven Nachweis der auftretenden biochemischen Ereignisse, insbesondere das Migrieren der Zellpopulation, ermöglicht.

Anwendung

Der Cell Comb Scratch-Assay wurde optimiert, um ein Scratch-Feld mit hoher Dichte anzuwenden, um den Bereich der Wundkanten zu maximieren und gleichzeitig ausreichend unbeschädigte Zellen zur Migration in den Spalt zu erhalten.

EMD Millipores angemeldetes Patent für den Cell Comb^™ Scratch-Assay adressiert die Notwendigkeit für ein leicht zu verwendendes Werkzeug zum Erzeugen mehrerer Kratzwunden und der Cell Comb wurde optimiert, um ein Scratch-Feld mit hoher Dichte anzuwenden, um den Bereich der Wundkanten zu maximieren und gleichzeitig ausreichend unbeschädigte Zellen zur Migration in den Spalt zu erhalten. Diese Form der Wunden mit hoher Dichte erzeugt einen hohen Anteil migrierender Zellen gegenüber ruhenden Monoschichtzellen, was einen sensitiven Nachweis der auftretenden biochemischen Ereignisse, insbesondere das Migrieren der Zellpopulation, ermöglicht.

Forschungskategorie
Zellstruktur

Verpackung

Ausreichend Materialien zum Durchführen von 6 Scratch-Assays

Komponenten

Cell Combs: 6 einzeln verpackte Einweg-Combs.

Rechteckige Zellkulturplatten: 6 einzeln verpackte, Zellkultur-behandelte Platten zu 86 mm x 128 mm.

Die Cell Combs und Zellkulturplatten wurden einer Elektronenstrahlbestrahlung unterzogen, um die Möglichkeit einer Kontamination zu minimieren.

Lagerung und Haltbarkeit

Lagern Sie Cell Combs und Zellkulturplatten bei Raumtemperatur. Innerhalb von 1 Jahr nach Empfang verwenden.

Rechtliche Hinweise

CELL COMB is a trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids