MAB5374

Anticuerpo anti-proteína huntingtina, clon mEM48

culture supernatant, clone mEM48, Chemicon^®

• Sinónimos: Huntingtin
• UNSPSC Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• biological source: mouse
• Quality Level: 100
• antibody form: culture supernatant
• antibody product type: primary antibodies
• clone: mEM48, monoclonal
• species reactivity: human
• species reactivity (predicted by homology): mouse, rat
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry: suitable; western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_002111.6
• UniProt accession no.: P42858
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... HTT(3064) , SLC6A4(6532)

Descripción

General description

La corea de Huntington (HD) es una enfermedad hereditaria, progresiva y neurodegenerativa caracterizada por cambios en la personalidad, deterioro motor y demencia subcortical. La base molecular de la enfermedad implica la expansión del trinucleótido CAG, que codifica la poliglutamina en el primer exón de un gen del cromosoma cuatro (4p16.3), que normalmente produce una proteína huntingtina de 3136 a.a. (~350 kDa) ampliamente expresada con función poco clara. La proteína se encuentra en la región perinuclear junto con los microtúbulos, y en la región del centrosoma junto con la gamma-tubulina. La huntingtina es necesaria para la supervivencia neuronal y participa en el tráfico de las vesículas sinápticas y la unión de los microtúbulos, y puede que también desempeñe un papel en la apoptosis. En la corea de Huntington, las células neuronales con la forma mutante de huntingtina poseen agregaciones intranucleares del fragmento N-terminal, causando inclusiones dañinas en ubicaciones perinucleares y la muerte de las neuronas estriatales. La huntingtina nativa y la anti-huntingtina reducen la agregación y la toxicidad celular de la forma mutante de la huntingtina en los modelos de corea de Huntington en células de mamíferos. Se sabe que la huntingtina interacciona con la GAPDH, HAP-1, SP1 y TAFII130.

Specificity

Reacciona con la proteína huntingtina humana (tanto nativa como recombinante). El MAB5374 reacciona con la huntingtina mutante en pacientes y animales transgénicos que expresan diferentes números de repeticiones (de 82 a 150 glutaminas). Por lo tanto, debe reconocer diferentes formas de huntingtina mutante.

Immunogen

Proteína de fusión GST de los primeros 256 aminoácidos de la huntingtina humana con la deleción del tramo de poliglutamina.

Application

Categoría de investigación
Neurociencia

Detección de la proteína huntingtina con este anticuerpo anti-proteína huntingtina, clon mEM48, validado para utilizar en IC, IH y WB.

Inmunohistoquímica:
1:50-1:100 de un lote anterior con ABC en tejido fijado con paraformaldehído al 4 %. El tampón de dilución sugerido es PBS que contenga BSA al 3 %. El anticuerpo actúa en cortes de tejido incluido en parafina.
El tampón de dilución sugerido es PBS que contenga BSA al 3 %. El anticuerpo actúa en cortes de tejido incluido en parafina. Yu, Z et al (2002) Hum. Mole. Genetics 11(8):905-914. (http://hmg.oxfordjournals.org/cgi/content/full/11/8/905) para buenos métodos de IHC y fotos de mEM48 en tejidos de roedores con material transgénico humano.

Inmunocitoquímica:
se sugiere una ligera fijación con PFA al 4 % seguida de incubación con triton X-100 al 0,1 % antes del bloqueo.
Se utilizó un lote anterior de este anticuerpo en IC.

Inmunotransferencia Western:
1:50-1:500 utilizando ECL dependiendo del nivel de proteína mutante. El tampón de dilución recomendado es PBS que contiene BSA al 3 % o PBS que contiene leche desnatada al 5 %.
Las preparaciones de fracción nuclear mejoran las señales; proteína monómera ~80 kDa; son comunes agregados que pueden tener un tamaño de >200 kDa.

El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.

Subcategoría de investigación
Enfermedades neurodegenerativas

Quality

Evaluada habitualmente mediante inmunotransferencia Western en lisados HEK293.

Análisis mediante inmunotransferencia Western:
una dilución 1:1 000 de este lote permitió detectar la proteína huntingtina en 10 μg de lisados HEK293.

Target description

Más de 200 kDa

Physical form

IgG monoclonal murina de sobrenadante de cultivo que no contiene conservantes.

Sin purificar

Storage and Stability

Estable durante 6 meses a -20ºC en alícuotas no diluidas desde la fecha de recepción.
Recomendaciones de manipulación: Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.

Analysis Note

Control
Lisado de corteza cerebral humana sana, muestras de corteza cerebral de ratones con HD o ratones naturales

lisados HEK293

Other Notes

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

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CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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