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E8263

Sigma-Aldrich

Nucleasas Benzonase® ultrapuras

≥250 units/μL, ≥99% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in E. coli, buffered aqueous glycerol solution, ultrapure grade

Sinónimos:

Endonucleasas from Serratia marcescens

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About This Item

Número de CAS:
9025-65-4
Comisión internacional de enzimas:
3.1.30.2 (BRENDA, IUBMB)
MDL number:
MFCD00131010
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54

biological source

Serratia marcescens

Quality Level

200

recombinant

expressed in E. coli

grade

ultrapure grade

assay

≥99% (SDS-PAGE)

form

buffered aqueous glycerol solution

mol wt

30 kDa

concentration

≥250 units/μL

application(s)

research use

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

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Application

La enzima se ha utilizado para detectar la cantidad de ARN Tf1 que es protegida de la degradación por la nucleasa Benzonase. El elemento Tf1 de Schizosaccharomyces pombe es un retrotransposón terminal largo con repeticiones, que codifica las proteínas funcionales proteasas, transcriptasa inversa e integrasas. También se ha utilizado en el fraccionamiento de sedimentos nucleares y extractos nucleares obtenidos de los lisados celulares.
La nucleasa Benzonase ultrapura, o endonuclesa de Serratia marcescens, se ha utilizado en un estudio para evaluar el efecto del dodecilbencenosulfonato de sodio y agentes antiespumantes en la actividad endonucleasa de Serratia marcescens. La endonucleasa de Serratia marcescens se ha estudiado también para investigar la estructura de subunidades de la cromatina.
Utilizado para eliminación de los ácidos nucleicos de las muestras proteicas.

Biochem/physiol Actions

Benzonase® es una endonucleasa producida mediante ingeniería genética a partir de Serratia marcescens. La proteína es un dímero de subunidades de 30 kDa con dos enlaces disulfuro esenciales. Esta endonucleasa ataca y degrada todas las formas de ADN y ARN (monocatenarias, bicatenarias, lineales y circulares) y es eficaz en una amplia variedad de condiciones de funcionamiento. Digiere completamente los ácidos nucleicos a oligonucleótidos terminados en 5′-monofosfato de 3 a 5 bases de longitud. Esto es ideal para separar los ácidos nucleicos de las proteínas recombinantes. También puede utilizarse para aplicaciones en las que es deseable la digestión completa de los ácidos nucleicos. Además, reduce la viscosidad en los extractos proteicos y evita la aglutinación celular. El pretratamiento de una muestra proteica con esta enzima mejora su resolución en electroforesis en gel en 2D al eliminar los ácidos nucleicos ligados. Se ha observado que el pH óptimo para la actividad de la enzima está comprendido entre 8,0 y 9,2.
Digiere el ADN y el ARN nativos o desnaturalizados por calor.

Unit Definition

Una unidad digerirá el ADN de esperma de salmón tratado con ultrasonidos a oligonucleótidos solubles en ácido equivalentes a ΔA260 de 1,0 en 30 minutos a pH 8,0 a 37 °C (volumen de reacción 2,625 ml).

Physical form

Disolución en glicerol al 50% que contenga Tris HCl 20 mM, pH 8,0, MgCl2 2 mM y NaCl 20 mM.

Legal Information

La nucleasa Benzonase® es suministrada por Merck KGaA, Darmstadt, Alemania y sus filiales.
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Storage Class

10 - Combustible liquids

wgk_germany

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

Eyeshields, Gloves

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