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L2524

Sigma-Aldrich

Liticasi

Lyticase from Arthrobacter luteus

lyophilized powder, ≥2,000 units/mg protein, Protein ≥20 % by biuret

Sinonimo/i:

Enzima di lisi, Liticasi batterica

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About This Item

Numero CAS:
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54

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Origine biologica

bacterial (Arthrobacter luteus)

Livello qualitativo

Stato

lyophilized powder

Attività specifica

≥2,000 units/mg protein

Composizione

Protein, ≥20% biuret

tecniche

cell based assay: suitable

Compatibilità

suitable for cell lysis

applicazioni

diagnostic assay manufacturing

Temperatura di conservazione

−20°C

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Applicazioni

La liticasi ottenuta da Arthrobacter luteus è stata usata per lisare la parete cellulare del micete per isolarne il DNA.[1][2][3]
La liticasi ricavata da Arthrobacter luteus è stata impiegata:
  • per la trasformazione di cellule in sferoplasti
  • come componente di una soluzione di digestione per l'incubazione di cellule di lievito ai fini della digestione della parete cellulare
  • nell'idrolisi enzimatica del precipitato di micelio per la preparazione dei protoplasti

Azioni biochim/fisiol

L'enzima liticasi è spesso utilizzato nella ricerca sui miceti, in particolare per l'identificazione delle specie mediante tecniche basate sulla reazione a catena della polimerasi (PCR). È in grado di scindere i legami β (1→3) e β (1→4) tra le unità di glucosio. Il lisozima funge da indicatore della risposta dell'ospite mediata dai macrofagi, è correlato alla morte dei globuli bianchi e presenta un elevato tasso di turnover. Livelli elevati di lisozima sierico sono stati osservati in varie condizioni infiammatorie croniche, malattie infiammatorie intestinali, disturbi ematici e disturbi renali. Il lisozima di tipo c dall'albume d'uovo di gallina è comunemente usato come modello per lo studio della struttura e della funzione delle proteine. La muramidasi mostra principalmente un'attività battericida contro i batteri Gram-positivi. Il metodo descritto nel bollettino per la determinazione delle masse molecolari mediante cromatografia di filtrazione su gel è una versione modificata di tecniche esistenti già pubblicate. Gli standard proteici inclusi in questo kit possono essere compatibili con altri sistemi cromatografici come la cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC). Tuttavia, alcuni sistemi tampone possono influenzare i volumi di eluizione dell'albumina e dell'anidrasi carbonica. Le proteine contenute in questo kit hanno masse molecolari comprese nell′intervallo tra 29 kDa e 699 kDa.
La liticasi idrolizza il poli-β(1→3)-glucosio come ad esempio il glucano delle pareti cellulari del lievito.
Le cellule di lievito sono difficili de lisare perché la loro parete cellulare può formare capsule o spore resistenti. L'estrazione del DNA dal lievito può avvenire utilizzando enzimi litici, come la liticasi, che inducono la formazione di sferoplasti parziali,[4] che poi vengono lisati per ottenere il rilascio del DNA. La liticasi è preferibile per la digestione della parete cellulare di lievito, generando sferoplasti dai miceti per la successiva trasformazione. Ha attività β-(1-→3)-glucan-laminaripentaoidrolasica oltre ad attività β-(1→3)-glucanasica, proteasica e mannanasica.[5] La liticasi si usa per cellule di lievito delle specie di Candida, Debaryomyces, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Eremotheciume Schwanniomyces.[6]

Definizione di unità

Un′unità produce una ΔA800 di 0,001 al minuto a pH 7,5 a 25 °C usando una sospensione di lievito come substrato in 3 mL di miscela di reazione.

Stato fisico

Polvere liofilizzata parzialmente purificata contenente stabilizzatori e sali di tampone di fosfato di potassio

Altre note

Solo per fini di Ricerca & Sviluppo. Non adatto per impieghi farmacologici o domestici o per altri usi. Per informazioni sui pericoli e sulle pratiche di manipolazione sicura, consultare la scheda di sicurezza.

