RPROTKSOL-RO

Proteinasa K recombinante, calidad PCR

Solution from Pichia pastoris

• Comisión internacional de enzimas: 3.4.23.1 (BRENDA, IUBMB)
• Código UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.21

Propiedades

• recombinante: expressed in Pichia pastoris
• Nivel de calidad: 100
• Formulario: buffered aqueous solution (18 ± mg/mL; pH 7.5)
• actividad específica: ~2.5 units/mg protein
• envase: pkg of 1.25 mL (03115887001); pkg of 25 mL (03115844001); pkg of 5 mL (03115828001)
• fabricante / nombre comercial: Roche
• pH óptimo: 6.5 and 9.5
• intervalo de pH: 4.0-12.5
• temp. de almacenamiento: 2-8°C

Descripción

Descripción general

Aproximadamente 2,5 U/mg (ensayo de cromozima); ≥30 U/mg ensayo de hemoglobina. Consulte los valores específicos del presente lote en el Certificado de Análisis.

Aplicación

• Esta proteinasa K de calidad para PCR es extremadamente eficaz en proteínas nativas y, por tanto, puede utilizarse para inactivar rápidamente las nucleasas endógenas como las ARNasas y las ADNasas. Esta propiedad hace que la proteinasa K sea particularmente adecuada para el aislamiento de ARN y ADN nativos de tejidos y líneas celulares.
• La enzima promueve la lisis celular al activar un factor autolítico bacteriano.
• La proteinasa K se utiliza también para el análisis de las estructuras de membrana al modificar las proteínas y las glucoproteínas de las superficies celulares.
• La enzima es particularmente idónea para el aislamiento de los ácidos nucleicos para reacciones de amplificación.
• La proteinasa K puede utilizarse también para eliminar los restos durante la preparación de la transferencia de colonias, y para tratar cortes de tejidos para asegurar la infiltración eficiente de la sonda durante la hibridación in situ.

Características y beneficios

La proteinasa K rompe las proteínas entres los aminoácidos X e Y (X-_↓-Y) cuando X = un aminoácidos alifático, aromático o hidrófobo e Y = cualquier aminoácido. La enzima es extremadamente eficaz en proteínas nativas y, por tanto, puede utilizarse para inactivar rápidamente las nucleasas endógenas como las ARNasas y las ADNasas.

• Elija una herramienta efectiva para la preparación de la muestra. Inactiva las ADNasas y las ARNasas de muchas especies.
• Cuente con una calidad y un rendimiento constantes. Estrictas pruebas de calidad aseguran una estabilidad óptima y un elevado rendimiento entre lotes.
• Prepare muestras en un amplio espectro de condiciones. La robusta enzima es estable a lo largo de un amplio espectro de pH y es ideal para diversas aplicaciones.
• Aproveche una enzima carente de contaminación. Se ha probado la ausencia de ARNasas y ADNasas en la enzima, y está prácticamente exenta de ADN. Es especialmente adecuada para el aislamiento de muestras para PCR.

Calidad

Esta preparación carece de ARNasas, ADNasas y ADN, según los procedimientos de control de calidad vigentes.
Ausencia de nucleasas: Cada lote se analiza en varios sustratos para asegurar la ausencia de actividad endonucleasa, exonucleasa, ribonucleasa y melladora.
Contenida de ADN: ≤10 pg/mg de enzima (determinada por el Umbral)
Grado de contaminación microbiológica: ≤5 ufc/g (determinados mediante la prueba más estricta de la Farmacopea Europea, que permite identificar el número total de bacterias aerobias viables, levaduras y hongos)

Definición de unidad

Volumen de actividad: Aproximadamente 50 U/mg de disolución (ensayo de cromozima); aproximadamente 600 U/mg de disolución (ensayo de hemoglobina). Una unidad es la actividad enzimática que hidroliza a +25 °C en 1 min, 18 mmol de Chromozym TRY (equivalente a 600 U/ml con el ensayo de hemoglobina). Consulte los valores específicos del presente lote en el Certificado de Análisis.

Nota de preparación

Activador: Para estimular la actividad proteinasa K, pueden añadirse agentes desnaturalizantes (SDS y urea). Por ejemplo, el SDS a una concentración final del 2 % puede aumentar significativamente la actividad de la proteinasa K. La optimización utilizando agentes desnaturalizantes puede aumentar la actividad proteinasa en hasta siete veces.

Disolución de trabajo: Disoluciones tampón sugeridas:
El tampón más apropiado para la proteinasa K variará de una aplicación a otra. Siga siempre las directrices de pH y temperatura del campo parámetros. Como norma general, la proteinasa K es estable y muy activa en tampones que contienen reactivos desnaturalizantes como la urea, el dodecilsulfatosódico (SDS) y las sales de guanidina.

Inhibidores: La enzima es inactivada por Pefabloc^® SC. Sin embargo, no es inactivada por iones metálicos, agentes quelantes (como el EDTA), reactivos sulfhidrilo o inhibidores de la tripsina y la quimiotripsina.

Otras notas

Para la inactivación rápida de las ARNasas y ADNasas.
La enzima puede reducir las proteínas a aminoácidos libres si se encuentra en gran exceso durante largos periodo de incubación.

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información legal

Pefabloc is a registered trademark of Pentapharm

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS08
• Palabra de señalización: Danger
• Frases de peligro: H317 - H334
• Consejos de prudencia: P261 - P280 - P284 - P304 + P340 - P333 + P313 - P342 + P311
• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): No data available
• Punto de inflamabilidad (°C): No data available