Pittogrammi

Health hazard

Avvertenze

Danger

Indicazioni di pericolo

Consigli di prudenza

Classi di pericolo

Resp. Sens. 1

Codice della classe di stoccaggio

11 - Combustible Solids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 3

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable

Dispositivi di protezione individuale

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Protocolli

This procedure may be used for the determination of Lyticase activity using Baker’s yeast as the substrate.

Questions

1–10 of 10 Questions  
  1. How many milligrams is 10,000 units of Product L2524 Lyticase from Arthrobacter luteus?

    1 answer
    1. The milligram quantity of this product will vary from lot to lot. The vial content is dependent upon the protein content and enzymatic activity. The minimum protein content will be 20% and the minimum activity will be 2000 units per milligram of protein. As an example, a batch that reports a protein content of 20% and an activity of 5000 units per milligram protein will have a vial content of 2 mg for the 10,000 unit package size. The protein content and activity are reported in the product Certificate of Analysis. Please see the link below to review a sample or lot specific Certificate:
      https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/l2524#product-documentation

      Helpful?

  2. Is it purified downstream by affinity chromatography or is it just an ammonium sulfate precipitate?

    1 answer
    1. This product is purified by conventional chromatography following the initial ammonium sulfate precipitation process.

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  3. What is the recommended working concentration of L2524, if a typical 10mg/ml concentration of L1412 is used?

    1 answer
    1. There have been no tests conducted for product L2524 application on the fungus Aspergillus fumigatus. However, according to a citation in Vet Pathol, 2U/100 ul of fungal extraction has shown good results. The citation is titled "Panfungal Polymerase Chain Reaction for Identification of Fungal Pathogens in Formalin-Fixed Animal Tissues" and was published in July 2017. The DOI is 10.1177/0300985817698207, and the PMID is 28346123

      Helpful?

  4. What is the molecular weight of this product?

    1 answer
    1. The molecular weight of Lyticase has not been determined.

      Helpful?

  5. What is the molecular weight of this product?

    1 answer
    1. The molecular weight of Lyticase is not determined.

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  6. I see it is suggested to reconstitute Lyticase fresh. However, if that is not possible, can you store reconstituted Lyticase, L2524, at -20C? If so, for how long?

    1 answer
    1. The solution stability of this product has not been determined. However, according to Cold Spring Harbor Protocols, lyticase may be stored up to 6 months at 4 deg. C when prepared in 10 mM Tris-CL containing 20% glycerol. This has not been validated. See the link below to this citation:
      https://cshprotocols.cshlp.org/content/2017/2/pdb.rec090381.full?rss=1

      Helpful?

  7. How can I store Product L2524, Lyticase, once reconstituted?

    1 answer
    1. When lyticase is reconstituted and stored, it may be stable for no more than 4-6 hours before serious loss of activity is observed. It is suggested that fresh solutions be prepared for use.

      Helpful?

  8. How do I solubilize Product L2524, Lyticase?

    1 answer
    1. The quality control enzymatic assay protocol for Lyticase uses cold deionized water to make a solution at 500 units/mL.

      Helpful?

  9. How can Product L2524, Lyticase, be used to make yeast spheroplasts?

    1 answer
    1. The use of lyticase in combination with chitinase and glucuronidase in the preparation of spheroplasts from C. albicans has been described in the following reference:  Calvert, C.M., and Sanders, D., "Inositol Trisphosphate-dependent and -independent Ca2+ Mobilization Pathways at the Vacuolar Membrane of Candida albicans". J. Biol. Chem.  270, 7272-7280 (1995).

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  10. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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Reviews

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  1. Alabama
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    Lyticase for digestion of S cerevisiae.

    Highly active, easily dissolved in buffer, easily stored

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